시작하려면 냉동 건조 렉틴 고정 비드가 들어있는 밀봉 된 백을 실온의 벤치에 놓습니다. 책상 위에 정전기 방지 천을 놓고 휴대용 정전기 제거기를 작업 공간을 향하게 놓습니다. 정전기 방지 핀셋을 사용하여 비드를 빈 팁에 삽입하여 두 개의 스페이서 비드가 렉틴 고정 비드 사이에 배치되도록 합니다.
니퍼를 사용하여 팁 상단을 부드럽게 짜고 개구부를 닫습니다. 팁이 구부러진 경우 수동으로 곧게 펴십시오. 그런 다음 필요할 때까지 섭씨 4도의 건조제와 함께 밀봉된 봉지에 보관하십시오.
약 10마이크로리터의 분석물 단백질 용액을 10마이크로그램의 건조된 비오틴화 시약이 들어 있는 튜브에 추가합니다. 혼합물을 소용돌이치게 하여 잘 섞습니다. 그런 다음 실온에서 1000G에서 5초 동안 원심분리합니다.
빛에서 멀리 떨어진 실온에서 1시간 동안 튜브를 배양합니다. 이제 샘플에 90마이크로리터의 프로빙 버퍼를 추가하여 배양하기 전에 10배 희석합니다. 자동 반응 측정 장치의 전면 도어를 엽니다.
액체 저장소, 준비된 팁 및 분석물을 장치의 지정된 위치로 옮깁니다. 자동 반응 측정 장치의 본체 전원 스위치를 켭니다. 화면에 표시된 진단 시작 버튼을 터치합니다.
홈 화면에서 Assay를 눌러 프로토콜을 선택합니다. 이제 assay method의 BAssaySTD 옵션을 선택하고 Next를 누릅니다. 샘플 이름을 입력하고 다음을 누릅니다.
그런 다음 팁 이름을 입력하고 다음을 다시 누릅니다. 오른쪽의 참고 사항을 확인한 다음 시작을 눌러 측정을 시작합니다. 화면이 실행 모드로 전환되는지 확인하고 완료 화살표가 강조 표시될 때까지 기다립니다.
측정이 완료되면 화면이 결과 모드로 바뀝니다. USB 메모리 스틱을 본체 측면의 포트에 삽입합니다. 결과 모드에서 내보내기를 눌러 Excel에서 추가 데이터 분석 및 개별 그래프를 작성할 수 있도록 데이터를 CSV 파일로 저장합니다.
12개의 폴리아크릴아미드 설탕에 대한 렉틴의 결합 패턴에서 뚜렷한 차이가 나타났습니다. 팁 측정을 거친 정제된 단백질 제품은 당류에 대한 특정 렉틴의 반응성이 증가한 것으로 나타났습니다.
