للبدء ، قم بتسمية أنبوبين سعة 14 ملليلتر على أنهما A و B ، وأنبوب طرد مركزي واحد سعة 15 ملليلتر على أنه C ، وأنبوب طرد مركزي واحد سعة 15 ملليلتر كنفايات. بعد الطرد المركزي للدم كله ، قم بجمع وإضافة ملليلتر واحد من معطف بافي المحضر إلى الأنبوب A.أضف 60 ميكرولترا من 0.1 مولار EDTA إلى الأنبوب A.ثم دوامة أنبوب الخرزة المغناطيسية لمدة 30 ثانية. لتشغيل أداة PBMC الآلية، قم بتشغيل الطاقة في مقدمة الجهاز.
على الشاشة الرئيسية للأداة ، حدد ملف التعريف واختر البروتوكول المطلوب. ثم أدخل حجم البداية وكرر لكل عينة. حدد جميع الأرباع التي ستستخدم نفس مجموعة الكاشف.
بعد ذلك ، قم بتحميل المواد الاستهلاكية المصنفة ونصائح التصفية وحاوية المخزن المؤقت في كل ربع من دائري الأداة وفقا للتوجيهات على شاشة أداة PBMC الآلية. بمجرد اكتمال التحميل ، قم بإزالة الأغطية من المواد الاستهلاكية والكواشف وحدد تشغيل على شاشة الجهاز. عند اكتمال التشغيل، حدد تفريغ العينات وإزالتها من المكتبة الخاصة بالجهاز.
انقل 500 ميكرولتر من الخلايا إلى كوب عينة لعدد الخلايا بدون تخفيف. بمقارنة الطريقة الآلية القائمة على الخرز بالطريقة اليدوية ، لم يتم تحديد فروق ذات دلالة إحصائية في صلاحية الخلية أو إجمالي عدد الخلايا. عالجت الطريقة اليدوية ثماني عينات في 43 دقيقة بينما استغرقت الطريقة الآلية 57 دقيقة ، بما في ذلك 35 دقيقة من المعالجة بدون تدخل.
كان متوسط صلاحية الخلايا أكبر من 90٪ ل PBMCs التي تمت معالجتها في غضون خمسة أيام وأكبر من 75٪ لتلك التي تمت معالجتها في غضون 10 أيام. انخفض متوسط غلة PBMC بنسبة 50٪ بعد خمسة أيام مقارنة بالعينات التي تمت معالجتها في غضون 24 ساعة.
