ابدأ بإعداد مخزون عدوى Pseudomonas aeruginosa من وحدات تشكيل مستعمرة معروفة لكل ملليلتر قبل الإصابة. لحبيبات مخزون العدوى ، أجهزة الطرد المركزي في 10،000 × غرام لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة. أعد تعليق الحبيبات في برنامج تلفزيوني.
بعد ذلك ، قم بإعداد ثلاثة أنابيب ميكروفوج سعة ملليلتر تحتوي إما على ماء مقطر معقم أو إيثانول أو برنامج تلفزيوني معقم. افحص حقنة هاميلتون معقمة سعة 100 ميكرولتر ، وتأكد من أن طرف الإبرة حاد ولم يطور خطافا يمكن أن يسبب صدمة كبيرة لموقع الإصابة. الآن اغسل المحقنة بالتتابع بالماء المقطر والإيثانول و PBS قبل الإصابة بالعدوى ، وقم بسحب السعة القصوى والتخلص منها.
ثم دوامة لقاح العدوى المعاد تعليقه ورسم 100 ميكرولتر كحد أقصى في حقنة هاملتون كافية لحقن 10 ميكرولتر لكل يرقة. بعد ذلك ، قم بحقن كل يرقات Galleria mellonella ب 10 ميكرولتر من اللقاح في الجزء الخلفي الأيمن. احتضان اليرقات المصابة بين 20 درجة مئوية و 42 درجة مئوية ، وهو نطاق مناسب لبقاء غاليريا ميلونيلا على قيد الحياة.
تحضير مجموعة واسعة من الجرعات تتجاوز النطاق العلاجي المتوقع للعامل المضاد للميكروبات مسترشدا ببيانات السمية في المختبر. حقن Galleria mellonella صحية ومعقمة في أحجام المجموعات المناسبة مع تركيزات مختلفة من مضادات الميكروبات و PBS للمركبة. لتحسين علاج العدوى البكتيرية في غاليريا ميلونيلا ، قم بإعداد مجموعة مناسبة من جرعات العوامل المضادة للميكروبات بناء على اختبار السمية الأولي.
تصيب مجموعات اليرقات بالبكتيريا كما هو موضح سابقا بعد ساعتين من الإصابة. عالج اليرقات بالعامل المضاد للميكروبات المحضر أو محلول التحكم في السيارة. مراقبة البقاء على قيد الحياة Galleria mellonella على فترات 30 دقيقة أو أكثر من الوقت الذي عادة ما يتم فيه ملاحظة الوفيات لأول مرة.
إزالة أي يرقات ميتة وتسجيل وقت وفاتها. لمقارنة كيفية تأثير توقيت العلاج على الوفيات ، عالج اليرقات في 2 أو 4 أو 6 أو 9 أو 12 ساعة بعد الإصابة ومراقبة بقائها على قيد الحياة كل 30 دقيقة. تختلف الجرعة الفعالة من توبراميسين حسب السلالة.
كان خمسة ملليغرام لكل كيلوغرام هو الأمثل ل PAO1 و PA14.2.5 ملليغرام لكل كيلوغرام ل PAK و 10 ملليغرام لكل كيلوغرام ل IST27 mucoid. لم تكن أي جرعة فعالة ل LESB58. أدى العلاج بخمسة ملليغرام لكل كيلوغرام من توبراميسين في ساعتين وأربع وست ساعات بعد الإصابة إلى بقاء أكثر من 50٪ من يرقات Galleria mellonella المصابة بالمتصورة الزنجارية على قيد الحياة.
