首先在感染前每毫升制备已知菌落形成单位的铜绿假单胞菌感染原液。要沉淀感染原液，请在室温下以 10， 000 x g 离心 5 分钟。将沉淀重悬于 PBS 中。
接下来，准备三个 1 毫升微量离心管，其中包含无菌蒸馏水、乙醇或无菌 PBS。检查无菌的 100 μL 汉密尔顿注射器，确保针尖锋利且没有形成可能对感染部位造成严重创伤的钩子。现在，在感染之前，用蒸馏水、乙醇和 PBS 依次清洗注射器，吸取并丢弃最大容量。
然后涡旋重悬的感染接种物，并将最多 100 微升吸入 Hamilton 注射器中，足以为每个幼虫注射 10 微升。之后，在每只 Galleria mellonella 幼虫的右后前肢注射 10 微升接种物。在 20 摄氏度到 42 摄氏度之间孵育受感染的幼虫，这是 Galleria mellonella 存活的适当范围。
制备超出体外毒性数据指导的抗菌剂预期治疗范围的广泛剂量。以适当的组大小注射健康、无菌的 Galleria mellonella，具有不同的抗菌剂和 PBS 载体浓度。为了优化 Galleria mellonella 细菌感染的治疗，请根据初步毒性测试准备合适的抗菌剂剂量范围。
如前所述，在感染后 2 小时用细菌感染幼虫群。用准备好的抗菌剂或载体控制溶液处理幼虫。每隔 30 分钟监测一次 Galleria mellonella 的存活率，或者从通常首次观察到死亡率的时间开始更频繁地监测一次。
取出所有死亡的幼虫并记录它们的死亡时间。为了比较治疗时间对死亡率的影响，在感染后 2、4、6、9 或 12 小时治疗幼虫，并每隔 30 分钟监测一次存活率。妥布霉素的有效剂量因菌株而异。
PAO1 最佳 5 毫克/公斤，PAK 为 14.2.5 毫克/公斤，IST27 粘液为 10 毫克/公斤。无剂量对 LESB58 有效。在感染后 2 、 4 和 6 小时用每公斤 5 毫克妥布霉素治疗，导致铜绿疟原虫感染的 Galleria mellonella 幼虫的存活率超过 50%。
