התחל על ידי הכנת מלאי זיהום Pseudomonas aeruginosa של יחידות יוצרות מושבה ידועות למיליליטר לפני ההדבקה. כדי pellet מלאי זיהום, צנטריפוגה ב 10, 000 x גרם במשך חמש דקות בטמפרטורת החדר. השהה מחדש את הגלולה ב- PBS.
לאחר מכן, הכינו שלוש שפופרות מיקרופוגה של מיליליטר אחד המכילות מים מזוקקים סטריליים, אתנול או PBS סטרילי. בדקו מזרק המילטון סטרילי בנפח 100 מיקרוליטר, וודאו שקצה המחט חד ולא פיתח וו שעלול לגרום לטראומה משמעותית לאתר הזיהום. כעת שטפו את המזרק ברצף במים מזוקקים, אתנול ו-PBS לפני זיהומים, והשליכו והשליכו את הקיבולת המרבית.
לאחר מכן מערבלים את החיסון המזוהם המושהה מחדש ומושכים מקסימום של 100 מיקרוליטר לתוך מזרק המילטון מספיק כדי להזריק 10 מיקרוליטר לכל זחל. לאחר מכן, הזריקו לכל זחלי גלריה מלונלה 10 מיקרוליטר של אינוקולום בפרולג הימני האחורי. לדגור על הזחלים הנגועים בין 20 מעלות צלזיוס ל 42 מעלות צלזיוס, המהווה טווח מתאים להישרדות גלריה מלונלה.
הכינו מגוון רחב של מינונים החורגים מהטווח הטיפולי הצפוי של הסוכן האנטי-מיקרוביאלי המונחה על ידי נתוני רעילות חוץ גופית. הזריקו מלונלה בריאה וסטרילית בקבוצות בגודל מתאים עם ריכוזי הרכב האנטי-מיקרוביאליים וה-PBS השונים. כדי לייעל את הטיפול בזיהום חיידקי בגלריה מלונלה, הכינו מגוון מתאים של מינונים אנטי-מיקרוביאליים המבוססים על בדיקות רעילות מקדימות.
להדביק קבוצות של זחלים בחיידקים כפי שתואר קודם לכן שעתיים לאחר ההדבקה. טפל בזחלים עם סוכן מיקרוביאלי מוכן או פתרון בקרת הרכב. עקוב אחר הישרדות גלריה mellonella במרווחים של 30 דקות או בתדירות גבוהה יותר מהזמן שבו התמותה נצפתה בדרך כלל לראשונה.
הסר את כל הזחלים המתים ורשום את זמן מותם. כדי להשוות כיצד עיתוי הטיפול משפיע על התמותה, טפלו בזחלים 2, 4, 6, 9 או 12 שעות לאחר ההדבקה ועקבו אחר הישרדותם במרווח של 30 דקות. המינון היעיל של טוברמיצין השתנה לפי הזן.
חמישה מיליגרם לקילוגרם היו אופטימליים עבור PAO1 ו- PA14.2.5 מיליגרם לקילוגרם עבור PAK ו- 10 מיליגרם לקילוגרם עבור רירית IST27. שום מינון לא היה יעיל עבור LESB58. טיפול בחמישה מיליגרם לקילוגרם טוברמיצין בשעתיים, ארבע ושש שעות לאחר ההדבקה הביא להישרדות של יותר מ-50% של זחלי מלונלה נגועים בפלסמודיום ארוגינוזה.
