Per iniziare, preparare l'unico campione di AAV trattato del DNA e la dd_PCR master mix. Aggiungere 2,2 microlitri del campione diluito a 19,8 microlitri di dd_PCR master mix in ciascuna provetta della striscia di otto provette per PCR e mescolare bene. Trasferire 20 microlitri della miscela nei pozzetti contenuti nella fila centrale del campione di una cartuccia generatrice di goccioline.
Quindi trasferire 60 microlitri di olio per la generazione di goccioline nei pozzetti contenuti nella fila inferiore dell'olio della cartuccia per la generazione di goccioline. Posizionare una guarnizione di gomma sulla cartuccia che genera goccioline, quindi posizionarla nel generatore di goccioline. Dopo che le goccioline sono state generate, utilizzare una pipetta a otto canali per trasferire lentamente 42,5 microlitri di soluzione dalla cartuccia di generazione delle goccioline a una piastra PCR a più pozzetti.
Sigillare la piastra PCR con un foglio di alluminio utilizzando una termosaldatrice per cinque secondi a 180 gradi Celsius. Per l'amplificazione, posizionare la piastra in un termociclatore con un modulo di reazione a 96 pozzetti profondi, chiuderla saldamente ed eseguire il programma PCR. Una volta terminato, caricare la piastra in un lettore di gocce, inserire le informazioni richieste nel software di sistema e avviare la lettura.
Nel grafico di ampiezza 1D è stata osservata una chiara separazione tra goccioline positive e negative, suggerendo una misurazione di successo. Il secondo grafico di ampiezza 1D ha mostrato pioggia di goccioline con goccioline sparse tra le nuvole positive e negative, indicando un potenziale problema con l'accuratezza della misurazione. I dati di output di una corsa AAV hanno mostrato risultati coerenti quando un campione è stato misurato in duplicati a due diverse diluizioni.
