Name: single-molecule imaging of nuclear transport
Uploaded: 2010-06-09T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single-Molecule Imaging of Nuclear Transport at JoVE.com

وقد أيد هذا المشروع من المنحة لتعزيز القدرات البحثية (جامعة بولينغ غرين ستيت).

1. إعداد نظام الخلية لتجربة جزيء واحد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أسبوع واحد على الأقل في وقت مبكر ، وبدء ثقافة جديدة من خط الخلية هيلا من الأسهم من قبل ذوبان الجليد عند 37 درجة مئوية ، ووضع في قارورة 25 سم 2 مع الثقافة وسائل الإعلام 5 مل ، احتضا?...

<ol>
	<li>Ma, J., Yang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Molecule+Snapshots+of+Three-Dimensional+Distribution+of+Transient+Interactions+in+Nuclear+Pore+Complex.">Single Molecule Snapshots of Three-Dimensional Distribution of Transient Interactions in Nuclear Pore Complex.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , (2010).</li><li>Sarma, A., Goryaynov, A., Yang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Molecule+Imaging+of+the+Calcium-Regulated+Nuclear+Pore+Permeability.">Single Molecule Imaging of the Calcium-Regulated Nuclear Pore Permeability.</a> , .</li><li>Yang, W., Musser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+single+molecules+transiting+through+nuclear+pore+complexes+using+narrow-field+epifluorescence+microscopy.">Visualizing single molecules transiting through nuclear pore complexes using narrow-field epifluorescence microscopy.</a> Methods. 39, 316-328 (2006).</li><li>Yang, W., Gelles, J., Musser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+single-molecule+translocation+through+nuclear+pore+complexes.">Imaging of single-molecule translocation through nuclear pore complexes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 101, 12887-12892 (2004).</li></ol>

يجب توخي الحذر لضمان اقامة colocalization السليم للجزيئات واحد NE أثناء التجربة. من المهم أيضا أن تقدم إشارة ارتفاع نسبة الضوضاء ، وخصوصا عندما إشارة منخفضة نظرا لوضع العلامات أو photobleaching الفقراء. يقتصر دقة الترجمة عن الضوضاء الخلفية (التي تنشأ من خارج التركيز مضان ، CCD الضوض?...

single-molecule imaging of nuclear transport

وقد ثبت جدوى النهج جزيء المجهري مضان واحد لتكون ذات جدوى كبيرة في فهم التفاعلات البيولوجية على مدى العقد الماضي. وظل التحقيق في التفاعلات الجزيئية مع ارتفاع قرارات الزمانية والمكانية عميقة داخل الخلايا صعبة بسبب إشارات ضعيفة بطبيعتها الناشئة من الجزيئات الفردية. يعمل يانغ مؤخرا وآخرون. أثبتت أن ضيق المجال المجهري epifluorescence التصور يسمح للنقل النواة للهيولى على مستوى الجزيء واحد. من النهج جزيء واحد ، حركية مهمة ، مثل النقل النووي الوقت والكفاءة ، لجزيئات البضائع التي تعتمد على إشارة ومستقلة قد تم الحصول عليها. وصف نحن هنا بروتوكولا للنهج المنهجي مع القرار ، أي spatiotemporal تحسين نانومتر و 12 مللي 0.4. مكن قرار تحسين لنا لالتقاط النقل النشط والأحداث العابرة نشر السلبي من خلال مسام المجمعات النووية (مجلس الشعب) في شبه سليمة الخلايا. نتوقع أن يستخدم هذا الأسلوب في توضيح الأحداث الأخرى ملزمة والاتجار داخل الخلايا.

Watch this Scientific Journal Video about Single-Molecule Imaging of Nuclear Transport at JoVE.com

Single-Molecule Imaging of Nuclear Transport

approch قدم واحدة جزيء المجهري رؤى الرواية إلى النقل النووي.

المفرد جزيء التصوير النقل النووية

The utility of single molecule fluorescence microscopy approaches has been proven to be of a great avail in understanding biological reactions over the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Single Molecule Methods for Monitoring Changes in Bilayer Elastic Properties

طرق جزيء واحد لرصد التغيرات في خصائص طبقة ثنائية مطاطا

Membrane protein function is regulated by the cell membrane lipid composition.  This regulation is due to a combination of specific lipid-protein ...

Visualizing Single-molecule DNA Replication with Fluorescence Microscopy

تصور تكرار الحمض النووي جزيء واحدة مع مضان المجهري

We describe a simple fluorescence microscopy-based real-time method for observing DNA replication at the single-molecule level. A circular, forked DNA ...

Automated System for Single Molecule Fluorescence Measurements of Surface-immobilized Biomolecules

النظام الآلي للقياسات واحدة الإسفار جزيء من الجزيئات الحيوية سطح يجمد

Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) microscopy has been widely used to study the structure and dynamics of molecules of biological interest, ...

Direct Observation of Enzymes Replicating DNA Using a Single-molecule DNA Stretching Assay

الملاحظة المباشرة من الحمض النووي الانزيمات تكرار استخدام الحمض النووي جزيء واحدة تمتد الفحص

We describe a method for observing real time replication of individual DNA molecules mediated by proteins of the bacteriophage replication system. ...

Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage (CoTrAC)

Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage CoTrAC

واحدة جزيء التصوير من تنظيم الجينات<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; استخدام التنشيط بواسطة Cotranslational انشقاق (CoTrAC)

We describe a fluorescence microscopy method, Co-Translational Activation by Cleavage (CoTrAC) to image the production of protein molecules in live cells ...

Combining Single-molecule Manipulation and Imaging for the Study of Protein-DNA Interactions

الجمع بين التلاعب جزيء واحدة والتصوير لدراسة التفاعلات-DNA البروتين

The paper describes the combination of optical tweezers and single molecule fluorescence detection for the study of protein-DNA interaction. The method ...

Studying DNA Looping by Single-Molecule FRET

دراسة الحمض النووي عن طريق حلقات جزيء واحد الحنق

Bending of double-stranded DNA (dsDNA) is associated with many important biological processes such as DNA-protein recognition and DNA packaging into ...

A Proteoliposome-Based Efflux Assay to Determine Single-molecule Properties of Cl- Channels and Transporters

A Proteoliposome-Based Efflux Assay to Determine Single-molecule Properties of Cl- Channels and Transporters

وProteoliposome القائم على الدفق الفحص تحديد خصائص جزيء واحدة من الكلور<sup&gt; -</sup&gt; القنوات وأنظمة نقل

The last 15 years have been characterized by an explosion in the ability to overexpress and purify membrane proteins from prokaryotic organisms as well as ...

Parallel High Throughput Single Molecule Kinetic Assay for Site-Specific DNA Cleavage

متوازي عالية الإنتاجية واحد جزيء واحد اختبار حركي لشق الحمض النووي الموقع محددة

Site-specific DNA cleavage (SSDC) is a key step in many cellular processes, and it is crucial to gene editing. This work describes a kinetic assay capable ...

القياس الكمي القائم على التصوير أحادي الجزيء للخلية الحية لتفاعلات البروتين

Single-Molecule Measurement of Protein Interaction Dynamics Within Biomolecular Condensates

تسليط الضوء على المؤلف: تقييم ديناميكيات مكثفات البروتين في الخلايا البشرية الحية

قياس جزيء واحد لديناميكيات تفاعل البروتين داخل المكثفات الجزيئية الحيوية

Biomolecular condensates formed via liquid-liquid phase separation (LLPS) have been considered critical in cellular organization and an increasing number ...