Name: the organotypic hippocampal slice culture model for examining neuronal injury
Uploaded: 2010-10-28T17:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury at JoVE.com

Gefinancierd door NINDS, American Heart Association, American Federation for Aging Research, March of Dimes

1. Voorbereiding Voordat u begint, verzamelen de benodigde chirurgische instrumenten, dissectie en cultuur media, en 7 dagen oude rat of muis pups. Het protocol is hetzelfde voor muis en rat preparaten. (I) materialen en apparatuur <ul><li> Operating schaar (rechte lengte 6 &quot;, cat # RS6818, Roboz, Gaithersburg, MD) </li><li> Micro ontleden schaar, (lengte 4 &#39;&quot;, cat # RS5910. Roboz, Gaithersburg, MD) </li><li> Koolstofstaal Dumont pincet (cat # RS-504...

<ol>
	<li>Stoppin, L., Buchs, P. A., Muller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+organotypic+cultures+of+nervous+tissue.">A simple method for organotypic cultures of nervous tissue.</a> J Neurosci Methods. 37 (2), 173-173 (1991).</li><li>McCullough, L., Wu, L., Haughey, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+Function+of+the+PGE2+EP2+Receptor+in+Cerebral+Ischemia.">Neuroprotective Function of the PGE2 EP2 Receptor in Cerebral Ischemia.</a> J Neurosci. 24 (1), 257-257 (2004).</li><li>Czapiga, M., Colton, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+of+microglia+in+organotypic+slice+cultures.">Function of microglia in organotypic slice cultures.</a> J Neurosci Res. 56, 644-644 (1999).</li><li>Newell, D. W., Barth, A., Papermaster, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamate+and+non-glutamate+receptor+mediated+toxicity+caused+by+oxygen+and+glucose+deprivation+in+organotypic+hippocampal+cultures.">Glutamate and non-glutamate receptor mediated toxicity caused by oxygen and glucose deprivation in organotypic hippocampal cultures.</a> J Neurosci. 15, 7702-7702 (1995).</li><li>Wu, L., Wang, Q., Liang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Divergent+Effects+of+prostaglandin+recetor+signaling+on+neuronal+survival.">Divergent Effects of prostaglandin recetor signaling on neuronal survival.</a> Neuroscience letter. 421, 253-253 (2007).</li><li>Hailer, N. P., Jarhult, J. D., Nitsch, R., R, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resting+microglial+cells+in+vitro:+Analysis+of+morphology+and+adhesion+molecule+expression+in+organotypic+hippocampal+slice+cultures.">Resting microglial cells in vitro: Analysis of morphology and adhesion molecule expression in organotypic hippocampal slice cultures.</a> Glia. 18, 319-319 (1996).</li></ol>

Er zijn twee belangrijke punten om te volgen om reproduceerbare en consistente resultaten te waarborgen bij het repliceren van experimenten. Ten eerste is het belangrijk om de hippocampus plakken leeftijd verhuurd voor 12-14 dagen voor de experimenten. Met slice isolement, is er een significant microgliale reactie, en microglia geactiveerd blijven voor enige tijd, met een terugkeer naar een rustplaats vertakte staat die zich per dag 10 in vitro 3,6. Ten tweede, de gemiddelde PI fluorescentie-intensit...

the organotypic hippocampal slice culture model for examining neuronal injury

Organotypische hippocampale slice cultuur is een in vitro methode om de mechanismen van de neuronale schade in de basisarchitectuur en samenstelling van de hippocampus relatief behouden blijft een te onderzoeken. Het organotypische cultuur systeem maakt het mogelijk voor het onderzoek van neuronale, astrocytaire en microgliale effecten, maar als een ex vivo voorbereiding, wordt niet ingegaan op effecten van de bloedstroom, of aanwerving van perifere inflammatoire cellen. Te dien einde, is deze cultuur methode vaak gebruikt om excitotoxisch en hypoxische schade aan piramidale neuronen van de hippocampus te onderzoeken, maar is ook gebruikt om de ontstekingsreactie te onderzoeken. Hierin beschrijven we de methoden voor het genereren van de hippocampus slice culturen van postnatale knaagdieren hersenen, het toedienen van giftige stimuli om neuronale letsel veroorzaken, en het testen en kwantificeren van hippocampale neuronale dood.

Watch this Scientific Journal Video about The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury at JoVE.com

The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury

De organoptypic hippocampus slice cultuur-model is een<em&gt; In vitro</em&gt; Model gebruikt om de neuronale verwonding in een verscheidenheid van paradigma te onderzoeken. In dit artikel beschrijven we de methoden voor het genereren van slice culturen en kwantificeren van neuronale verwonding.

De organotypische hippocampus Slice Cultuur Model is voor de behandeling Neuronale Letsel

Organotypic hippocampal slice culture is an in vitro method to examine mechanisms of neuronal injury in which the basic architecture and composition of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Organotypic Slice Culture of GFP-expressing Mouse Embryos for Real-time Imaging of Peripheral Nerve Outgrowth

Organotypische Slice Cultuur van GFP-expressie muis embryo&#39;s voor real-time beeldvorming van perifere zenuwen uitgroei

For many purposes, the cultivation of mouse embryos ex vivo as organotypic slices is desirable. For example, we employ a transgenic mouse line (tauGFP) in ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures

Organotypische hippocampus Slice culturen

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

An Organotypic Slice Assay for High-Resolution Time-Lapse Imaging of Neuronal Migration in the Postnatal Brain

Een organotypische Slice Assay voor High-Resolution Time-Lapse Imaging van neuronale migratie in de postnatale Brain

Neurogenesis in the postnatal brain depends on maintenance of three biological events: proliferation of progenitor cells, migration of neuroblasts, as ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Organotypische Slice culturen van embryonale ventrale middenhersenen: Een systeem om Dopaminerge Neuronale Development Study In vitro</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

De Analyse van de Purkinje cel dendritische morfologie in organotypische slice culturen

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Gepaarde Whole Cell Opnamen in Organotypische hippocampus Slices

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct ...

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

De Analyse van Neurovascular Verbouwing in Entorhino-hippocampus Organotypische Slice Culturen

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Low-Density primaire hippocampus Neuron Cultuur

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures As a Model to Study Neuroprotection and Invasiveness of Tumor Cells

Organotypic Hippocampal Slice culturen als een Model voor de studie neuroprotectie en invasiviteit van tumorcellen

In organotypic hippocampal slice cultures (OHSC), the morphological and functional characteristics of both neurons and glial cells are well preserved. ...

Optogenetic Entrainment of Hippocampal Theta Oscillations in Behaving Mice

Optogenetic meevoeren van Hippocampal Theta oscillaties in het gedrag van muizen

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools ...