Name: the organotypic hippocampal slice culture model for examining neuronal injury
Uploaded: 2010-10-28T17:15:00
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Financé par le NINDS, l&#39;American Heart Association, l&#39;American Federation for Aging Research, Mars of Dimes

1. Préparation Avant de commencer, réunissez les instruments nécessaires chirurgicale, la dissection et les milieux de culture, et 7 jours vieux rat ou de souriceaux. Le protocole est le même pour les souris et les préparations de rat. (I) Les matériaux et équipements <ul><li> Ciseaux d&#39;exploitation (longueur droite 6 &quot;, le chat # RS6818, Roboz, Gaithersburg, MD) </li><li> Micro dissection ciseaux, (longueur 4 &#39;&quot;, cat # RS5910. Roboz, Gait...

<ol>
	<li>Stoppin, L., Buchs, P. A., Muller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+organotypic+cultures+of+nervous+tissue.">A simple method for organotypic cultures of nervous tissue.</a> J Neurosci Methods. 37 (2), 173-173 (1991).</li><li>McCullough, L., Wu, L., Haughey, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+Function+of+the+PGE2+EP2+Receptor+in+Cerebral+Ischemia.">Neuroprotective Function of the PGE2 EP2 Receptor in Cerebral Ischemia.</a> J Neurosci. 24 (1), 257-257 (2004).</li><li>Czapiga, M., Colton, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+of+microglia+in+organotypic+slice+cultures.">Function of microglia in organotypic slice cultures.</a> J Neurosci Res. 56, 644-644 (1999).</li><li>Newell, D. W., Barth, A., Papermaster, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamate+and+non-glutamate+receptor+mediated+toxicity+caused+by+oxygen+and+glucose+deprivation+in+organotypic+hippocampal+cultures.">Glutamate and non-glutamate receptor mediated toxicity caused by oxygen and glucose deprivation in organotypic hippocampal cultures.</a> J Neurosci. 15, 7702-7702 (1995).</li><li>Wu, L., Wang, Q., Liang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Divergent+Effects+of+prostaglandin+recetor+signaling+on+neuronal+survival.">Divergent Effects of prostaglandin recetor signaling on neuronal survival.</a> Neuroscience letter. 421, 253-253 (2007).</li><li>Hailer, N. P., Jarhult, J. D., Nitsch, R., R, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resting+microglial+cells+in+vitro:+Analysis+of+morphology+and+adhesion+molecule+expression+in+organotypic+hippocampal+slice+cultures.">Resting microglial cells in vitro: Analysis of morphology and adhesion molecule expression in organotypic hippocampal slice cultures.</a> Glia. 18, 319-319 (1996).</li></ol>

Il ya deux points importants à suivre pour assurer des résultats reproductibles et cohérents lors de la réplication des expériences. Premièrement, il est important de laisser l&#39;âge hippocampique tranches pendant 12-14 jours avant l&#39;expérimentation. Avec l&#39;isolement tranche, il ya une réponse significative microgliales, et les microglies activées restent pendant un certain temps, avec un retour à un état ​​de repos ramifiées survenant au jour 10 in vitro de 3,6. Deuxièmem...

the organotypic hippocampal slice culture model for examining neuronal injury

Organotypiques la culture tranche de l&#39;hippocampe est une méthode in vitro pour examiner les mécanismes de lésions neuronales dans laquelle l&#39;architecture de base et la composition de l&#39;hippocampe est relativement préservée 1. Le système de culture organotypique permet pour l&#39;examen des effets neuronaux, astrocytaire et microgliale, mais comme une préparation ex vivo, ne tient pas compte des effets de la circulation sanguine, ou le recrutement de cellules inflammatoires périphériques. À cette fin, cette méthode de culture est souvent utilisé pour examiner des blessures hypoxiques excitotoxique et aux neurones pyramidaux de l&#39;hippocampe, mais a également été utilisée pour examiner la réponse inflammatoire. Ici nous décrivons les méthodes pour générer des cultures tranche de l&#39;hippocampe du cerveau de rongeur postnatale, l&#39;administration de stimuli toxiques pour induire des lésions neuronales, et en dosant et en quantifiant la mort neuronale hippocampique.

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The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury

Le modèle de l&#39;hippocampe organoptypic la culture tranche est une<em&gt; In vitro</em&gt; Modèle utilisé pour examiner les lésions neuronales dans une variété de paradigmes. Dans cet article, nous décrivons les méthodes pour générer des cultures tranche et la quantification des lésions neuronales.

Le modèle organotypiques d&#39;hippocampe Culture Slice d&#39;examen des lésions neuronales

Organotypic hippocampal slice culture is an in vitro method to examine mechanisms of neuronal injury in which the basic architecture and composition of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Organotypic Slice Culture of GFP-expressing Mouse Embryos for Real-time Imaging of Peripheral Nerve Outgrowth

Culture organotypique d&#39;exprimant la GFP embryons de souris pour les images en temps réel d&#39;excroissance des nerfs périphériques

For many purposes, the cultivation of mouse embryos ex vivo as organotypic slices is desirable. For example, we employ a transgenic mouse line (tauGFP) in ...

Recherche

Neurosciences

Organotypic Hippocampal Slice Cultures

Cultures organotypiques d&#39;hippocampe Slice

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

An Organotypic Slice Assay for High-Resolution Time-Lapse Imaging of Neuronal Migration in the Postnatal Brain

Un test organotypique à haute résolution imagerie time-lapse de la migration neuronale dans le cerveau postnatal

Neurogenesis in the postnatal brain depends on maintenance of three biological events: proliferation of progenitor cells, migration of neuroblasts, as ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Cultures organotypique de mésencéphale ventral embryonnaire: Un système pour étudier le développement neuronal dopaminergique In vitro</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

L&#39;analyse de la morphologie de Purkinje cellules dendritiques dans les cultures organotypique

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Appariés enregistrements de cellules entières dans organotypiques coupes d&#39;hippocampe

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct ...

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

L&#39;analyse de neurovasculaire Rénovation dans Entorhino-hippocampe cultures organotypique de tranche

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Faible densité primaire hippocampique Neuron Culture

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures As a Model to Study Neuroprotection and Invasiveness of Tumor Cells

Hippocampe organotypiques comme modèle d’étude Neuroprotection et son caractère invasif des cellules tumorales

In organotypic hippocampal slice cultures (OHSC), the morphological and functional characteristics of both neurons and glial cells are well preserved. ...

Optogenetic Entrainment of Hippocampal Theta Oscillations in Behaving Mice

Optogenetic entraînement des Oscillations thêta hippocampique en comportement des souris

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools ...