Name: visualization of larval segmental nerves in 3rd instar drosophila larval preparations
Uploaded: 2010-09-29T17:00:00
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SGは、ニューヨーク州立大学バッファロー校からとJohn R. Oishei財団からの資金によってサポートされています。

1。試薬の調製<ol><li> 、4MMのCaCl 2、4mmののMgCl 2、2mMの塩化カリウム、5mMのHEPESおよび36mmのスクロース、128 mMのNaClを用いて1 ×解離バッファーを準備します。 7.2〜ソリューションと殺菌フィルターPH。 </li><li> 16％ホルムアルデヒドおよび1x解離バッファーの1:1希釈を使用して固定液を準備します。 </li><li> 1Xリン酸を用いて1 × PBTを準備する生理食塩水（PBS）は1:100の比率では7.2?...

<ol>
	<li>Gunawardena, S., Goldstein, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+Axonal+Transport+and+Neuronal+Viability+by+Amyoid+Precursor+Protein+Mutations+in+Drosophila.">Disruption of Axonal Transport and Neuronal Viability by Amyoid Precursor Protein Mutations in Drosophila.</a> Neuron. 32 (2), 389-401 (2001).</li><li>Gunawardena, S., Her, L. S., Brusch, R. G., Laymon, R. A., Niesman, I. R., Gordesky-Gold, B., Sintasath, L., Bonini, N. M., Goldstein, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+axonal+transport+by+loss+of+huntingtin+or+expression+of+pathogenic+polyQ+proteins+in+Drosophila.">Disruption of axonal transport by loss of huntingtin or expression of pathogenic polyQ proteins in Drosophila.</a> Neuron. 40 (1), 1-2 (2003).</li><li>Hurd, D. D., Saxton, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinesin+mutations+cause+motor+neuron+disease+phenotypes+by+disrupting+fast+axonal+transport+in+Drosophila.">Kinesin mutations cause motor neuron disease phenotypes by disrupting fast axonal transport in Drosophila.</a> Genetics. 144 (3), 1075-1085 (1996).</li><li>Zinsmaier, K. E., Eberle, K. K., Buchner, E., Walter, N., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paralysis+and+early+death+in+cysteine+string+protein+mutants+of+Drosophila.">Paralysis and early death in cysteine string protein mutants of Drosophila.</a> Science. 263, 977-980 (1994).</li></ol>

ショウジョウバエ幼虫の分節の神経は軸索輸送のメカニズムを研究する強力なシステムです。第3齢幼虫の解剖が正しく行われている場合、このような筋肉やNMJsなどのCNS、PNS、および関連組織のすべてのコンポーネントは、単一の幼虫の中で調べることができます。我々はハードとサクストン（1996）によって発行されたものから、このプロトコルを適応している。このプロト?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Dumont #5 Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools, Inc.</td>
<td>11252-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Minutien Pins, Stainless Steel</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools, Inc.</td>
<td>26002-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mcpherson-Vannas Straight Blade 8cm Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>50822236</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vectashield, Mounting Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories, Inc.</td>
<td>H-1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sylgard 184 Silicone elastomer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dow Corning Corporation</td>
<td>4026148</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>formaldehyde, 16%</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>15710</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>dCSP3</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Developmental Studies Hybridoma Bank</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor 568 Goat Anti-Mouse IgG</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A-11004</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

visualization of larval segmental nerves in 3rd instar drosophila larval preparations

キイロショウジョウバエのため、特に便利な遺伝学と完全に配列ゲノムの神経系の発達と機能を研究するための強力なモデル系として浮上している。さらに、幼虫の神経系は、幼虫の体節神経が体の長さに沿って終点の脳とその神経終末内にあるそれらの細胞体と軸索の束が含まれているように軸索輸送のメカニズムを研究する理想的なモデルシステムです。ここでは、幼虫の分節神経内シナプス小胞タンパク質の可視化のための手順を説明します。正しく行えば、神経系のすべてのコンポーネントは、そのような筋肉やNMJsなどの関連組織と一緒に、、そのまま無傷、および可視化する準備が残ります。様々な変異を有する第3齢幼虫は、解剖固定、シナプス小胞の抗体と共にインキュベートし、可視化と野生型の幼虫と比較されます。この手順は、簡単に幼虫分節神経内で観察することができる様々なタンパク質の分布にいくつかの異なるシナプスや神経細胞の抗体と変化に適応することができます。

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Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

キイロショウジョウバエの幼虫は、幼虫の分節神経内軸索輸送のメカニズムを調べるために理想的なモデルシステムを提供しています。この手順を使用して、様々な変異を有する第3齢幼虫は、野生型の幼虫と比較することができます。

3の幼虫分節神経の可視化 RD齢ショウジョウバエ幼虫準備

Drosophila melanogaster is emerging as a powerful model system for studying the development and function of the nervous system, particularly because of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

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ショウジョウバエ幼虫分節軸索内ではシナプス小胞の in vivo可視化で

Elucidating the mechanisms of axonal transport has shown to be very important in determining how defects in long distance transport affect different ...

Mapping and Application of Enhancer-trap Flippase Expression in Larval and Adult Drosophila CNS

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エンハンサートラップフリッパーゼの幼虫における発現と成人のマッピングとその応用ショウジョウバエ CNS

The Gal4/ UAS binary method is powerful for gene and neural circuitry manipulation in Drosophila. For most neurobiological studies, however, Gal4 ...

Dissection and Immunohistochemistry of Larval, Pupal and Adult Drosophila Retinas

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幼虫、蛹および成人の解剖と免疫組織化学<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;網膜

The compound eye of Drosophila melanogaster consists of about 750 ommatidia (unit eyes). Each ommatidium is composed of about 20 cells, including ...

Forebrain Electrophysiological Recording in Larval Zebrafish

ゼブラフィッシュ幼生における前脳電気生理学的記録

Epilepsy affects nearly 3 million people in the United States and up to 50 million people worldwide. Defined as the occurrence of spontaneous unprovoked ...

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

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幼虫給電回路の機能解析ショウジョウバエ</i

The serotonergic  feeding circuit in Drosophila  melanogaster larvae can be used to investigate neuronal substrates of  critical importance during the ...

Live Imaging of Drosophila Larval Neuroblasts

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のライブイメージング<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫の神経芽細胞

Stem cells divide asymmetrically to generate two progeny cells with unequal fate potential: a self-renewing stem cell and a differentiating cell. Given ...

Why Quantification Matters: Characterization of Phenotypes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction

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なぜ定量事項：での表現型のキャラクタリゼーション<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫の神経筋接合部

Most studies on morphogenesis rely on qualitative descriptions of how anatomical traits are affected by the disruption of specific genes and genetic ...

Using Linear Agarose Channels to Study Drosophila Larval Crawling Behavior

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勉強するリニアアガロースチャネルを使用します<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫クロールの動作

Drosophila larval crawling is emerging as a powerful model to study neural control of sensorimotor behavior. However, larval crawling behavior on flat ...

Single-cell Resolution Fluorescence Live Imaging of Drosophila Circadian Clocks in Larval Brain Culture

Single-cell Resolution Fluorescence Live Imaging of Drosophila Circadian Clocks in Larval Brain Culture

単一セルの解像度蛍光は住む幼虫脳文化のショウジョウバエ概日時計のイメージング

The circadian pacemaker circuit orchestrates rhythmic behavioral and physiological outputs coordinated with environmental cues, such as day/night cycles. ...

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

嗅覚ニューロンの光刺激に対する応答のショウジョウバエ幼虫の行動を追跡

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a ...