Name: an orthotopic model of serous ovarian cancer in immunocompetent mice for in vivo tumor imaging and monitoring of tumor immune responses
Uploaded: 2010-11-28T17:00:00
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この作品は、NIHの助成金P01 AI 068730（SNC、NS）、NIHの助成金CA016520 / TAPITMAT（NS）、Claneil財団（NS）、および卵巣SPORE助成金からFCCCへの民間資金とペンシルベニア大学（によってサポートされていましたP50 CA83638）とフォックスチェイスがんセンターコアグラント（P30 CA06927）（DCC）。著者らは、ペンシルベニア癌の大学で博士G. Danet -デスノイヤーズ監督幹細胞および異種移植片のコアからペンシルベニア州、アンソニーSecretoの大学で博士EJ Delikatny監督光/生物発光の中核施設の優秀な技術支援に感謝手術を支援するためのペンシルベニア州/ OCRC大学の同所性の注入法とDenada DangajへのトレーニングSNCのためのセンター。

1。細胞の文化<ol><li>同所性注入の前に、T175フラスコにDR26腫瘍由来の培養MOV1 キャット細胞 、、彼らは90％コンフルエントになるまで。 1または2 T175フラスコを必要とする注射1〜5万セルを、使用する予定。 </li><li>注射の日に、細胞を収穫し、血球計算盤を用いて細胞数を決定します。 </li><li>一度細胞濃度は、室温で300 × gで5分間、遠心分離によって細胞がペレット、決定されてい?...

<ol>
	<li>Etzioni, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+early+detection.">The case for early detection.</a> Nat Rev Cancer. 3, 243-252 (2003).</li><li>Sasaroli, D., Coukos, G., Scholler, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+CA125:+the+coming+of+age+of+ovarian+cancer+biomarkers.+Are+we+there+yet.">Beyond CA125: the coming of age of ovarian cancer biomarkers. Are we there yet.</a> Future Medicine. 3, 275-288 (2009).</li><li>Anderson, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+Lead+Time+of+Selected+Ovarian+Cancer+Biomarkers:+A+Nested+Case+Control+Study.">Assessing Lead Time of Selected Ovarian Cancer Biomarkers: A Nested Case Control Study.</a> J Natl Cancer Inst. 102, 26-38 (2010).</li><li>Auersperg, N., Wong, A. S., Choi, K. C., Kang, S. K., Leung, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+surface+epithelium:+biology,+endocrinology,+and+pathology.">Ovarian surface epithelium: biology, endocrinology, and pathology.</a> Endocr Rev 22. , 255-288 (2001).</li><li>Dubeau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cell+of+origin+of+ovarian+epithelial+tumours.">The cell of origin of ovarian epithelial tumours.</a> Lancet Oncol. 9, 1191-1197 (2008).</li><li>Connolly, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+mice+chimeric+for+expression+of+the+simian+virus+40+TAg+under+control+of+the+MISIIR+promoter+develop+epithelial+ovarian+cancer.">Female mice chimeric for expression of the simian virus 40 TAg under control of the MISIIR promoter develop epithelial ovarian cancer.</a> Cancer Res. 63, 1389-1397 (2003).</li><li>Hensley, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+for+detection+and+determination+of+tumor+volume+in+a+genetically+engineered+mouse+model+of+ovarian+cancer.">Magnetic resonance imaging for detection and determination of tumor volume in a genetically engineered mouse model of ovarian cancer.</a> Cancer Biol Ther. 6, (2007).</li><li>Deliolanis, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+the+red-shifted+fluorescent+proteins+in+deep-tissue+molecular+imaging+applications.">Performance of the red-shifted fluorescent proteins in deep-tissue molecular imaging applications.</a> J Biomed Opt. 13, (2008).</li><li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+better+fluorescent+protein+for+whole-body+imaging.">A better fluorescent protein for whole-body imaging.</a> Trends Biotechnol. 26, (2008).</li><li>Shcherbo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=far-red+fluorescent+protein+for+whole-body+imaging.">far-red fluorescent protein for whole-body imaging.</a> Nat Methods. 4, 741-746 (2007).</li><li>Fu, X., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+ovarian+carcinoma+metastatic+models+constructed+in+nude+mice+by+orthotopic+transplantation+of+histologically-intact+patient+specimens.">Human ovarian carcinoma metastatic models constructed in nude mice by orthotopic transplantation of histologically-intact patient specimens.</a> Anticancer Res. 13, 283-286 (1993).</li><li>Kiguchi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+patient-like+orthotopic+implantation+nude+mouse+model+of+highly+metastatic+human+ovarian+cancer.">A patient-like orthotopic implantation nude mouse model of highly metastatic human ovarian cancer.</a> Clinical &amp; experimental metastasis 16. , 751-756 (1998).</li><li>Bao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+cancer-specific+gene+expression+by+the+survivin+promoter.">Activation of cancer-specific gene expression by the survivin promoter.</a> J Natl Cancer Inst. 94, 522-528 (2002).</li><li>Connolly, D. C., Hensley, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenograft+and+Transgenic+Mouse+Models+of+Epithelial+Ovarian+Cancer+and+Non+Invasive+Imaging+Modalities+to+Monitor+Ovarian+Tumor+Growth+In+situ+-Applications+in+Evaluating+Novel+Therapeutic+Agents.+Current+Protocols+in+Pharmacology+45.">Xenograft and Transgenic Mouse Models of Epithelial Ovarian Cancer and Non Invasive Imaging Modalities to Monitor Ovarian Tumor Growth In situ -Applications in Evaluating Novel Therapeutic Agents. Current Protocols in Pharmacology 45.</a> , 1-36 .</li><li>Milne, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+analysis+of+immune+infiltrates+in+high-grade+serous+ovarian+cancer+reveals+CD20,+FoxP3+and+TIA-1+as+positive+prognostic+factors.">Systematic analysis of immune infiltrates in high-grade serous ovarian cancer reveals CD20, FoxP3 and TIA-1 as positive prognostic factors.</a> , (2009).</li></ol>

手術と同所注射卵巣嚢における同所性注入は、トレーニングと精度が要求されます。このように<ol><li>貧しい手術経験の場合、最初の死体との練習。 </li><li>彼らは未経産の雌と比較して注入し、増加の生存を容易に時間をかけて大きな卵巣を開発するように優先的に初産の女性を（1つまたは2つのリットル）を使用してください。 </li><li>マウス卵巣嚢の小さなサイズの?...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM-GLUTAMAX</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10564-011</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>14040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Versene</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Lonza</td>
<td>17-711E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Heating pad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Deltaphase</td>
<td>39 DP</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Povidone pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dynarex</td>
<td>1108</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alcohol pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>06-669-62</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Artificial tears ointment </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Phoenix Pharma., Inc.</td>
<td>17845-153</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ketoprofen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fort Dodge laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>3cc/insulin syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>309301</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polyg Polyglycolic Acid suture/needle (3/8 19mm)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Syneture</td>
<td>9612-31</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue adhesive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vetbond</td>
<td>3M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vet Bactrim/ oral suspension</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hi-tech Pharmacal</td>
<td>840823</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>IVIS-Lumina</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caliper lifesciences</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isofluorane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Phoenix Pharma., Inc.</td>
<td>J108013</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum, Qualified</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10437036</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin/streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>TurboFP635 mammalian vector</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Evrogen</td>
<td>FP721</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>T175 flasks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>cellstar</td>
<td>660-190</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

an orthotopic model of serous ovarian cancer in immunocompetent mice for in vivo tumor imaging and monitoring of tumor immune responses

背景：卵巣がんは一般的にケース/致死率が高いため、米国の女性は1,2,3の間で、すべての婦人科悪性腫瘍の最も致命的なまま進行した段階で診断されます。漿液性腫瘍は卵巣癌の最も広く普及している形ですと4,5 TG - MISIIR - TAGトランスジェニックは、自発的に腫瘍のこのタイプを開発する唯一のマウスモデルを表しています。ミュラー阻害物質II型受容体（MISIIR）遺伝子のプロモーター6の制御下TG - MISIIR - TAGマウス急行SV40形質転換する地域。追加のトランスジェニック系統は、発現するSV40タグの導入遺伝子を同定されているが、卵巣腫瘍を発症しない。非腫瘍傾向のあるマウスは、C57BL / 6マウスの一般的な寿命を示し、肥沃です。これらのマウスは、TG - MISIIR - TAG - DR26マウスから単離した腫瘍細胞に対する同系移植のレシピエントとして使用することができます。 目的：腫瘍イメージングは7可能ですが、深い腫瘍の早期発見が小さい生きている動物に挑戦する。漿液性卵巣癌の免疫学的に無傷の動物モデルにおける前臨床試験を有効にするには、我々はin vivoイメージング、腫瘍微小環境と腫瘍免疫応答の研究で可能に卵巣癌のこのタイプの同系マウスモデルを説明します。 方法：我々は最初の26週齢のDR26 TG - MISIIR - TAGの女性で収穫された自発的な卵巣腫瘍からTAG +マウスの癌細胞株（MOV1を）派生。その後、我々は安定Katushka、635分の588 nmの8,9,10での励起/発光極大を持つイソギンチャクEntacmaea quadricolorから赤色蛍光タンパク質の遠赤変異体をコードTurboFP635レンチウイルス哺乳類ベクターとMOV1細胞を形質導入。我々は、同所の非腫瘍が発生しやすいTG - MISIIR - TAG雌マウスの卵巣11,12,13,14でMOV1 キャットを注入。腫瘍の進行は 、in vivo光イメージングおよび腫瘍微小環境で続いていた免疫組織化学により解析した。 結果：同所移植MOV1 キャット細胞は漿液性卵巣腫瘍を開発した。 MOV1 キャットの腫瘍は最大3週間注入後in vivoイメージングで可視化することができる（図1）とのようなヒト卵巣癌15（図2）で観察された白血球、で浸潤した。 結論：我々は、深部組織のKatushkaの高いpH安定性と光安定性のために早期の腫瘍のin vivoイメージングに適した卵巣癌の同所性モデルを記述する。我々は、腫瘍免疫応答と免疫療法のin vivoイメージングの研究とモニタリングのための漿液性卵巣癌のこの小説同系モデルの使用を提案する。

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An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

勉強する<em&gt; in vivoで</em&gt;腫瘍の増殖と腫瘍微小環境、我々は、免疫動物の卵巣癌の同系と同所性マウスモデルを使用。我々はKatushka蛍光タンパク質（MOV1でマウスの腫瘍細胞株（MOV1）を形質導入<sup&gt; KAT</sup&gt;）と、ここでは、卵巣での同所移植を示し、<em&gt; in vivoで</em&gt;イメージング。

のための免疫担当マウスにおける漿液性卵巣癌の同所性モデル in vivoで</em腫瘍免疫応答の>腫瘍イメージングとモニタリング

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Murine Model of CD40-activation of B cells

B細胞のCD40 -活性化のモデルマウス

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

免疫・感染学

An In Vitro Model for Measuring Immune Responses to Malaria in the Context of HIV Co-infection

An In Vitro Model for Measuring Immune Responses to Malaria in the Context of HIV Co-infection

アン<em&gt;インビトロ</em&gt; HIV重感染のコンテキストでのマラリアに対する免疫応答を測定するためのモデル

Malaria and HIV co-infection is a growing health priority. However, most research on malaria or HIV currently focuses on each infection individually. ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

IL-8トランジェントトランスジェニックマウスモデル<em&gt;インビボ</em&gt;炎症反応の長期モニタリング

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

サルモネラの分離-大食細胞のファゴゾームを含む

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Tailoring In Vivo Cytotoxicity Assays to Study Immunodominance in Tumor-specific CD8+ T Cell Responses

Tailoring In Vivo Cytotoxicity Assays to Study Immunodominance in Tumor-specific CD8+ T Cell Responses

腫瘍特異的 CD8+ T 細胞応答における Immunodominance を研究するためのインビボ細胞毒性アッセイ

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)-based in vivo cytotoxicity assays enable sensitive and accurate quantitation of CD8+ cytolytic T lymphocyte ...

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

アチミックマウスにおけるヒト胸膜中皮腫の正形細胞モデルのPET/CTによる移植とモニタリング

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

Visualization, Quantification, and Mapping of Immune Cell Populations in the Tumor Microenvironment

腫瘍微小環境における免疫細胞集団の可視化、定量化、およびマッピング

The immune landscape of the tumor microenvironment (TME) is a determining factor in cancer progression and response to therapy. Specifically, the density ...

Precise Brain Mapping to Perform Repetitive In Vivo Imaging of Neuro-Immune Dynamics in Mice

マウスにおける神経免疫ダイナミクスの反復インビボイメージングを行う正確な脳マッピング

The central nervous system (CNS) is regulated by a complex interplay of neuronal, glial, stromal, and vascular cells that facilitate its proper function. ...

Microfluidic Co-Culture Models for Dissecting the Immune Response in in vitro Tumor Microenvironments

in vitro腫瘍微小環境における免疫応答を解剖するためのマイクロ流体共培養モデル

Complex disease models demand cutting-edge tools able to deliver physiologically and pathologically relevant, actionable insights, and unveil otherwise ...

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

マウスにおけるガードネレラ膣膀胱曝露によって引き起こされる再発性大腸菌尿路感染症

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of ...

のための免疫担当マウスにおける漿液性卵巣癌の同所性モデル in vivoで腫瘍イメージングとモニタリング