Name: intracranial orthotopic allografting of medulloblastoma cells in immunocompromised mice
Uploaded: 2010-10-03T17:00:00
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この研究は、ヴァンダービルト - イングラムがんセンターサポート助成金（P30 CA068485）、小児脳腫瘍財団と米国立衛生研究所（NS042205）からの補助金によって支えられている。

1。担癌小脳および腫瘍組織の解離の顕微解剖<ol><li> 腫瘍組織の検索 <ol><li>髄芽腫をもつ病気のマウスは、しばしばrunted、および水頭症と後部麻痺と覆さときに姿勢を取り戻すために、障害を含む典型的な神経症状を、表示されています。腫瘍組織を取得するには、二酸化炭素の吸入によりマウスを安楽死させる。それは頚椎脱臼、後頭骨に圧力を発生し、腫瘍組織の整合性が?...

<ol>
	<li>Schuller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquisition+of+granule+neuron+precursor+identity+is+a+critical+determinant+of+progenitor+cell+competence+to+form+Shh-induced+medulloblastoma.">Acquisition of granule neuron precursor identity is a critical determinant of progenitor cell competence to form Shh-induced medulloblastoma.</a> Cancer Cell. 14, 123-134 (2008).</li><li>Yang, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medulloblastoma+can+be+initiated+by+deletion+of+Patched+in+lineage-restricted+progenitors+or+stem+cells.">Medulloblastoma can be initiated by deletion of Patched in lineage-restricted progenitors or stem cells.</a> Cancer Cell. 14, 135-145 (2008).</li><li>Kessler, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-myc+alters+the+fate+of+preneoplastic+cells+in+a+mouse+model+of+medulloblastoma.">N-myc alters the fate of preneoplastic cells in a mouse model of medulloblastoma.</a> Genes Dev. 23, 157-170 (2009).</li><li>Flora, A., Klisch, T. J., Schuster, G., Zoghbi, H. Y., Y, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+Atoh1+disrupts+Sonic+Hedgehog+signaling+in+the+developing+cerebellum+and+prevents+medulloblastoma.">Deletion of Atoh1 disrupts Sonic Hedgehog signaling in the developing cerebellum and prevents medulloblastoma.</a> Science. 326, 1424-1427 (2009).</li><li>Salsano, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+neurogenic+basic+helix-loop-helix+transcription+factor+NEUROG1+identifies+a+subgroup+of+medulloblastomas+not+expressing+ATOH1.">Expression of the neurogenic basic helix-loop-helix transcription factor NEUROG1 identifies a subgroup of medulloblastomas not expressing ATOH1.</a> Neuro Oncol. 9, 298-307 (2007).</li></ol>

その収量二次腫瘍の形成をallografting成功した髄芽腫の細胞を確保するためにいくつかの重要な要因は以下の通りである：まず、組織解離のためのわずか50％のAccutaseを使用し、長時間の酵素処理は細胞の生存率の大幅な削減につながるとして、組織を過剰に消化しないでください。小さなヒントでも解離細胞への物理的な損傷を生成することができるとしても、わずか1 mLサイズのPipetmanを使用...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Neurobasal medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21103049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hEGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>PHG0311</td>
<td>25ng/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>bFGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>PHG0023</td>
<td>25ng/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>N2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17502048</td>
<td>1X</td>
</tr>
<tr>
<td>B27(-RA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12587010</td>
<td>1X</td>
</tr>
<tr>
<td>Accutase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A1110501</td>
<td>50% </td>
</tr>
<tr>
<td>Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25030081</td>
<td>2mM</td>
</tr>
<tr>
<td>Stereotaxic instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51730</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Foredom flexible shaft drill, hang-up style</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>58650</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Large probe holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51633</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10 &mu;L syringe, 26 ga., bevel tip</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51105</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Drill bit .75mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>51455-3</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

intracranial orthotopic allografting of medulloblastoma cells in immunocompromised mice

髄芽腫は神経系の最も一般的な小児腫瘍です。動物実験の大きな体は、髄芽腫1-4の細胞の起源としての小脳顆粒神経前駆細胞（CGNPs）に焦点を当てている。しかし、ヒトの患者（、結節性線維形成性、古典的および大細胞/未分化）の髄芽腫のサブタイプの多様な臨床症状、および髄芽腫はCGNPマーカー5のない異所性発現と人間の患者のサブセットで発見されているという事実は、ことを示唆している髄芽腫の細胞および分子の起源は、より複雑で、はるかに完全に解読されているからです。したがって、それはどの細胞型に特異的な治療法を開発することができますに基づいて、別の髄芽腫の腫瘍細胞の起源があるかどうかを判断するために不可欠です。この目的のために、受信者の二次腫瘍の開発のその後の分析に続いて遺伝的にマークされた腫瘍細胞のタイプのallografting頭蓋内同所では、腫瘍開始細胞の細胞起源を決定することができるようになります。ここでは、頭蓋内原発腫瘍組織に由来する髄芽腫細胞のallografting同所性、および、この手順のための実験プロトコルを記述するも、確立された細胞株からの細胞を移植するために使用することができます。

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Intracranial Orthotopic Allografting of Medulloblastoma Cells in Immunocompromised Mice

このプロトコルは、二次髄芽腫を開始するために、マウスの髄芽腫の組織の分離と解離を説明し、免疫不全レシピエントマウスに腫瘍細胞のallograftingそれに続く。

免疫不全マウスにおける髄芽腫細胞の頭蓋内同所Allografting

Medulloblastoma is the most common pediatric tumor of the nervous system. A large body of animal studies has focused on cerebellar granule neuron ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolation, Enrichment, and Maintenance of Medulloblastoma Stem Cells

髄芽腫の幹細胞の単離、濃縮、およびメンテナンス

Brain tumors have been suggested to possess a small population of stem cells that are the root cause of tumorigenesis. Neurosphere assays have been ...

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アデノ随伴ウイルスベクターの頭蓋内注射

Intracranial injection of viral vectors engineered to express a fluorescent protein is a versatile labeling technique for visualization of specific ...

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によるマウス網膜神経節細胞のトランスフェクション in vivoでエレクトロポレーション

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

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