Name: intracranial orthotopic allografting of medulloblastoma cells in immunocompromised mice
Uploaded: 2010-10-03T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intracranial Orthotopic Allografting of Medulloblastoma Cells in Immunocompromised Mice at JoVE.com

Это исследование было поддержано грантами Вандербильт-Инграм онкологический центр поддержки Грант (P30 CA068485), опухоли мозга у детей и Фонд Национальных институтов здравоохранения (NS042205).

1. Микро-рассечение опухоль мозжечка и диссоциация опухолевой ткани <ol><li> Восстановление опухолевой ткани <ol><li> Больных мышей с медуллобластомой часто runted и отображения гидроцефалия и типичных неврологических симптомов, включая паралич задних и неудачи, чтобы восстановить п...

<ol>
	<li>Schuller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquisition+of+granule+neuron+precursor+identity+is+a+critical+determinant+of+progenitor+cell+competence+to+form+Shh-induced+medulloblastoma.">Acquisition of granule neuron precursor identity is a critical determinant of progenitor cell competence to form Shh-induced medulloblastoma.</a> Cancer Cell. 14, 123-134 (2008).</li><li>Yang, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medulloblastoma+can+be+initiated+by+deletion+of+Patched+in+lineage-restricted+progenitors+or+stem+cells.">Medulloblastoma can be initiated by deletion of Patched in lineage-restricted progenitors or stem cells.</a> Cancer Cell. 14, 135-145 (2008).</li><li>Kessler, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-myc+alters+the+fate+of+preneoplastic+cells+in+a+mouse+model+of+medulloblastoma.">N-myc alters the fate of preneoplastic cells in a mouse model of medulloblastoma.</a> Genes Dev. 23, 157-170 (2009).</li><li>Flora, A., Klisch, T. J., Schuster, G., Zoghbi, H. Y., Y, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+Atoh1+disrupts+Sonic+Hedgehog+signaling+in+the+developing+cerebellum+and+prevents+medulloblastoma.">Deletion of Atoh1 disrupts Sonic Hedgehog signaling in the developing cerebellum and prevents medulloblastoma.</a> Science. 326, 1424-1427 (2009).</li><li>Salsano, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+neurogenic+basic+helix-loop-helix+transcription+factor+NEUROG1+identifies+a+subgroup+of+medulloblastomas+not+expressing+ATOH1.">Expression of the neurogenic basic helix-loop-helix transcription factor NEUROG1 identifies a subgroup of medulloblastomas not expressing ATOH1.</a> Neuro Oncol. 9, 298-307 (2007).</li></ol>

Несколько важных факторов для успешного ячейки медуллобластомой аллотрансплантации, что дает вторичное образование опухоли в следующем: Во-первых, использовать только 50% Accutase для ткани диссоциации и не по-дайджест ткани, как длительное лечение фермента приводит к значительному сниже...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Neurobasal medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21103049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hEGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>PHG0311</td>
<td>25ng/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>bFGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>PHG0023</td>
<td>25ng/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>N2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17502048</td>
<td>1X</td>
</tr>
<tr>
<td>B27(-RA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12587010</td>
<td>1X</td>
</tr>
<tr>
<td>Accutase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A1110501</td>
<td>50% </td>
</tr>
<tr>
<td>Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25030081</td>
<td>2mM</td>
</tr>
<tr>
<td>Stereotaxic instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51730</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Foredom flexible shaft drill, hang-up style</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>58650</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Large probe holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51633</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10 &mu;L syringe, 26 ga., bevel tip</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51105</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Drill bit .75mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>51455-3</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

intracranial orthotopic allografting of medulloblastoma cells in immunocompromised mice

Медуллобластомой является наиболее распространенным педиатрической опухоли нервной системы. Большой объем исследований на животных было сосредоточено на мозжечковой гранул нейрона прекурсоров (CGNPs) в качестве клеточной из-за происхождения медуллобластомой 1-4. Тем не менее, разнообразные клинические проявления медуллобластомой подтипов в человеческом пациентов (узловой, вызывающий развитие фиброзной ткани, классические и большую клетку / анапластическая), а также тот факт, что медуллобластомой находится в подмножество человека пациентов без внематочной выражение CGNP маркер 5, показывают, что клеточном и молекулярном происхождении медуллобластомой являются более сложными и далеко не полностью расшифрован. Поэтому важно определить, есть ли альтернативные опухоли медуллобластомой клеточной от происхождения на основании которых камерного типа конкретной терапевтической модальности могут быть разработаны. С этой целью, внутричерепная ортотопической аллотрансплантации генетически отмеченные типы клеток опухоли с последующим анализом вторичного развития опухоли у реципиентов позволит определения сотовой происхождении опухоли, инициирующие клетки. Здесь мы опишем экспериментальный протокол для внутричерепного ортотопической аллотрансплантации медуллобластомы клетки, полученные из первичной опухоли ткани, и эта процедура может также использоваться для пересадки клетки от установленных клеточных линий.

Watch this Scientific Journal Video about Intracranial Orthotopic Allografting of Medulloblastoma Cells in Immunocompromised Mice at JoVE.com

Intracranial Orthotopic Allografting of Medulloblastoma Cells in Immunocompromised Mice

Этот протокол описывает изоляции и распада тканей медуллобластомой мыши и последующем аллотрансплантации опухолевых клеток в иммунитетом мышей трансплантации, с тем чтобы начать вторичные медуллобластомой.

Внутричерепное Ортотопическая аллотрансплантации медуллобластомы Ячейки в ослабленной иммунной системой Мыши

Medulloblastoma is the most common pediatric tumor of the nervous system. A large body of animal studies has focused on cerebellar granule neuron ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolation, Enrichment, and Maintenance of Medulloblastoma Stem Cells

Изоляция, обогащению и техническому обслуживанию ячеек медуллобластомой Стволовой

Brain tumors have been suggested to possess a small population of stem cells that are the root cause of tumorigenesis. Neurosphere assays have been ...

Intracranial Injection of Adeno-associated Viral Vectors

Внутричерепное Инъекция адено-ассоциированные вирусные векторы

Intracranial injection of viral vectors engineered to express a fluorescent protein is a versatile labeling technique for visualization of specific ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Трансфекция Мышь ганглиозных клеток сетчатки при В естественных условиях Электропорация

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-ячейки изображения сенсорных клеток-предшественников органов в интактных Drosophila Куколки

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Простой и недорогой метод для определения холодную чувствительность и адаптация в мышах

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Intracranial Pharmacotherapy and Pain Assays in Rodents

Внутричерепных фармакотерапии и боль Assays грызунов

Pain is a salient sensory experience with affective and cognitive dimensions. However, central mechanisms for pain remain poorly understood, hindering the ...

The Detection of 5-Hydroxymethylcytosine in Neural Stem Cells and Brains of Mice

Обнаружение 5-гидроксиметилцитозин в нейронных стволовых клетках и мозгах мышей

Multiple&#160;DNA modifications have been identified in the mammalian genome. Of that, 5-methylcytosine and 5-hydroxymethylcytosine-mediated epigenetic ...

Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice

Количественное измерение интратекалливых синтезированных белков у мышей

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the ...

Electrocorticographic Recording of Cerebral Cortex Areas Manipulated Using an Adeno-Associated Virus Targeting Cofilin in Mice

Электрокортикографическая запись областей коры головного мозга, манипулируемых с использованием аденоассоциированного вируса, нацеленного на кофилин у мышей

The use of electrocorticographic (ECoG) recordings in rodents is relevant to sleep research and to the study of a wide range of neurological conditions. ...

A Scalable Model to Study the Effects of Blunt-Force Injury in Adult Zebrafish

Масштабируемая модель для изучения последствий травмы тупой силой у взрослых рыбок данио

Blunt-force traumatic brain injuries (TBI) are the most common form of head trauma, which spans a range of severities and results in complex and ...