Name: intracranial orthotopic allografting of medulloblastoma cells in immunocompromised mice
Uploaded: 2010-10-03T17:00:00
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Este estudio fue apoyado por subvenciones del Vanderbilt-Ingram Cancer Center de Apoyo Grant (P30 CA068485), la Fundación cerebrales infantiles del tumor y de los Institutos Nacionales de Salud (NS042205).

1. Microdisección de portadores de tumores del cerebelo y la disociación del tejido tumoral <ol><li> Recuperación del tejido tumoral <ol><li> Los ratones enfermos teniendo meduloblastoma son a menudo runted, y mostrar hidrocefalia y típicos síntomas neurológicos, incluyendo parálisis posterior y el fracaso para recuperar la posición en caso de vuelco. Para recuperar el tejido tumoral, la eutanasia a los ratones por inhalación de dióxido de carbono. Es imporante no llevar a cabo la dislocaci?...

<ol>
	<li>Schuller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquisition+of+granule+neuron+precursor+identity+is+a+critical+determinant+of+progenitor+cell+competence+to+form+Shh-induced+medulloblastoma.">Acquisition of granule neuron precursor identity is a critical determinant of progenitor cell competence to form Shh-induced medulloblastoma.</a> Cancer Cell. 14, 123-134 (2008).</li><li>Yang, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medulloblastoma+can+be+initiated+by+deletion+of+Patched+in+lineage-restricted+progenitors+or+stem+cells.">Medulloblastoma can be initiated by deletion of Patched in lineage-restricted progenitors or stem cells.</a> Cancer Cell. 14, 135-145 (2008).</li><li>Kessler, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-myc+alters+the+fate+of+preneoplastic+cells+in+a+mouse+model+of+medulloblastoma.">N-myc alters the fate of preneoplastic cells in a mouse model of medulloblastoma.</a> Genes Dev. 23, 157-170 (2009).</li><li>Flora, A., Klisch, T. J., Schuster, G., Zoghbi, H. Y., Y, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+Atoh1+disrupts+Sonic+Hedgehog+signaling+in+the+developing+cerebellum+and+prevents+medulloblastoma.">Deletion of Atoh1 disrupts Sonic Hedgehog signaling in the developing cerebellum and prevents medulloblastoma.</a> Science. 326, 1424-1427 (2009).</li><li>Salsano, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+neurogenic+basic+helix-loop-helix+transcription+factor+NEUROG1+identifies+a+subgroup+of+medulloblastomas+not+expressing+ATOH1.">Expression of the neurogenic basic helix-loop-helix transcription factor NEUROG1 identifies a subgroup of medulloblastomas not expressing ATOH1.</a> Neuro Oncol. 9, 298-307 (2007).</li></ol>

Varios factores críticos para asegurar el éxito de células de meduloblastoma aloinjerto que la formación de los rendimientos de un tumor secundario son los siguientes: En primer lugar, utilice sólo Accutase 50% para el tejido de la disociación y no más de digerir el tejido como tratamiento enzimático prolongada conduce a una reducción significativa de la viabilidad celular. También utilizamos sólo la Pipetman 1 mL tamaño como pequeños consejos también pueden generar daño físico a las células disociadas....

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Neurobasal medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21103049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hEGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>PHG0311</td>
<td>25ng/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>bFGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>PHG0023</td>
<td>25ng/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>N2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17502048</td>
<td>1X</td>
</tr>
<tr>
<td>B27(-RA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12587010</td>
<td>1X</td>
</tr>
<tr>
<td>Accutase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A1110501</td>
<td>50% </td>
</tr>
<tr>
<td>Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25030081</td>
<td>2mM</td>
</tr>
<tr>
<td>Stereotaxic instrument</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51730</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Foredom flexible shaft drill, hang-up style</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>58650</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Large probe holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51633</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10 &mu;L syringe, 26 ga., bevel tip</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting </td>
<td>51105</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Drill bit .75mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>51455-3</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

intracranial orthotopic allografting of medulloblastoma cells in immunocompromised mice

El meduloblastoma es el tumor pediátrico más común del sistema nervioso. Una gran cantidad de estudios realizados en animales se ha centrado en cerebelosa gránulo precursores de neuronas (CGNPs) como la célula de origen para el meduloblastoma 1-4. Sin embargo, las diversas presentaciones clínicas de los subtipos de meduloblastoma en pacientes humanos (nodular, desmoplásico, clásica y de células grandes / anaplásico), y el hecho de que el meduloblastoma se encuentra en un subgrupo de pacientes humanos, sin expresión ectópica de CGNP marcador 5, sugieren que la origen celular y molecular de meduloblastoma son más complejos y lejos de ser descifrado. Por lo tanto, es esencial para determinar si hay un tumor meduloblastoma alternativa de células de origen sobre la base de que tipo de células específicas de modalidad terapéutica puede ser desarrollada. Con este fin, ortotópico intracraneal aloinjerto de marcadas genéticamente tipos de células del tumor seguida de análisis posteriores del desarrollo del tumor secundario en los receptores que permiten determinar el origen celular de células iniciadoras del tumor. A continuación se describe el protocolo que se ortotópico intracraneal aloinjerto de células de meduloblastoma derivadas del tejido del tumor primario, y este procedimiento también se puede utilizar para el trasplante de células de líneas celulares establecidas.

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Intracranial Orthotopic Allografting of Medulloblastoma Cells in Immunocompromised Mice

Este protocolo describe el aislamiento y la disociación de los tejidos del ratón meduloblastoma, y ​​la posterior aloinjerto de las células tumorales en ratones inmunodeprimidos receptores a fin de iniciar el meduloblastoma secundaria.

Aloinjerto intracraneal ortotópico de células de meduloblastoma en ratones inmunodeficientes

Medulloblastoma is the most common pediatric tumor of the nervous system. A large body of animal studies has focused on cerebellar granule neuron ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolation, Enrichment, and Maintenance of Medulloblastoma Stem Cells

Aislamiento, enriquecimiento y mantenimiento de las células madre meduloblastoma

Brain tumors have been suggested to possess a small population of stem cells that are the root cause of tumorigenesis. Neurosphere assays have been ...

Investigación

Neurociencias

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