Name: the method of rodent whole embryo culture using the rotator-type bottle culture system
Uploaded: 2010-08-28T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Method of Rodent Whole Embryo Culture using the Rotator-type Bottle Culture System at JoVE.com

نشكر السيد هاجيمي Ichijo النصائح لتسجيل الفيديو ومفيدة لتحرير الفيديو. ونحن نشكر أيضا Drs.Yuji Tsunekawa وYoshizaki Kaichi لمساعد النوع لتسجيل الفيديو. ويدعم هذا العمل KAKENHI على B والعلماء الشباب على العلوم الأولوية مناطق الدماغ الجزيئية من وزارة التربية في اليابان. نعترف دعم البرنامج العالمي لمجلس أوروبا &quot;مركز البحوث الأساسية وبالحركة العالمية للعلوم الدماغ&quot; من وزارة التربية واليابان للأبحاث الأساسية للعلوم والتكنولوجيا تطوري (كريست) من العلوم اليابانية وشركة التكنولوجيا اليابانية من علوم والتكنولوجيا وكالة (JST) .

1. إعداد نظام WEC <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مشترك غشاء 0.22 ميكرون تصفية لمدخل أنبوب السيليكون داخل النظام WEC أ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح صمام اسطوانة الغاز التي تحتوي على O 2 (95 ٪) وثاني أكسيد الكربون 2 (5 ٪). تدفق خليط الغاز في ?...

<ol>
	<li>New, D. A. T., Copp, A. J., Cockroft, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intoroduction.+In+mammalian+postimplantation+embryos.">Intoroduction. In mammalian postimplantation embryos.</a> In Mammalian Postimplantation Embryos A Practical Approach. , 1-14 (1990).</li><li>Cockroft, D. L., Copp, A. J., Cockroft, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+and+culture+of+post+implantation+embryos.">Dissection and culture of post implantation embryos.</a> In Mammalian Postimplantation Embryos A Practical Approach. , 15-40 (1990).</li><li>Morris-Kay, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postimplantation+mammalian+embryos.">Postimplantation mammalian embryos.</a> Essential Developmental Biology A Practical Approach. , 55-66 (1993).</li><li>Fujinaga, M., Tuan, R. S., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+culture+of+rodent+embryos+during+the+early+postimplantation+period.">In vitro culture of rodent embryos during the early postimplantation period.</a> Developmental Biology Protocols. , 53-76 (2000).</li><li>Eto, K., Takakubo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+development+of+rat+embryos+in+culture+during+the+period+of+craniofacial+morphogenesis.">Improved development of rat embryos in culture during the period of craniofacial morphogenesis.</a> J. Craniofac. Genet. Dev. Biol. 5, 351-355 (1985).</li><li>New, D. A., Cockroft, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotating+bottle+culture+method+with+continuous+replacement+of+the+gas+phase.">A rotating bottle culture method with continuous replacement of the gas phase.</a> Experientia. 35, 138-140 (1979).</li><li>Osumi-Yamashita, N., Ninomiya, Y., Eto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+craniofacial+embryology+in+vitro.">Mammalian craniofacial embryology in vitro.</a> Int. J. Dev. Biol. 41, 187-194 (1997).</li><li>Inoue, T., Nakamura, S., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+mapping+of+the+mouse+prosencephalic+neural+plate.">Fate mapping of the mouse prosencephalic neural plate.</a> Dev. Biol. 219, 373-383 (2000).</li><li>Nomura, T., Holmberg, J., Frisen, J., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pax6-dependent+boundary+defines+alignment+of+migrating+olfactory+cortex+neurons+via+the+repulsive+activity+of+ephrin+A5.">Pax6-dependent boundary defines alignment of migrating olfactory cortex neurons via the repulsive activity of ephrin A5.</a> Development. 133, 1335-1345 (2006).</li><li>Inoue, Y. U., Asami, J., Inoue, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+labeling+of+mouse+rhombomeres+by+Cadherin-6::EGFP-BAC+transgenesis+underscores+the+role+of+cadherins+in+hindbrain+compartmentalization.">Genetic labeling of mouse rhombomeres by Cadherin-6::EGFP-BAC transgenesis underscores the role of cadherins in hindbrain compartmentalization.</a> Neurosci. Res. 63, 2-9 (2009).</li><li>Calegari, F., Huttner, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+inhibition+of+cyclin-dependent+kinases+that+lengthens,+but+does+not+arrest,+neuroepithelial+cell+cycle+induces+premature+neurogenesis.">An inhibition of cyclin-dependent kinases that lengthens, but does not arrest, neuroepithelial cell cycle induces premature neurogenesis.</a> J. Cell Sci. 116, 4947-4955 (2003).</li><li>Osumi, N., Inoue, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+into+cultured+mammalian+embryos+by+electroporation.">Gene transfer into cultured mammalian embryos by electroporation.</a> Methods. 24, 35-42 (2001).</li><li>Arai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Fabp7,+a+downstream+gene+of+Pax6,+in+the+maintenance+of+neuroepithelial+cells+during+early+embryonic+development+of+the+rat+cortex.">Role of Fabp7, a downstream gene of Pax6, in the maintenance of neuroepithelial cells during early embryonic development of the rat cortex.</a> J. Neurosci. 25, 9752-9761 (2005).</li><li>Takahashi, M., Nomura, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transferring+genes+into+cultured+mammalian+embryos+by+electroporation.">Transferring genes into cultured mammalian embryos by electroporation.</a> Dev. Growth Differ. 50, 485-497 (2008).</li></ol>

هناك نوعان من الخطوات الحاسمة في WEC القوارض للنجاح. أولا ، ينبغي إجراء تشريح لا تكون دقيقة إلى الأجنة الضرر ، لا سيما الأوعية الدموية. ثانيا ، ينبغي أن يكون الإجراء في أسرع وقت ممكن لأن الاوكسجين والمغذيات لم تعد الموردة عبر المشيمة بعد العزلة من الرحم. هذا أمر بالغ ال?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> نوع </td><td> شركة </td><td> رقم كتالوج </td><td> تعليق </td></tr><tr><td colspan="5"> إعداد WEC </td></tr><tr><td> WEC النظام (10-0310) </td><td> أداة </td><td> Ikemoto ريكا </td><td> 010-0310 </td><td> نموذج آخر صغير هو متاح أيضا. </td></tr><tr><td> السيليكون المكونات بدون حفرة </td><td> أداة </td><td> Ikemoto ريكا </td><td> 010-032-08 </td><td></td></tr><tr><td> اسطوانة الغاز المخلوط </td><td> أداة </td><td> نيكو Sanso </td><td> -- </td><td> تحتوي على 95 ٪ أكسجين و 5 ٪ من ثاني اكسيد الكربون. عرف النظام. </td></tr><tr><td> منظم الغاز </td><td> أداة </td><td> أونو Seisakusho </td><td> WR - 11 </td><td></td></tr><tr><td> 0.22 ميكرون تصفية Millex GS </td><td> أداة </td><td> ميليبور </td><td> SLGS033SS </td><td></td></tr><tr><td colspan="5"> التخدير والعزلة الرحم </td></tr><tr><td> مقص كبير </td><td> أداة </td><td> Napox </td><td> B - 7H </td><td></td></tr><tr><td> ملقط </td><td> أداة </td><td> Napox </td><td> A - 3-2 </td><td></td></tr><tr><td> التخلص طبق بتري (90 ملم × 15 ملم) </td><td> أداة </td><td> Iwaki </td><td> SH90 - 15 </td><td> العميق من نوع الطبق هو أفضل لتشريح. </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> الكاشف </td><td> ابوت </td><td> B506 </td><td> للتخدير </td></tr><tr><td> بنتوباربيتال الصوديوم </td><td> الكاشف </td><td> شيرينغ بلاو صحة الحيوان </td><td> -- </td><td> للتخدير </td></tr><tr><td> Tyrode في المياه المالحة </td><td> الكاشف </td><td> -- </td><td> -- </td><td> وفقا للبروتوكول كما في المرجع. 2. حفظ في 4 درجات مئوية. </td></tr><tr><td> توقيت الحامل ، سبراغ داولي </td><td> حيوان </td><td> تشارلز ريفرز مختبرات اليابان </td><td> -- </td><td></td></tr><tr><td colspan="5"> إعداد مستنبت </td></tr><tr><td> ثقافة زجاجة </td><td> أداة </td><td> Ikemoto ريكا </td><td> 010-032-05 </td><td></td></tr><tr><td> التخلص من ثقافة زجاجة </td><td> أداة </td><td> Ikemoto ريكا </td><td> 010-032-06 </td><td></td></tr><tr><td> السيليكون المكونات مع ثقب </td><td> أداة </td><td> Ikemoto ريكا </td><td> 010-032-07 </td><td></td></tr><tr><td> رقائق الالومنيوم </td><td> أداة </td><td> أي شركة </td><td> -- </td><td></td></tr><tr><td> التعقيم الحقيبة </td><td> أداة </td><td> Hogy </td><td> HM - 26 </td><td> الزجاجات الثقافة </td></tr><tr><td> التعقيم الحقيبة </td><td> أداة </td><td> Hogy </td><td> HM - 14A </td><td> لسدادات السيليكون </td></tr><tr><td> 0.45 ميكرون تصفية Millex HA </td><td> أداة </td><td> ميليبور </td><td> SLHA033SS </td><td></td></tr><tr><td> 50 مل أنبوب مخروطي </td><td> أداة </td><td> بيكتون ديكنسون </td><td> 352070 </td><td></td></tr><tr><td> 100 مل دورق </td><td> أداة </td><td> Iwaki </td><td> TE - 32 </td><td></td></tr><tr><td> IC مصل الجرذان </td><td> الكاشف </td><td> تشارلز ريفرز مختبرات اليابان </td><td> -- </td><td> الرجوع إلى : السيد كونيهيكو Morisaki ، هاتف : +81- (0) 45-474-9336 ؛ فاكس : +81- (0) 45-474-9340 </td></tr><tr><td> D (+) - الجلوكوز </td><td> الكاشف </td><td> واكو </td><td> 041-00595 </td><td></td></tr><tr><td> المضادات الحيوية السائلة antimyotic </td><td> الكاشف </td><td> Gibco </td><td> 15240 </td><td></td></tr><tr><td colspan="5"> تشريح للأجنة </td></tr><tr><td> مقص العينية على التوالي </td><td> أداة </td><td> Napox </td><td> MB50 - 7 </td><td> لقطع جدار الرحم </td></tr><tr><td> مقص منحني البصريات </td><td> أداة </td><td> Napox </td><td> MB54 - 2 </td><td> لقطع الكيس المحي </td></tr><tr><td> ملقط # 5 </td&gt; <td> أداة </td><td> قوة </td><td> T6715 </td><td></td></tr><tr><td> ملقط # 5F </td><td> أداة </td><td> ريجين </td><td> T6819 </td><td></td></tr><tr><td> ماصة الزجاج </td><td> أداة </td><td> -- </td><td> -- </td><td> مصنوعة يدويا باستخدام ماصة باستور. </td></tr><tr><td> التعقيم الحقيبة </td><td> أداة </td><td> Hogy </td><td> HM - 4 </td><td> ماصات للزجاج </td></tr><tr><td> مجهر مجهر </td><td> أداة </td><td> لايكا </td><td> Mz7s </td><td></td></tr><tr><td> ضوء </td><td> أداة </td><td> لايكا </td><td> CLS 150XD </td><td></td></tr><tr><td> النفط حجر </td><td> أداة </td><td> أوشيدا يوكو </td><td> 833-2000 </td><td> لشحذ ملقط </td></tr><tr><td> آلة النفط </td><td> أداة </td><td> أوشيدا يوكو </td><td> 835-0000 </td><td> لشحذ ملقط </td></tr></tbody></table>

the method of rodent whole embryo culture using the rotator-type bottle culture system

وقد وضعت كلها الجنين الثقافة (WEC) في عام 1950 أسلوب جديد من قبل وزملائه ، وقدم طلبا للعلم الأحياء التطوري 1. على الرغم من تطور ونمو أجنة من الثدييات التي تعتمد بشكل حاسم على وظيفة المشيمة ، WEC تقنية تسمح لنا الماوس الثقافة وأجنة الفئران السابقين شرط المجراة خلال فترات محدودة الموافق المراحل الجنينية midgestation خلال اليوم (E) 6.5 في E12.5 الماوس أو E8.5 - E14.5 في الفئران 2 ، 3 ، 4. في WEC ، يمكننا مباشرة الهدف المنشود مجالات الاجنة باستخدام الشعيرات الدموية الدقيقة الزجاج لأنه لا يمكن التلاعب بها أجنة تحت المجهر. لذلك ، WEC القوارض هو تقنية مفيدة جدا عندما نريد دراسة العمليات التنموية الحيوية للأجنة الثدييات postimplanted. حتى الآن ، وقد تم تطوير عدة أنواع من النظم WEC 1. من بين هؤلاء ، زجاجة الثقافة المدورة من نوع النظام هو الأكثر شعبية ومناسبة على المدى الطويل ثقافة أجنة في midgestation ، أي بعد وE9.5 E11.5 في الفأر والجرذان ، على التوالي 1. في هذا البروتوكول الفيديو ، ونظهر بمستوى إجراءاتنا WEC الفئران بعد E12.5 باستخدام نموذج راق في النظام المدورة الأصلي ، الذي صممه كوكروفت جديدة و 5 و 6 ، وإدخال مختلف تطبيقات تقنية WEC للدراسات الإنمائية في الثدييات البيولوجيا.

Watch this Scientific Journal Video about The Method of Rodent Whole Embryo Culture using the Rotator-type Bottle Culture System at JoVE.com

The Method of Rodent Whole Embryo Culture using the Rotator-type Bottle Culture System

ثقافة بأكملها تقنية الجنين يسمح لنا الماوس الثقافة وأجنة الفئران<em&gt; خارج الحي</em&gt; حالة فترات محدودة خلال المقابلة الى مراحل midgestation. في هذا البروتوكول الفيديو ، ونظهر إجراءاتنا القياسية للثقافة الفئران الجنين كله بعد E12.5 باستخدام زجاجة الثقافة المدورة من نوع النظام.

الطريقة الثقافة القوارض باستخدام الأجنة الجامع للثقافة الدوار زجاجة من نوع النظام

Whole embryo culture (WEC) technique has been developed in 1950's by New and his colleagues, and applied for developmental biology 1. Although development ...

Research

JoVE Journal

Biology

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

طريقة لثقافة الفرخ المبكر فيفو السابقين الأجنة (الثقافة الجديدة)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Mouse Embryonic Lung Culture, A System to Evaluate the Molecular Mechanisms of Branching

الفأر الجنينية الثقافة الرئة ، وهو نظام لتقييم الآليات الجزيئية من التفرع

Lung primordial specification as well as branching morphogenesis, and the formation of various pulmonary cell lineages requires a specific interaction of ...

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

و السابقين البيضة الثقافة الأجنة النظام الدجاج مناسبة للتطبيقات التصوير والجراحة المجهرية

Understanding the relationships between genetic and microenvironmental factors that drive normal and malformed embryonic development is fundamental for ...

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

رواية<em&gt; خارج الحي</em&gt; الطريقة الثقافة لالجنينية القلب

Developmental studies in the mouse are hampered  by the inaccessibility of the embryo during gestation. Thus, protocols to  isolate and culture individual ...

Mouse Embryonic Development in a Serum-free Whole Embryo Culture System

الفأر الجنينية التنمية في الجامعة نظام الثقافة الأجنة الخالية من المصل

Mid-gestation stage mouse embryos were cultured utilizing a serum-free culture medium prepared from commercially available stem cell media supplements in ...

The Slice Culture Method for Following Development of Tooth Germs In Explant Culture

أسلوب الثقافة شريحة لوبعد تطور الجراثيم الأسنان في يزدرع الثقافة

Explant culture allows manipulation of developing organs at specific time points&#160;and is therefore an important method for the developmental ...

Preparation of Rat Serum Suitable for Mammalian Whole Embryo Culture

إعداد الجرذ مصل مناسب للالثدييات الجامع الثقافة الأجنة

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for ...

Establishment of an Extracellular Acidic pH Culture System

إنشاء درجة الحموضة خارج الخلية الحمضية منظومة الثقافة

Conditions of the tumor microenvironment, such as hypoxia or nutrient starvation, play critical roles in cancer progression and malignancy. However, the ...

Evaluating the Angiogenetic Properties of Ovarian Cancer Stem-Like Cells using the Three-Dimensional Co-Culture System, NICO-1

تقييم الخصائص الوعائية الوراثية للخلايا الشبيهة بسرطان المبيض باستخدام نظام الثقافة المشتركة ثلاثي الأبعاد ، NICO-1

Cancer stem cells (CSCs) reside in a supportive niche, constituting a microenvironment comprised of adjacent stromal cells, vessels, and extracellular ...

Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System

Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus AAV2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System

تطوير عملية إنتاج وتنقية الفيروسات المرتبطة أدينو (AAV)2 ناقلات باستخدام نظام زراعة خلايا فيروس الحشرات Baculovirus

Adeno-associated viruses (AAV) are promising vectors for gene therapy applications. Here, the AAV2 vector is produced by co-culture of Spodoptera ...