Name: primary cell cultures from drosophila gastrula embryos
Uploaded: 2011-02-28T17:30:00
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JB는 데몬 런연 암 연구 재단 원정대 DRG - 1716-02에 의해 지원되었다. 점프 온 제로는 NIH / NIGMS 원정대 F32 GM082174 - 02에 의해 지원되었다. NP는 하워드 휴즈 의학 연구소의 수사관이다.

1. 파리 케이지의 준비 <ol><li> 같은 32 온스의 곤충 컵 등 편리한 용기 Drosophila (예 : 오레곤 - R 또는 유전자형과 같은 야생 형 변종) 성장. </li><li> 대형 배아 - 수집 연습장 새로 eclosed 파리를 전송하거나 인구 새장을 날아. </li><li> ~ 25의 온도와 공간에 새장을 이동 ° C 습도 65 ~ 12 H 비추어 %와 동기식 태아의 수집을 용이하게하기 위해 검은 12 H 사이클. </li><li> 그들 몰레 시즈 접시에 줄무늬 효...

<ol>
	<li>Ashburner, M., Roote, J., Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory culture of Drosophila. , 588-599 (1999).</li><li>Bai, J., Hartwig, J. H., Perrimon, N. S. A. L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+WH2-domain-containing+protein,+promotes+sarcomeric+actin+filament+elongation+from+pointed+ends+during+Drosophila+muscle+growth.">a WH2-domain-containing protein, promotes sarcomeric actin filament elongation from pointed ends during Drosophila muscle growth.</a> Dev. Cell. 13, 828-842 (2007).</li><li>Bai, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+interference+screening+in+Drosophila+primary+cells+for+genes+involved+in+muscle+assembly+and+maintenance+.">RNA interference screening in Drosophila primary cells for genes involved in muscle assembly and maintenance .</a> Development. 135, 1439-1449 (2008).</li><li>Sepp, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+neural+outgrowth+genes+using+genome-wide+RNAi.">Identification of neural outgrowth genes using genome-wide RNAi.</a> PloS. Genet. 4, e1000111-e1000111 (2008).</li><li>Donady, J. J., Fyrberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+culturing+of+Drosophila+embryonic+cells+in+vitro.">Mass culturing of Drosophila embryonic cells in vitro.</a> TCA Manual. 3, 685-687 (1977).</li><li>Seecof, R. L., Alleaume, N., Teplitz, R. L., Gerson, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+neurons+and+myocytes+in+cell+cultures+made+from+Drosophila+gastrulae.">Differentiation of neurons and myocytes in cell cultures made from Drosophila gastrulae.</a> Exp. Cell Res. 69, 161-173 (1971).</li><li>Bai, J., Sepp, K. J., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+Drosophila+primary+cells+dissociated+from+gastrula+embryos+and+their+use+in+RNAi+screening.">Culture of Drosophila primary cells dissociated from gastrula embryos and their use in RNAi screening.</a> Nature Protocols. 4, 1502-1512 (2009).</li></ol>

Drosophila 세포의 주요 문화의 발달 패턴은 크게 기본 셀 준비 과정에서 여러 변수에 따라 가능 다를 수 있습니다. 우선, 달걀 부설에 사용되는 파리 젊은이가 (이전 일주일 이내)과 건강 (바이러스 또는 세균 감염은 무료). 있어야 그들이 쓸모 있고 그 배아에서 추출한 세포가 구별 수없는 오직 1~2일 위해 살아남을 것이다로 Unfertilized 또는 감염된 태아는 피해야한다. 둘째, 균질화 과정에서, ?...

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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Shields and Sang M3 medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S3652</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal bovine serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>JRH Biosciences</td>
<td>12103-500M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin from bovine pancreas</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>I-6634</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Large embryo collection cages</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Genesee Scientific</td>
<td>59-101</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>#25 US standard testing sieve</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>57334-454</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>#45 US standard testing sieve</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>57334-462</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>#120 US standard testing sieve</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>57334-474</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dounce tissue grinder, Wheaton 7 mL</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>62400-620</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dounce tissue grinder,Kontes 40 mL</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>KT885300-0040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dounce tissue grinder,Kontes 40 mL</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>KT885300-0100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Costar, 384-well plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>29444-078</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Lab-Tek II Chambered coverglass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>171080</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

primary cell cultures from drosophila gastrula embryos

여기 Drosophila gastrula의 배아에서 dissociated을 준비하고 culturing 기본 세포에 대한 방법을 설명합니다. 간단한에서는 많은 양의 젊고 건강한 파리에서 배아를 개최는 수집 소독 및 유리 균질 화기를 사용하여 단일 세포 현탁액에 다음 물리적 dissociated 있습니다. 문화 매체에 적절한 밀도에 문화 접시 또는 챔버 슬라이드에 도금 후,이 세포가 추가로 특정 세포 마커에 의해 확인할 수 있습니다 몇 가지 morphologically - 서로 다른 세포 유형으로 구별하실 수 있습니다. 또한, 우리는 유전자 최저를 이끌어내는 두 번 좌초 (DS) RNAS 이러한 세포를 치료에 대한 조건을 제시한다. Drosophila 차 전지의 효율적인 RNAi는 dsRNA 간단하게 함유 배지에서 세포를 입욕에 의해 수행됩니다. 다른 분자, 생화학, 세포 이미징 분석과 함께 효과적인 RNAi의 섭동을 수행하는 능력은 질문의 다양한 특히 Drosophila 차 전지, 차별화된 근육 세포의 연결에 관련된 사람에 답변 수 있습니다.

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Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

우리는에서 dissociated 기본 세포를 준비 상세한 프로토콜을 제공합니다<em&gt; Drosophil</em&gt; 배아. 다른 분자 생화학 및 세포 이미징 방법과 함께, 효과적인 RNAi의 섭동을 수행하는 능력은 질문 다양한에서 해결될 수 있도록<em&gt; Drosophila</em&gt; 기본 세포.

에서 기본 셀 문화 Drosophila Gastrula의 태아

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...

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Biology

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Na&iuml;ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

인간의 기본 섬유 아세포 배양에서 순진 성인 줄기 세포 분리

Over the last decade, several adult stem cell  populations have been identified in human skin 1-4.  The isolation of multipotent adult dermal precursors ...