Name: protocol for rnai assays in adult mosquitoes (a. gambiae)
Uploaded: 2007-07-04T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol for RNAi Assays in Adult Mosquitoes A. gambiae at JoVE.com

<p class="jove_content"> 모기에 RNAi - 중재 유전자 입을 관심의 유전자를 대상으로 특정 dsRNAs의 사전 준비 및 정화가 필요합니다. dsRNA 합성을 위해, 우리는 T7 RNA <em>시험 관내</em> 전사 <em>반응에서</em> 효소 - 중재의 사용을 만드는 앰비온의 Megascript 키트를 권장합니다. dsRNA 정화를위한, 우리는 Qiagen RNeasy 키트를 권장합니다. dsRNA의 샘플은 계량 3 μg / 물 μL 조정해야합니다. 당신이 필요합니다 다른 자료는 다음과 같습니?...

<ol>
	<li>Boisson, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (2006).</li><li>Blandin, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (2002).</li></ol>

<p> 유전자 입을의 효율성은 매우 다양하고 세포와 기관에 의해 증명서 및 단백질 턴 오버 요금 및 dsRNA의 이해 효율을 포함한 여러 가지 요인에 따라 달라집니다. 우리는 입을는 이르면 1로 일 게시 주사를 시작하고 최대 6 일 게시 주입 지난 수있는 것으로 나타났습니다. 입을를 확인하기 위해 모래 바닥 같은 양적 PCR과 서양 등 증명서와 단백질 검출 방법을 사용합니다. </p>

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Megascript</td>
<td>kit</td>
<td>Ambion</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>for dsRNA synthesis; T7 RNA polymerase-mediated in vitro transcription reaction</td>
</tr>
<tr>
<td>RNeasy</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Qiagen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For dsRNA purification</td>
</tr>
<tr>
<td>dsRNA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>should be quantified and adjusted to 3 &#x03BC;g/ &#x03BC;L in water</td>
</tr>
<tr>
<td>fine-tipped forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>glass slide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>glass microcapillary needles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>microinjector</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Drummond</td>
<td>Nanoject II</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>light microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>mounted above a cold block</td>
</tr>
<tr>
<td>Petri dish</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>covered, glass</td>
</tr>
<tr>
<td>paper towels</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10% sucrose</td>
<td>food</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>A. gambiae</td>
<td>Animal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>mosquitos</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

protocol for rnai assays in adult mosquitoes (a. gambiae)

<p class="jove_content">역방향 유전자 접근 방법은 모기에 벡터 병원균하는 유전자 underly 저항을 결정하는 매우 유용하게 입증했습니다. 이 비디오 프로토콜은 말라리아 기생충을 항구 아노 펠 레스 모기 gambiae로 dsRNA를 주입하기 위해 Dimo​​poulos 연구실에서 사용하는 방법을 보여줍니다. 사출 설정을 조작하고 흉부에 dsRNA를 주입 기술은 그림이다.</p>

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Protocol for RNAi Assays in Adult Mosquitoes A. gambiae

성인 모기 (A. gambiae)에서 RNAi의 Assays을위한 프로토콜

Reverse genetic approaches have proven extremely useful for determining  which genes underly resistance to vector pathogens in mosquitoes.  This video ...

Research

JoVE Journal

Biology

Protocol for RNAi Assays in Adult Mosquitoes (A. gambiae)

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

모기 (A. aegypti)와 감염 표현형 결정에 뎅그열 감염 프로토콜

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

연구

생물학

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

모스키토 리어링 (A. gambiae)에 대한 프로토콜

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

Protocol for Plasmodium falciparum Infections in Mosquitoes and Infection Phenotype Determination

모기와 감염 표현형 결정에서 Plasmodium falciparum 감염에 대한 프로토콜

Once a gene is identified as potentially refractory for malaria, it must be evaluated for its role in preventing Plasmodium infections within the ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

더 나은 모스키토 구축 : A. gambiae 및 A. aegypti 모기에 말라리아와 뎅그열 발열 저항을 사용 유전자를 확인

In this interview, George Dimopoulos focuses on the physiological mechanisms used by mosquitoes to combat Plasmodium falciparum and dengue virus ...

MISSION esiRNA for RNAi Screening in Mammalian Cells

포유 동물 세포에서 RNAi 심사를위한 선교 esiRNA

RNA interference (RNAi) is a basic cellular mechanism for the control of gene expression. RNAi is induced by short double-stranded RNAs also known as ...

Bacterial Delivery of RNAi Effectors: Transkingdom RNAi

RNAi Effectors의 세균성 배송 : Transkingdom RNAi

RNA interference (RNAi) represents a high effective mechanism for specific inhibition of mRNA expression. Besides its potential as a powerful laboratory ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and <em>In Vivo</em> Diuresis Assay in Adult Female <em>Aedes aegypti</em> Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi - 중재 유전자 최저 및<em&gt; VIVO에서</em성인 여자의&gt; 이뇨 분석<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; 모기

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for <em>Drosophila melanogaster</em>

Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster를위한 지구력 훈련 프로토콜과 세로 성능 Assays

One of the most pressing problems facing modern medical researchers is the surging levels of obesity, with the consequent increase in associated disorders ...

A Multi-detection Assay for Malaria Transmitting Mosquitoes

말라리아 모기 전송하기위한 다중 탐지 분석

The Anopheles gambiae species complex includes the major malaria transmitting mosquitoes in Africa. Because these species are of such medical importance, ...

RNAi Trigger Delivery into <em>Anopheles gambiae</em> Pupae

RNAi Trigger Delivery into Anopheles gambiae Pupae

에 RNAi의 트리거 배달<em&gt; 아노 펠 레스 gambiae</em&gt; 번데기

RNA interference (RNAi), a naturally occurring phenomenon in eukaryotic organisms, is an extremely valuable tool that can be utilized in the laboratory ...