Name: preparation of acute hippocampal slices from rats and transgenic mice for the study of synaptic alterations during aging and amyloid pathology
Uploaded: 2011-03-23T14:15:00
Duration: 14 min 57 s
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NIH अनुदान AG027297, केंटकी स्पाइनल कॉर्ड और सिर पर चोट रिसर्च ट्रस्ट से एक पुरस्कार, और Kleberg फाउंडेशन से एक उपहार के द्वारा समर्थित कार्य करें.

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	<li>Norris, C. M., Halpain, S., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+the+balance+of+protein+kinase/phosphatase+activities+parallel+reduced+synaptic+strength+during+aging.">Alterations in the balance of protein kinase/phosphatase activities parallel reduced synaptic strength during aging.</a> J Neurophysiol. 80, 1567-1570 (1998).</li><li>Norris, C. M., Korol, D. L., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+susceptibility+to+induction+of+long-term+depression+and+long-term+potentiation+reversal+during+aging.">Increased susceptibility to induction of long-term depression and long-term potentiation reversal during aging.</a> J Neurosci. 16, 5382-5392 (1996).</li><li>Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+'zipper'+slice+studies+reveal+a+necessary+role+for+calcineurin+in+the+increased+activity+of+L-type+Ca(2+)+channels+with+aging.">Hippocampal 'zipper' slice studies reveal a necessary role for calcineurin in the increased activity of L-type Ca(2+) channels with aging.</a> Neurobiol Aging. 31, 328-338 (2010).</li><li>Burke, S. N., Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+synapses+and+hippocampal+circuit+dynamics.">Senescent synapses and hippocampal circuit dynamics.</a> Trends Neurosci. 33, 153-161 (2010).</li><li>Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+homeostasis+and+modulation+of+synaptic+plasticity+in+the+aged+brain.">Calcium homeostasis and modulation of synaptic plasticity in the aged brain.</a> Aging Cell. 6, 319-325 (2007).</li><li>Foster, T. C., Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-associated+changes+in+Ca(2+)-dependent+processes:+relation+to+hippocampal+synaptic+plasticity.">Age-associated changes in Ca(2+)-dependent processes: relation to hippocampal synaptic plasticity.</a> Hippocampus. 7, 602-612 (1997).</li><li>Thibault, O., Gant, J. C., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+of+the+calcium+hypothesis+of+brain+aging+and+Alzheimer's+disease:+minding+the+store.">Expansion of the calcium hypothesis of brain aging and Alzheimer's disease: minding the store.</a> Aging Cell. 6, 307-317 (2007).</li><li>Demuro, A., Parker, I., Stutzmann, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+signaling+and+amyloid+toxicity+in+Alzheimer+disease.">Calcium signaling and amyloid toxicity in Alzheimer disease.</a> J Biol Chem. 285, 12463-12468 (2010).</li><li>Green, K. N., LaFerla, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linking+calcium+to+Abeta+and+Alzheimer's+disease.">Linking calcium to Abeta and Alzheimer's disease.</a> Neuron. 59, 190-194 (2008).</li><li>Kumar, A., Thinschmidt, J. S., Foster, T. C., King, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+effects+on+the+limits+and+stability+of+long-term+synaptic+potentiation+and+depression+in+rat+hippocampal+area+CA1.">Aging effects on the limits and stability of long-term synaptic potentiation and depression in rat hippocampal area CA1.</a> J Neurophysiol. 98, 594-601 (2007).</li><li>Norris, C. M., Halpain, S., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+age-related+alterations+in+synaptic+plasticity+by+blockade+of+L-type+Ca2++channels.">Reversal of age-related alterations in synaptic plasticity by blockade of L-type Ca2+ channels.</a> J Neurosci. 18, 3171-3179 (1998).</li><li>Norris, C. M., Scheff, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+afferent+function+and+synaptic+strength+in+hippocampal+CA1+following+traumatic+brain+injury.">Recovery of afferent function and synaptic strength in hippocampal CA1 following traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 26, 2269-2278 (2009).</li><li>Sama, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-1beta-dependent+signaling+between+astrocytes+and+neurons+depends+critically+on+astrocytic+calcineurin/NFAT+activity.">Interleukin-1beta-dependent signaling between astrocytes and neurons depends critically on astrocytic calcineurin/NFAT activity.</a> J Biol Chem. 283, 21953-21964 (2008).</li><li>Ye, H., Jalini, S., Mylvaganam, S., Carlen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+large-conductance+Ca(2+)-activated+K(+)+channels+depresses+basal+synaptic+transmission+in+the+hippocampal+CA1+area+in+APP+(swe/ind)+TgCRND8+mice.">Activation of large-conductance Ca(2+)-activated K(+) channels depresses basal synaptic transmission in the hippocampal CA1 area in APP (swe/ind) TgCRND8 mice.</a> Neurobiol Aging. 31, 591-604 (2010).</li><li>Bear, M. F., Malenka, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity:+LTP+and+LTD.">Synaptic plasticity: LTP and LTD.</a> Curr Opin Neurobiol. 4, 389-399 (1994).</li><li>Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+hippocampal+synaptic+plasticity+in+age-related+memory+decline.">Involvement of hippocampal synaptic plasticity in age-related memory decline.</a> Brain Res Brain Res Rev. 30, 236-249 (1999).</li><li>Foster, T. C., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+to+induction+of+long-term+depression+is+associated+with+impaired+memory+in+aged+Fischer+344+rats.">Susceptibility to induction of long-term depression is associated with impaired memory in aged Fischer 344 rats.</a> Neurobiol Learn Mem. 87, 522-535 (2007).</li><li>Hsu, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+the+balance+of+protein+kinase+and+phosphatase+activities+and+age-related+impairments+of+synaptic+transmission+and+long-term+potentiation.">Alterations in the balance of protein kinase and phosphatase activities and age-related impairments of synaptic transmission and long-term potentiation.</a> Hippocampus. 12, 787-802 (2002).</li><li>Vouimba, R. M., Foy, M. R., Foy, J. G., Thompson, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17beta-estradiol+suppresses+expression+of+long-term+depression+in+aged+rats.">17beta-estradiol suppresses expression of long-term depression in aged rats.</a> Brain Res Bull. 53, 783-787 (2000).</li><li>Abdul, H. M., Furman, J. L., Sama, M. A., Mathis, D. M., Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NFATs+and+Alzheimer's+Disease.">NFATs and Alzheimer's Disease.</a> Mol Cell Pharmacol. 2, 7-14 (2010).</li><li>Abdul, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+decline+in+Alzheimer's+disease+is+associated+with+selective+changes+in+calcineurin/NFAT+signaling.">Cognitive decline in Alzheimer's disease is associated with selective changes in calcineurin/NFAT signaling.</a> J Neurosci. 29, 12957-12969 (2009).</li><li>Anantharaman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-amyloid+mediated+nitration+of+manganese+superoxide+dismutase:+implication+for+oxidative+stress+in+a+APPNLH/NLH+X+PS-1P264L/P264L+double+knock-in+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Beta-amyloid mediated nitration of manganese superoxide dismutase: implication for oxidative stress in a APPNLH/NLH X PS-1P264L/P264L double knock-in mouse model of Alzheimer's disease.</a> Am J Pathol. 168, 1608-1618 (2006).</li><li>Gengler, S., Hamilton, A., Holscher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity+in+the+hippocampus+of+a+APP/PS1+mouse+model+of+Alzheimer's+disease+is+impaired+in+old+but+not+young+mice.">Synaptic plasticity in the hippocampus of a APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease is impaired in old but not young mice.</a> PLoS One. 5, e9764-e9764 (2010).</li><li>Stringer, J. L., Lothman, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+effects+of+extracellular+calcium+concentrations+on+hippocampal+pyramidal+cell+responses.">In vitro effects of extracellular calcium concentrations on hippocampal pyramidal cell responses.</a> Exp Neurol. 101, 132-146 (1988).</li><li>Landfield, P. W., Pitler, T. A., Applegate, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+high+Mg2+-to-Ca2++ratios+on+frequency+potentiation+in+hippocampal+slices+of+young+and+aged+rats.">The effects of high Mg2+-to-Ca2+ ratios on frequency potentiation in hippocampal slices of young and aged rats.</a> J Neurophysiol. 56, 797-811 (1986).</li><li>Ames, A., Sakanoue, M., Endo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NA,+K,+CA,+MG,+AND+C1+CONCENTRATIONS+IN+CHOROID+PLEXUS+FLUID+AND+CISTERNAL+FLUID+COMPARED+WITH+PLASMA+ULTRAFILTRATE.">NA, K, CA, MG, AND C1 CONCENTRATIONS IN CHOROID PLEXUS FLUID AND CISTERNAL FLUID COMPARED WITH PLASMA ULTRAFILTRATE.</a> J Neurophysiol. 27, 672-681 (1964).</li><li>Gant, J. C., Sama, M. M., Landfield, P. W., Thibault, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+and+simultaneous+emergence+of+multiple+hippocampal+biomarkers+of+aging+is+mediated+by+Ca2+-induced+Ca2++release.">Early and simultaneous emergence of multiple hippocampal biomarkers of aging is mediated by Ca2+-induced Ca2+ release.</a> J Neurosci. 26, 3482-3490 (2006).</li><li>Thibault, O., Hadley, R., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+postsynaptic+[Ca2+]i+and+L-type+calcium+channel+activity+in+aged+hippocampal+neurons:+relationship+to+impaired+synaptic+plasticity.">Elevated postsynaptic [Ca2+]i and L-type calcium channel activity in aged hippocampal neurons: relationship to impaired synaptic plasticity.</a> J Neurosci. 21, 9744-9756 (2001).</li><li>Thibault, O., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increase+in+single+L-type+calcium+channels+in+hippocampal+neurons+during+aging.">Increase in single L-type calcium channels in hippocampal neurons during aging.</a> Science. 272, 1017-1020 (1996).</li><li>Stutzmann, G. E., Caccamo, A., LaFerla, F. M., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysregulated+IP3+signaling+in+cortical+neurons+of+knock-in+mice+expressing+an+Alzheimer's-linked+mutation+in+presenilin1+results+in+exaggerated+Ca2++signals+and+altered+membrane+excitability.">Dysregulated IP3 signaling in cortical neurons of knock-in mice expressing an Alzheimer's-linked mutation in presenilin1 results in exaggerated Ca2+ signals and altered membrane excitability.</a> J Neurosci. 24, 508-513 (2004).</li><li>Stutzmann, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+ryanodine+receptor+recruitment+contributes+to+Ca2++disruptions+in+young,+adult,+and+aged+Alzheimer's+disease+mice.">Enhanced ryanodine receptor recruitment contributes to Ca2+ disruptions in young, adult, and aged Alzheimer's disease mice.</a> J Neurosci. 26, 5180-5189 (2006).</li><li>Lee, H. K., Min, S. S., Gallagher, M., Kirkwood, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NMDA+receptor-independent+long-term+depression+correlates+with+successful+aging+in+rats.">NMDA receptor-independent long-term depression correlates with successful aging in rats.</a> Nat Neurosci. 8, 1657-1659 (2005).</li><li>McNaughton, B. L., Douglas, R. M., Goddard, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+enhancement+in+fascia+dentata:+cooperativity+among+coactive+afferents.">Synaptic enhancement in fascia dentata: cooperativity among coactive afferents.</a> Brain Res. 157, 277-293 (1978).</li></ol>

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इस प्रोटोकॉल में उल्लिखित चरणों का बीमा कि मस्तिष्क dissections के बाहर ले कम से कम के रूप में तेजी से और कुशलता से आयु वर्ग में युवा वयस्क चूहों में, करने में मदद करेगा. हम भी LTP और लिमिटेड पर अपने स्वयं के टुकड़ा अध्ययन सेट की शुरुआत के लिए पर्याप्त विवरण प्रदान करते हैं. यदि उम्र बढ़ने और synaptic समारोह और plasticity में ई. में परिवर्तन के आगे के अन्वेषण के अपने लक्ष्यों में से एक है, वहाँ कम से कम दो अन्य methodological मुद्दों, ऊपर के लिए alluded, कि आगे विचार के लायक हैं. सबसे पहले, कई प्रयोगशालाओं से पता चला है कि सीए 2 +: Mg2 + रिकॉर्डिंग में अनुपात ACSF hippocampal 2,10,24,25 स्लाइस में प्रेरण synaptic plasticity पर एक चिह्नित प्रभाव हो सकता है. स्तनधारी सी.एस.एफ. में, Ca 2 +: Mg2 + अनुपात लगभग एक (जैसे 26 देख). हालांकि, ACSF Ca 2 + Mg2 + 2 करने के लिए करीब अनुपात आमतौर पर synaptic समारोह और plasticity के टुकड़ा के अध्ययन में उपयोग किया जाता है. प्रारंभिक अध्ययन में, इस अभ्यास शायद LTP की प्रेरण का अनुकूलन करने के लिए अनुकूलित किया गया है, तो बाद में सभी plasticity के अध्ययन के लिए दिनचर्या बन गया है. हालांकि, उम्र बढ़ने और विज्ञापन के अध्ययन में इस अभ्यास समस्याग्रस्त neuronal 2 + विनियमन CA में अच्छी तरह से विशेषता मतभेद की वजह से किया जा सकता है . विशेष रूप से, 2 + बाढ़ और / या सीए 2 + प्रेरित Ca 2 Ca + रिलीज आयु वर्ग के चूहों और / या neuronal 3,27-31 सक्रियण के दौरान ई. मॉडल चूहों में ऊंचा है. लिमिटेड के प्रेरण विशेष रूप से ACSF Ca 2 + स्तर में सूक्ष्म परिवर्तन के प्रति संवेदनशील है. हमारे प्रोटोकॉल, जो 2mm 2 Ca + और ​​2 Mg2 मिमी +, आयु वर्ग, लेकिन युवा दो नहीं वयस्क पशुओं, सामान्यतः लिमिटेड में परिणाम जबकि एक 2 Ca का उपयोग पढ़ाई + का उपयोग करता है: Mg2 + दो से करीब अनुपात, वयस्कों में मजबूत लिमिटेड मनाया है में एक उम्र 2,10 या आयु वर्ग के 32 चूहों में अंतर कम लिमिटेड के साथ संयोजन के रूप में की अनुपस्थिति. इन टिप्पणियों को ध्यान से ACSF Ca 2 + और ​​Mg2 + स्तर पर विचार जब Ca 2 + निर्भर वृद्ध और युवा वयस्क पशुओं में plasticity की तुलना की जरूरत पर प्रकाश डाला. दूसरी methodological मुद्दे LTP के postsynaptic 33 विध्रुवण और synaptic शक्ति में संभव है / उम्र बढ़ने के जीनोटाइप मतभेद पर मजबूत निर्भरता का सवाल है. में एक ठेठ LTP प्रयोग, आधारभूत और LTP उत्तेजना तीव्रता आम तौर पर एक आधा अधिक से अधिक (या तीन चौथाई अधिकतम) आयाम EPSP का उत्पादन करने के लिए निकाला जाता है. संभावित समस्या यह है कि आयु वर्ग के चूहों और APP/PS1 चूहों आमतौर पर synaptic अपने युवा और / या जंगली प्रकार समकक्षों सापेक्ष शक्ति कम दिखाने के लिए, जिसका अर्थ है कि आधारभूत EPSP मान भी आयु वर्ग के चूहों और APP/PS1 चूहों में छोटा हो जाएगा. छोटे EPSPs LTP उत्तेजना के दौरान कम विध्रुवण अनुवाद, 33 LTP उत्प्रेरण के लिए एक कम संभावना में जिसके परिणामस्वरूप हो सकता है . इस संभावित उलझाना की वजह से, यह निर्धारित करने के लिए मुश्किल है कि क्या इन जानवरों के एक throughput घाटा, एक plasticity के घाटे या दोनों एक्ज़िबिट. यही है, वृद्ध और / या APP/PS1 चूहों में LTP प्रेरण तंत्र कार्यात्मक बरकरार हो सकता है (कोई plasticity की कमी), हो सकता है लेकिन इन शर्तों के तहत अपर्याप्त उत्तेजित (throughput के घाटे). यह अंतर महत्वपूर्ण है, throughput और plasticity के लिए तंत्र के लिए तंत्र के रूप में बहुत अलग एक विशिष्ट pharmacologic उपचार के लिए जवाब हो सकता है. हम सभी स्लाइस भर में एक ही स्तर (जैसे 1 mV) EPSP आयाम LTP उत्तेजना से पहले सामान्य से LTP प्रेरण पर कम throughput के प्रभाव को कम करने की कोशिश. अन्य रणनीतियों के रूप में अच्छी तरह से प्रभावी हो सकता है (जैसे वोल्टेज या वर्तमान दबाना का उपयोग करने के लिए समूहों में LTP उत्तेजना के दौरान झिल्ली संभावित बराबर) हो सकता है, और जब इन पशु मॉडल में LTP की जांच पर विचार किया जाना चाहिए.

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मक के नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> मछुआ </td><td> BP358 - 1 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> मछुआ </td><td> BP366 - 500 </td></tr><tr><td> के.एच. 2 4 पीओ (तनहा नींव का) </td><td> सिग्मा </td><td> P5379-100g </td></tr><tr><td> 4 MgSO </td><td> सिग्मा </td><td> M2643-500G </td></tr><tr><td> 2 CaCl (dihydrate) </td><td> सिग्मा </td><td> C3306-250G </td></tr><tr><td> 3 NaHCO </td><td> मछुआ </td><td> S233 - 500 </td></tr><tr><td> सी 6 एच 12 हे (6 dextrose) </td><td> मछुआ </td><td> BP350 - 1 </td></tr></tbody></table> तालिका 1. अभिकर्मकों की आवश्यकता <table border="1"><tbody><tr><td> उपकरणों का नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td><td> टिप्पणियाँ </td></tr><tr><td> Erlenmeyer बोतल </td><td> मछुआ </td><td> अमेरिकन प्लान 500-2000 अमेरिकन प्लान-500-1000 </td><td></td></tr><tr><td> मछलीघर bubbler </td><td></td><td></td><td> Oxygenating मीडिया के लिए प्रयुक्त. सबसे पालतू दुकानों पर उपलब्ध है </td></tr><tr><td> 50 एमएल ग्लास बीकर </td><td> मछुआ </td><td> 02-540G </td><td> ACSF में मस्तिष्क storarge के लिए </td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> मछुआ </td><td> 13-374-10 </td><td></td></tr><tr><td> लघु पशु गिलोटिन </td><td> विश्व परिशुद्धता उपकरण (डब्ल्यूपीआई) </td><td> DCAP - एम </td><td></td></tr><tr><td> फ्लैट कागज तौलिया </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> # 11 पंख सर्जिकल ब्लेड </td><td> मछुआ </td><td> 08-916-5B </td><td></td></tr><tr><td> Beebee हड्डी कैंची </td><td> ललित विज्ञान उपकरण (FST) </td><td> 16044-10 </td><td></td></tr><tr><td> Lempert Rongeurs </td><td> Roboz </td><td> RS-8321 </td><td> चूहों के लिए प्रयोग </td></tr><tr><td> फ्राइडमैन - Pearson के Rongeurs </td><td> FST </td><td> 16020-14 </td><td> चूहों या चूहों के लिए प्रयोग </td></tr><tr><td> हिप्पोकैंपस उपकरण </td><td> FST </td><td> 10099-15 </td><td></td></tr><tr><td> चम्मच </td><td></td><td></td><td> एक प्लास्टिक चम्मच करना होगा </td></tr><tr><td> रंग </td><td> मछुआ </td><td> 21 401-25A </td><td> रंग </td></tr><tr><td> सर्जिकल परितारिका कैंची </td><td> FST </td><td> 14058-09 </td><td></td></tr><tr><td> प्लास्टिक हस्तांतरण pipets </td><td> मछुआ </td><td> 13-711-43 </td><td></td></tr><tr><td> 110mm वाटमान फिल्टर पेपर </td><td> मछुआ </td><td> 09-805E </td><td> वाटमान बिल्ली. 1001-110 </td></tr><tr><td> ग्लास और पेट्री डिश </td><td> मछुआ </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Leica VT1000P मैनुअल सूक्ष्म तक्षणी हिल </td><td> Vibratome </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 0.1mm एफए 10 एस पंख ब्लेड </td><td> टेड पेला </td><td> 121-9 </td><td> 0.1mm एफए 10 एस पंख ब्लेड </td></tr><tr><td> Borosilicate ग्लास पाश्चर Pipet (रबर बल्ब के साथ) </td><td> मछुआ </td><td> 13-678-20A </td><td> स्लाइस स्थानांतरित करने के लिए: युक्ति से टूट गया है और बड़े खोलने के लिए गर्मी पॉलिश </td></tr><tr><td> 35 मिमी Polysterine संस्कृति पकवान </td><td> Corning </td><td> 430588 </td><td> विच्छेदन के बाद स्लाइस को इकट्ठा करने के लिए प्रयुक्त </td></tr></tbody></table> तालिका 2 उपकरण और विच्छेदन के लिए सामग्री <table border="1"><tbody><tr><td> उपकरण / सामग्री </td><td> कंपनी </td><td> टिप्पणियां (वैकल्पिक) </td></tr><tr><td> होल्डिंग कक्ष </td><td> कस्टम निर्मित </td><td></td></tr><tr><td> P-97 क्षैतिज पिपेट डांड़ी </td><td> Sutter साधन कं </td><td></td></tr><tr><td> कंपन अलगाव तालिका </td><td> तकनीकी निर्माण निगम (टीएमसी) </td><td></td></tr><tr><td> फैराडे पिंजरे </td><td> कस्टम बनाया </td><td></td></tr><tr><td> Pyrex नीचे Sidearm Aspirator बोतल के साथ (# १,२२०-1L उत्पाद) </td><td> Corning </td><td></td></tr><tr><td> ग्रेविटी contolled नियामक के साथ चतुर्थ सेट (2C8891 # उत्पाद) </td><td> बैक्सटर </td><td></td></tr><tr><td> सेंट्रल वैक्यूम रेखा </td><td></td><td> सबसे आधुनिक प्रयोगशालाओं में उपलब्ध </td></tr><tr><td> 95% हे 2 / 5% सीओ 2 गैस मिक्स </td><td> स्काटलैंड का निवासीटी सकल कं </td><td></td></tr><tr><td> TygonTM लैब टयूबिंग 2 हे / 2 प्रसव के लिए </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> गैर विषैले, गैर ऑक्सीकरण, आकार के एक किस्म में आता है. </td></tr><tr><td> ग्रहण E600FN माइक्रोस्कोप </td><td> Nikon </td><td> infared फिल्टर, और GFP, डी एस-Red2 फिल्टर के पास 10x और 40x उद्देश्यों के साथ </td></tr><tr><td> कूल स्नैप ES डिजिटल कैमरा </td><td> Photometrics </td><td> कूल स्नैप ES डिजिटल कैमरा </td></tr><tr><td> प्रतिदीप्त प्रकाशक एक्स उद्धृत </td><td> EXFO </td><td> प्रतिदीप्त प्रकाशक एक्स उद्धृत </td></tr><tr><td> माइक्रोस्कोप प्लेटफार्म </td><td> Siskiyou </td><td> कस्टम इकट्ठे </td></tr><tr><td> RC-22 पनडुब्बी रिकॉर्डिंग कक्ष (# उत्पाद 64-0228) </td><td> वार्नर उपकरण (WI) </td><td> पी 1-मंच और चरण अनुकूलक (# 64-0277 वार्नर से उत्पाद) की आवश्यकता </td></tr><tr><td> TC2BIP 2/3Ch तापमान नियंत्रक </td><td> सेल Microcontrols </td><td> TC2BIP 2/3Ch तापमान नियंत्रक </td></tr><tr><td> 4 ऐक्सिस मैनुअल लघु जोड़तोड़ </td><td> Siskiyou </td><td></td></tr><tr><td> प्लेटिनम Iridium वायर (.002 में) (आइटम PTT0203 #) </td><td> थोक मूल्य सूचकांक </td><td></td></tr><tr><td> A365 प्रोत्साहन अलगाने </td><td> थोक मूल्य सूचकांक </td><td> A365 प्रोत्साहन अलगाने </td></tr><tr><td> 700b प्रवर्धक Multiclamp </td><td> Axon उपकरण </td><td></td></tr><tr><td> Digidata 1322A ए / डी कनवर्टर </td><td> Axon उपकरण </td><td></td></tr><tr><td> PClamp सॉफ्टवेयर </td><td> Axon उपकरण </td><td></td></tr><tr><td> पर्सनल कंप्यूटर (Pentium 4) </td><td> गड्ढा </td><td></td></tr></tbody></table> टेबल 3. इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी उपकरण और सामग्री

preparation of acute hippocampal slices from rats and transgenic mice for the study of synaptic alterations during aging and amyloid pathology

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The hippocampus can be extracted quickly and easily from rats and mice and slices remain viable for hours in oxygenated artificial cerebrospinal fluid. Moreover, basic electrophysisologic techniques are easily applied to the investigation of synaptic function in hippocampal slices and have provided some of the best biomarkers for cognitive impairments. The hippocampal slice is especially popular for the study of synaptic plasticity mechanisms involved in learning and memory. Changes in the induction of long-term potentiation and depression (LTP and LTD) of synaptic efficacy in hippocampal slices (or lack thereof) are frequently used to describe the neurologic phenotype of cognitively-impaired animals and/or to evaluate the mechanism of action of nootropic compounds. This article outlines the procedures we use for preparing hippocampal slices from rats and transgenic mice for the study of synaptic alterations associated with brain aging and Alzheimer's disease (AD)1-3. Use of aged rats and AD model mice can present a unique set of challenges to researchers accustomed to using younger rats and/or mice in their research. Aged rats have thicker skulls and tougher connective tissue than younger rats and mice, which can delay brain extraction and/or dissection and consequently negate or exaggerate real age-differences in synaptic function and plasticity. Aging and amyloid pathology may also exacerbate hippocampal damage sustained during the dissection procedure, again complicating any inferences drawn from physiologic assessment. Here, we discuss the steps taken during the dissection procedure to minimize these problems. Examples of synaptic responses acquired in "healthy" and "unhealthy" slices from rats and mice are provided, as well as representative synaptic plasticity experiments. The possible impact of other methodological factors on synaptic function in these animal models (e.g. recording solution components, stimulation parameters) are also discussed. While the focus of this article is on the use of aged rats and transgenic mice, novices to slice physiology should find enough detail here to get started on their own studies, using a variety of rodent models.

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Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

इस लेख synaptic मस्तिष्क उम्र बढ़ने और अल्जाइमर रोग जैसे उम्र से संबंधित neurodegenerative रोगों, के साथ जुड़े परिवर्तन के अध्ययन के लिए चूहों और ट्रांसजेनिक चूहों से hippocampal स्लाइस की तैयारी के लिए प्रक्रियाओं रूपरेखा.

चूहे और ट्रांसजेनिक चूहों से एजिंग और Amyloid पैथोलॉजी के दौरान Synaptic बदलाव के अध्ययन के लिए तीव्र hippocampal स्लाइस की तैयारी

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Oligomeric &beta;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Preparation of Oligomeric &#946;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Oligomeric β-amyloid की तैयारी<sub1-42> Hippocampal स्लाइसें और synaptic plasticity हानि की प्रेरण

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). ...

Vibrodissociation of Neurons from Rodent Brain Slices to Study Synaptic Transmission and Image Presynaptic Terminals

कृंतक मस्तिष्क स्लाइसें से न्यूरॉन्स की Vibrodissociation Synaptic पारेषण और छवि presynaptic टर्मिनल अध्ययन करने के लिए

Mechanical dissociation of neurons from the central nervous system has the advantage that presynaptic boutons remain attached to the isolated neuron of ...

Preparation of Acute Subventricular Zone Slices for Calcium Imaging

कैल्शियम इमेजिंग के लिए तीव्र subventricular क्षेत्र स्लाइस की तैयारी

The subventricular zone (SVZ) is one of the two neurogenic zones in the postnatal brain. The SVZ contains densely packed cells, including neural ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

तीव्र hippocampal स्लाइस में Synaptically पैदा Astroglial और neuronal प्रतिक्रियाएँ की दोहरी electrophysiological रिकॉर्डिंग

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

माउस हिप्पोकैंपस में Oligomeric Amyloid-बीटा की Stereotaxic आसव

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Investigation of Synaptic Tagging/Capture and Cross-capture using Acute Hippocampal Slices from Rodents

कृन्तकों से तीव्र हिप्पोकैम्पस स्लाइस का उपयोग Synaptic टैगिंग / कैद और क्रॉस-कब्जा की जांच

Synaptic tagging and capture (STC) and cross-tagging are two important mechanisms at cellular level that explain how synapse-specificity and associativity ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

एक अनुकूलित N-मिथाइल-D-glucamine सुरक्षात्मक वसूली विधि का उपयोग कर तीव्र मस्तिष्क स्लाइस की तैयारी

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

एक छोटी मात्रा रीसाइक्लिंग में बनाए रखा तीव्र हिप्पोकैम्पस स्लाइस में Synaptic प्लास्टिक रिकॉर्डिंग-, छिड़काव-, और डुबकी-प्रकार चैंबर प्रणाली

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice

ग्लूटामेट रिलीज के एकल सिनैप्स संकेतक और सामान्य और हंटिंगटन चूहों से तीव्र मस्तिष्क स्लाइस में तेज

Synapses are highly compartmentalized functional units that operate independently on each other. In Huntington&#39;s disease (HD) and other ...

Preparation of Acute Human Hippocampal Slices for Electrophysiological Recordings

इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग के लिए तीव्र मानव हिप्पोकैम्पल स्लाइस की तैयारी

Epilepsy affects about 1% of the world population and leads to a severe decrease in quality of life due to ongoing seizures as well as high risk for ...