Name: using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice
Uploaded: 2011-04-14T11:00:00
Duration: 10 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice at JoVE.com

فإن الكتاب أن نعترف المشورة الفنية من Briles ديفيد (جامعة ألاباما في برمنغهام ، ألاباما ، الولايات المتحدة). نود أن نشكر إيفيت تشن ، موظف رعاية الحيوان من جامعة ملبورن ، وديفيد تايلور ، مدير مرفق الحيوان ، للحصول على اقتراحات مفيدة ومناقشات بشأن الرفق بالحيوان والأخلاق ووضع معايير التدخل ونقطة نهاية للتجارب إنسانية صفها في هذه المخطوطة. معتمدة أوديليا Wijburg والقراءة من قبل باتريك رايت زمالة NHMRC RD ، يتم اعتماد كيرستي قصيرة من الدعم GSK منح دراسات عليا ومنحة Puzey.

<ol>
	<li>Brundage, J. F., Shanks, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths+from+bacterial+pneumonia+during+1918-19+influenza+pandemic.">Deaths from bacterial pneumonia during 1918-19 influenza pandemic.</a> Emerg Infect Dis. 14, 1193-1199 (2008).</li><li>Petersdorf, R. G., Fusco, J. J., Harter, D. H., Albrink, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+infections+complicating+Asian+influenza.">Pulmonary infections complicating Asian influenza.</a> AMA Arch Intern Med. 103, 262-272 (1959).</li><li>Diavatopoulos, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influenza+A+virus+facilitates+Streptococcus+pneumoniae+transmission+and+disease.">Influenza A virus facilitates Streptococcus pneumoniae transmission and disease.</a> Faseb J. , (2010).</li><li>Orihuela, C. J., Gao, G., Francis, K. P., Yu, J., Tuomanen, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis.">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J Infect Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li><li>Kadurugamuwa, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+monitoring+of+pneumococcal+meningitis+and+evaluation+of+treatment+efficacy+in+an+experimental+mouse+model.">Noninvasive monitoring of pneumococcal meningitis and evaluation of treatment efficacy in an experimental mouse model.</a> Mol Imaging. 4, 137-142 (2005).</li><li>Smith, M. W., Schmidt, J. E., Rehg, J. E., Orihuela, C. J., McCullers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pro-+and+anti-inflammatory+molecules+in+a+mouse+model+of+pneumococcal+pneumonia+after+influenza.">Induction of pro- and anti-inflammatory molecules in a mouse model of pneumococcal pneumonia after influenza.</a> Comp Med. 57, 82-89 (2007).</li><li>Owen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal-associated+lymphoid+tissue+and+olfactory+epithelium+as+portals+of+entry+for+Burkholderia+pseudomallei+in+murine+melioidosis.">Nasal-associated lymphoid tissue and olfactory epithelium as portals of entry for Burkholderia pseudomallei in murine melioidosis.</a> J Infect Dis. 199, 1761-1770 (2009).</li><li>Luker, G. D., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luciferase+real-time+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+viral+pathogenesis.">Luciferase real-time bioluminescence imaging for the study of viral pathogenesis.</a> Methods Mol Biol. 292, 285-296 (2005).</li><li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases.">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cell Microbiol. 9, 2315-2322 (2007).</li></ol>

وقد رعت إنتاج هذه المادة عن طريق الفيديو من خلال العلوم الحياتية الفرجار.

في الجسم الحي مع آلة التصوير IVIS هي منهجية فريدة من نوعها تسمح التصور في الوقت الحقيقي من الجراثيم المرضية 4 ، 6-9. هنا ، ونعرض في تطبيق هذه التكنولوجيا لفهم التآزر بين س. الرئوية والأنفلونزا فيروس في الفئران الرضع. نظرا للطبيعة غير الغازية من هذه التقنية ، تمكنا من رصد تطور العدوى في كل فأر الفردية على مر الزمن. وقد أتاح لنا هذا لتوثيق حركية انتقال الالتهاب الرئوي بين الفئران الرضع المشارك يضم 3. الطبيعة غير الغازية من هذه التقنية تمكن الباحثون لاستخدام عدد أقل من الحيوانات في التجربة وبالتالي الحد من استخدام الحيوانات. ومن الممكن أيضا استخدام الجهاز لتصور IVIS نشر العدوى إلى مواقع غير معروفة سابقا للعدوى في الجسم ، فضلا عن عينات من مواقع لا بسهولة عن طريق تشريح (مثل الأذن الوسطى). قبل الشروع في تجارب التصوير ، وأكدنا أن مستويات الاستعمار من سلالة EF3030 bioluminescent كانت مماثلة للمستويات الاستعمار من سلالة EF3030 الأصل بواسطة تعداد عدد قابلة للحياة في الخليط الأنسجة. بالإضافة إلى ذلك ، أكد لنا أولا أن العدوى بفيروس الأنفلونزا أسفرت عن زيادة الحمولة bioluminescent EF3030 في البلعوم الأنفي للاستعمار الحيوانات كما هو موضح مع سلالة EF3030 الأصل (النتائج غير معروضة). في حين أن التكنولوجيا IVIS من السهل أن تعمل ويولد استنساخه وسهلة الفهم البيانات ، لا بد من التجارب مصممة بعناية بحيث يتم تكبير حساسية وفائدة هذه التكنولوجيا. على سبيل المثال ، تتأثر حساسية الكاميرا IVIS من عمق والتعتيم من النسيج 8 ، والتي في تجربتنا ، ويزيد من حد الكشف عن إشارات مصدرها bioluminescent الرئتين. بالإضافة إلى ذلك ، الفرو والجلد الداكن المصطبغة يقلل من انتقال الضوء بمقدار 10 أضعاف (بالمقارنة مع الفئران أصلع) 8. في حين أن تطوير هذا الأسلوب ، ونحن على هذا البروتوكول الأمثل للاستخدام مع C57BL يوم 5-14 القديمة / 6 و الفئران أظهرت منذ عام والتي يمكن استخدامها للكشف عن IVIS استعمار القديم C57BL 20 يوما / 6 مع الفئران S. bioluminescent EF3030 الرئوية. ومع ذلك ، قد يتم الكشف عن زيادة إشارة عندما يتم تنفيذ هذه التجارب على الفئران عارية أو BALB / ج. ومع ذلك ، الكاميرا IVIS يمثل نهجا جديدا لرصد وتوصيف وفهم في نهاية المطاف في تطوير المجراة من داء المكورات الرئوية التالية الأنفلونزا من عدوى الفيروس.

using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice

خلال وباء فيروس الإنفلونزا عام 1918 ، التي قتل فيها ما يقرب من 50 مليون شخص في العالم ، كانت الغالبية العظمى من القتلى لم يكن نتيجة للعدوى بفيروس الانفلونزا وحدها. بدلا من ذلك ، يعتقد معظم الأفراد أن يستسلم لعدوى بكتيرية ثانوية ، والناجمة في الغالب عن بكتيريا المكورات العقدية الرئوية (المكورة الرئوية و). وقد تم لاحقا علاقة التعاون بين العدوى الناجمة عن فيروس الإنفلونزا والمكورة الرئوية والتي لوحظت خلال 1957 جائحة فيروس الآسيوية ، وكذلك أثناء الفاشيات الموسمية من فيروس (مراجعة في 2 ، 1). هنا ، نحن تصف بروتوكول يستخدم لتحقيق هذه الآلية (ق) التي يمكن أن تشارك في زيادة معدلات الإصابة بالمرض نتيجة لفيروس انفلونزا المتزامنة وس. الرئوية العدوى. وقد طورنا نموذجا لموثوق الفئران الرضع والتظاهر بتكاثر آثار عدوى فيروس الانفلونزا من الفئران مع المستعمر س. الرئوية. باستخدام هذا البروتوكول ، وقدمنا ​​رؤية واضحة لأول مرة في حركية انتقال الالتهاب الرئوي بين المشارك يضم الفئران حديثي الولادة به في مجال التصوير فيفو 3.

Watch this Scientific Journal Video about Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice at JoVE.com

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

والعدوى المتزامنة مع فيروس الأنفلونزا A هو واحد من العوامل المتورطة في تحريض أمراض الرئوية الغازية خلال أعراض<em&gt; العقدية الرئوية</em&gt; النقل. نحن هنا وصفا لطريقة العدوى المختلطة باستخدام الفئران الرضع للتحقيق في تآزر بين هذه العوامل الممرضة two الجهاز التنفسي.

باستخدام التصوير Bioluminescent بالتحقيق في التآزر بين العقدية الرئوية والأنفلونزا من الفيروسات في الفئران الرضع

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

تعيش خلية من التصوير<emالعصوية الرقيقة> و العقدية الرئوية الآلي باستخدام الميكروسكوب مرور الزمن

During the last few years scientists became increasingly aware that average data obtained from microbial population based experiments are not ...

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

البكتيرية التصوير Bioluminescent<em&gt; في الجسم الحي</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

توصيف الاستجابات الالتهابية خلال الاستعمار داخل الشرج مع الالتهاب الرئوي العقدي

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

رصد التغيرات في غشاء التقاطب، غشاء النزاهة، وبين الخلايا ايون التركيزات في<em&gt; العقدية الرئوية</em&gt; استخدام الأصباغ نيون

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae Using the Quellung Reaction

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae Using the Quellung Reaction

المحفظة المصلي من<em&gt; العقدية الرئوية</em&gt; باستخدام تفاعل الانتباج

There are over 90 different capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus). As well as being a tool for understanding pneumococcal ...

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae by Latex Agglutination

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae by Latex Agglutination

المحفظة المصلي من<em&gt; العقدية الرئوية</em&gt; من جانب تراص اللاتكس

Latex agglutination reagents are widely used in microbial diagnosis, identification and serotyping. Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) is a major ...

Influenza Virus Propagation in Embryonated Chicken Eggs

نشر فيروس الانفلونزا في أجنة بيض الدجاج

Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

عزل وتحليل العدلة لتحديد ما دورها في الغدد اللمفاوية حساسية الخلية وكلاء العلاجية

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

فيروس الإنفلونزا أ الفيروس دراسات في نموذج ماوس للإصابة

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

Measuring Influenza Neutralizing Antibody Responses to A(H3N2) Viruses in Human Sera by Microneutralization Assays Using MDCK-SIAT1 Cells

Measuring Influenza Neutralizing Antibody Responses to AH3N2 Viruses in Human Sera by Microneutralization Assays Using MDCK-SIAT1 Cells

قياس الإنفلونزا تحييد ردود الأجسام المضادة للفيروسات A(H3N2) في الأمصال البشرية قبل درياقي فحوصات باستخدام خلايا مدكك-SIAT1

Neutralizing antibodies against hemagglutinin (HA) of influenza viruses are considered the main immune mechanism that correlates with protection for ...