Name: ex vivo culture of patient tissue &amp; examination of gene delivery
Uploaded: 2010-12-20T18:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Culture of Patient Tissue & Examination of Gene Delivery at JoVE.com

Este trabajo fue financiado a través del sur de Cork Hospital Victoria de fondos del Hospital Universitario de mama, la Sociedad del Cáncer de Irlanda (CRI07TAN) y el Centro de Investigación del Cáncer Cork. Replicación incompetente adenovirus recombinante partículas de 5 bajo el control transcripcional del promotor de CMV fue una especie de regalo del profesor Andrew Baker, de la Universidad de Glasgow.

Preparación de medios y reactivos <ol><li> Solución de antibióticos Tampón fosfato salino (PBS) con 200 U / ml de penicilina, 200 mg / ml de estreptomicina, 5 mg / ml fungizone </li><li> Recogida y tratamiento de soporte Dulbecco Eagle modificado (DMEM) con 200 U / ml de penicilina, 200 mg / ml de estreptomicina, 5 mg / ml fungizone </li><li> Medio de cultivo Medio de colección que contiene 10% inactivado por calor suero fetal bovino </li></o...

<ol>
	<li>van de Bovenkamp, M., Groothuis, G. M., Draaisma, A. L., Merema, M. T., Bezuijen, J. I., van Gils, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision-cut+liver+slices+as+a+new+model+to+study+toxicity-induced+hepatic+stellate+cell+activation+in+a+physiologic+milieu.">Precision-cut liver slices as a new model to study toxicity-induced hepatic stellate cell activation in a physiologic milieu.</a> Toxicol Sci. 85, 632-638 (2005).</li><li>Speirs, V., Green, A. R., Walton, D. S., Kerin, M. J., Fox, J. N., Carleton, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short-term+primary+culture+of+epithelial+cells+derived+from+human+breast+tumours.">Short-term primary culture of epithelial cells derived from human breast tumours.</a> Br J Cancer. 78, 1421-1429 (1998).</li><li>Kirby, T. O., Rivera, A., Rein, D., Wang, M., Ulasov, I., Breidenbach, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+ex+vivo+model+system+for+evaluation+of+conditionally+replicative+adenoviruses+therapeutic+efficacy+and+toxicity.">A novel ex vivo model system for evaluation of conditionally replicative adenoviruses therapeutic efficacy and toxicity.</a> Clin Cancer Res. 10, 8697-8703 (2004).</li><li>Josserand, V., Texier-Nogues, I., Huber, P., Favrot, M. C., Coll, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+in+vivo+optical+imaging+of+the+lacZ+and+luc+gene+expression+in+mice.">Non-invasive in vivo optical imaging of the lacZ and luc gene expression in mice.</a> Gene Ther. 14, 1587-1593 (2007).</li></ol>

Se describe un paciente ex vivo de tejidos método de cultivo y sistema de detección de bioluminiscencia para la evaluación de la entrega de genes dentro de no fija el tejido humano. El método ofrece una forma simple y reproducible de los cortes de tejido de cultivo. Tiene un potencial significativo, ya que permite el estudio de la administración de genes en el tejido humano intacto, el análisis de la entrega de genes en una variedad de tejidos humanos, incluidos los tejidos malignos y pueden proporcionar ...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>D6429</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>D8537</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Firefly Luciferin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biosynth, Switzerland</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dermabond</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Johnson &amp; Johnson</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vibrotome</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica microsystems</td>
<td>VT 1000 A</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

ex vivo culture of patient tissue &amp; examination of gene delivery

Este vídeo describe el uso de tejido de un paciente como un modelo ex vivo para el estudio de la administración de genes. Tejido fresco obtenido del paciente en el momento de la cirugía se rebana y se mantienen en cultivo. El sistema vivo ex modelo permite la entrega física de los genes en el tejido del paciente intacto y la expresión de genes es analizado por imágenes de bioluminiscencia utilizando el sistema de detección de IVIS. El sistema de detección bioluminiscentes demuestra la cuantificación rápida y precisa de la expresión génica dentro de sectores individuales sin necesidad de sacrificar tejido. Este tejido rebanada sistema de cultivo puede ser utilizado en una variedad de tipos de tejidos incluyendo los tejidos normales y malignos, y nos permite estudiar los efectos de la naturaleza heterogénea del tejido intacto y el alto grado de variabilidad entre los pacientes individuales. Este modelo de sistema se podría utilizar en ciertas situaciones, como una alternativa a los modelos animales y como un modo complementario preclínicas antes de entrar en ensayos clínicos.

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Ex Vivo Culture of Patient Tissue & Examination of Gene Delivery

En este artículo se describe la cultura de los cortes de tejido de pacientes para estudios de administración de genes y el posterior análisis de la expresión génica mediante imágenes de bioluminiscencia IVIS.

Ex Vivo Cultura de tejido del paciente y examen de la entrega de genes

This video describes the use of patient tissue as an ex vivo model for the study of gene delivery.  Fresh patient tissue obtained at the time of surgery ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Ex Vivo Culture of Patient Tissue &amp; Examination of Gene Delivery

Ex Vivo Infection of Live Tissue with Oncolytic Viruses

Ex Vivo Infection of Live Tissue with Oncolytic Viruses

Ex infección in vivo del tejido vivo con virus oncolíticos

Oncolytic Viruses (OVs) are novel therapeutics that selectively replicate in and kill tumor cells1. Several clinical trials evaluating the effectiveness ...

Investigación

Medicina

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

Un modelo ortotópico de cáncer de vejiga de Estudios de liberación de genes

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Paciente celulares derivadas Cultura y aislamiento de CD133<sup&gt; +</sup&gt; Putativos células madre del cáncer de melanoma

Despite improved treatments options for melanoma available today, patients with advanced malignant melanoma still have a poor prognosis for ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Humano Dupuytren<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultura para el Estudio de miofibroblastos y matriz extracelular Interacciones

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Ex vivo Live Imaging of Lung Metastasis and Their Microenvironment

Ex vivo Live Imaging of Lung Metastasis and Their Microenvironment

Ex vivo de imágenes en vivo de metástasis pulmonar y su microambiente

Metastasis is a major cause for cancer-related morbidity and mortality. Metastasis is a multistep process and due to its complexity, the exact cellular ...

Generation of Microtumors Using 3D Human Biogel Culture System and Patient-derived Glioblastoma Cells for Kinomic Profiling and Drug Response Testing

Generación de microtumores Uso Humano 3D Biogel sistema de cultivo y las células de glioblastoma derivados de los pacientes para Kinomic de perfiles y pruebas de respuesta a los fármacos

The use of patient-derived xenografts for modeling cancers has provided important insight into cancer biology and drug responsiveness. However, they are ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Un pequeño modelo de la perfusión hepática normotérmica Ex Vivo

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Adeno-Associated Virus-Mediated Delivery of CRISPR for Cardiac Gene Editing in Mice

Entrega de mediada por Virus adeno-asociado de CRISPR para Gene cardiaco en ratones

The clustered, regularly interspaced, short, palindromic repeat (CRISPR) system has greatly facilitated genome engineering in both cultured cells and ...

Lentiviral Vector-mediated Gene Therapy of Hepatocytes Ex Vivo for Autologous Transplantation in Swine

Lentiviral Vector-mediated Gene Therapy of Hepatocytes Ex Vivo for Autologous Transplantation in Swine

Terapia del Gene mediada por vectores lentivirales de hepatocitos Ex Vivo para trasplante autólogo en cerdos

Gene therapy is an ideal choice to cure many inborn errors of metabolism of the liver. Ex-vivo, lentiviral vectors have been used successfully in the ...

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

Ex Vivo modelo de cultura órgano córneo para la curación de heridas estudios

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...