Name: organotypic hippocampal slice cultures
Uploaded: 2011-02-03T17:30:00
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1. Hippocampal स्लाइस की तैयारी शुरू करने से पहले. <ol><li> Teflon चादर का एक टुकड़ा रखकर और एक नया ब्लेड बढ़ते ऊतक slicer तैयार करें. </li><li> टिशू कल्चर हुड (टीसी) 70% इथेनॉल के साथ पोछो और विदारक माइक्रोस्कोप के अंदर सेट. डाकू, माइक?...

<ol>
	<li>Martin, S. J., Grimwood, P. D., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity+and+memory:+an+evaluation+of+the+hypothesis.">Synaptic plasticity and memory: an evaluation of the hypothesis.</a> Annu Rev Neurosci. 23, 649-711 (2000).</li><li>Bliss, T. V., Collingridge, G. L., Morris, R. G. I. n. t. r. o. d. u. c. t. i. o. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+potentiation+and+structure+of+the+issue.">Long-term potentiation and structure of the issue.</a> Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 358, 607-611 (2003).</li><li>Shepherd, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The synaptic organization of the brain. , (2004).</li><li>Malinow, R., Tsien, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presynaptic+enhancement+shown+by+whole-cell+recordings+of+long-term+potentiation+in+hippocampal+slices.">Presynaptic enhancement shown by whole-cell recordings of long-term potentiation in hippocampal slices.</a> Nature. 346, 177-180 (1990).</li><li>Malinow, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction+of+green+fluorescent+protein+(GFP)+into+hippocampal+neurons+through+viral+infection.">Introduction of green fluorescent protein (GFP) into hippocampal neurons through viral infection.</a> Cold Spring Harb Protoc. , (2010).</li><li>Shi, S., Hayashi, Y., Esteban, J. A., Malinow, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subunit-specific+rules+governing+AMPA+receptor+trafficking+to+synapses+in+hippocampal+pyramidal+neurons.">Subunit-specific rules governing AMPA receptor trafficking to synapses in hippocampal pyramidal neurons.</a> Cell. 105, 331-343 (2001).</li><li>Woods, G., Zito, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+gene+gun+bullets+and+biolistic+transfection+of+neurons+in+slice+culture.">Preparation of gene gun bullets and biolistic transfection of neurons in slice culture.</a> J Vis Exp. , (2008).</li><li>Esteban, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKA+phosphorylation+of+AMPA+receptor+subunits+controls+synaptic+trafficking+underlying+plasticity.">PKA phosphorylation of AMPA receptor subunits controls synaptic trafficking underlying plasticity.</a> Nat Neurosci. 6, 136-143 (2003).</li><li>Mainen, Z. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+imaging+in+living+brain+slices.">Two-photon imaging in living brain slices.</a> Methods. 18, 231-239 (1999).</li><li>Barria, A., Malinow, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subunit-specific+NMDA+receptor+trafficking+to+synapses.">Subunit-specific NMDA receptor trafficking to synapses.</a> Neuron. 35, 345-353 (2002).</li><li>Stoppini, L., Buchs, P. A., Muller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+organotypic+cultures+of+nervous+tissue.">A simple method for organotypic cultures of nervous tissue.</a> J Neurosci Methods. 37, 173-182 (1991).</li><li>Simoni, A. D. e., Griesinger, C. B., Edwards, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+rat+CA1+neurones+in+acute+versus+organotypic+slices:+role+of+experience+in+synaptic+morphology+and+activity.">Development of rat CA1 neurones in acute versus organotypic slices: role of experience in synaptic morphology and activity.</a> J Physiol. 550, 135-147 (2003).</li></ol>

इस विधि पहले Stoppini एट अल द्वारा वर्णित विधि पर आधारित है 11. और संस्कृति hippocampal स्लाइस के लिए एक तेजी से तरीके प्रदान करता है. इस प्रोटोकॉल का सबसे महत्वपूर्ण पहलू स्लाइस बाँझ बनाए रखना है, इसलिए यह ?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Cell culture inserts</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>PICM03050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6 well plates</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Falcon</td>
<td>353046</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue Slicer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>51425/51415</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>SZX7-ILLD2-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td> Hippocampus dissecting tool</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>10099-15</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Large utility scissors. Perfection</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>37500-00/37000-00 Right/ Left handed</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Iris Spatula</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>10093-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Straight spatula</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>10094-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rounded spoon micro spatula</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>57949-039</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting single cutting edge needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Electron Microscopy Science</td>
<td>72946</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting tweezers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dummont</td>
<td>#2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Small dissecting scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>14060-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM Eagle medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro</td>
<td>50-019 PB</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Horse serum heat inactivated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>26050-88</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine (200 mM)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25030081</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CaCl2 (1 M)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C3881</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MgSO4 (1 M)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M2773</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin (1 mg/ml), dissolved in HCl 0.01 N</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>I0516</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ascorbic Acid, solution (25%)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A4544</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>D-Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G5767</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>NaHCO3</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S6014</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hepes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>H7523</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sucrose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S5016</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Phenol Red Solution 0.5% in DPBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P0290</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>KCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P3911</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MgCl2 (1 M)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M9272</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

organotypic hippocampal slice cultures

हिप्पोकैम्पस, limbic प्रणाली के एक घटक, दीर्घकालिक स्मृति और स्थानिक नेविगेशन 1 में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. Hippocampal न्यूरॉन्स मजबूत सक्रियण के संक्षिप्त अवधि के बाद उनके कनेक्शन की ताकत को संशोधित कर सकते हैं. इस घटना, दीर्घकालिक potentiation (LTP) के रूप में जाना जाता घंटों या दिनों के लिए पिछले है और सबसे अच्छा सीखने और स्मृति 2 के लिए उम्मीदवार तंत्र बन सकता है. इसके अलावा, अच्छी तरह से परिभाषित और हिप्पोकैम्पस 3 का शरीर रचना विज्ञान कनेक्टिविटी यह एक शास्त्रीय मॉडल synaptic पारेषण और synaptic plasticity 4 अध्ययन प्रणाली बना दिया है. Hippocampal synapses के फिजियोलॉजी के बारे में हमारी समझ के रूप में वृद्धि हुई है और आणविक खिलाड़ियों की पहचान बन गया, synaptic प्रोटीन में हेरफेर करने की जरूरत अनिवार्य हो गया. Organotypic hippocampal संस्कृतियों आसान जीन हेरफेर और सटीक औषधीय हस्तक्षेप के लिए संभावना की पेशकश लेकिन synaptic संगठन है कि दिनचर्या संस्कृति dissociated न्यूरॉन्स तरीकों की तुलना में एक अधिक प्राकृतिक संदर्भ में synapse समारोह को समझने के लिए महत्वपूर्ण है बनाए रखने. यहाँ हम एक विधि को तैयार करने और संस्कृति hippocampal स्लाइस कि आसानी से अन्य मस्तिष्क क्षेत्रों के लिए अनुकूलित किया जा सकता उपस्थित थे. इस विधि आनुवंशिक हेरफेर के लिए स्लाइस वायरल संक्रमण 5,6 या biolistics 7 की तरह अलग अलग दृष्टिकोण का उपयोग करने के लिए आसान पहुँच अनुमति देता है. इसके अलावा, स्लाइस जैव रासायनिक 8 assays के लिए आसानी से बरामद किया जा सकता है, या इमेजिंग 9 या electrophysiological 10 प्रयोगों के लिए सूक्ष्मदर्शी को हस्तांतरित.

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Organotypic Hippocampal Slice Cultures

हम एक विधि का वर्णन है कि आसानी से अन्य मस्तिष्क क्षेत्रों के लिए अनुकूलित किया जा सकता organotypic hippocampal स्लाइस तैयार. मस्तिष्क स्लाइसें झरझरा झिल्ली और एक अंतरफलक के रूप में की अनुमति दी है संस्कृति मीडिया पर रखी हैं. इस विधि संस्कृति में 2 सप्ताह के लिए हिप्पोकैम्पस के सकल वास्तुकला को बरकरार रखता है.

Organotypic hippocampal टुकड़ा संस्कृतियों

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury

Neuronal चोट की जांच करने के लिए Organotypic hippocampal स्लाइस संस्कृति मॉडल

Organotypic hippocampal slice culture is an in vitro method to examine mechanisms of neuronal injury in which the basic architecture and composition of ...

Organotypic Cerebellar Cultures: Apoptotic Challenges and Detection

Organotypic अनुमस्तिष्क संस्कृति: apoptotic चुनौतियां और जांच

Organotypic cultures of neuronal tissue were first introduced by Hogue in 1947 1,2 and have constituted a major breakthrough in the field of neuroscience. ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

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भ्रूणीय ventral midbrain के Organotypic स्लाइस संस्कृति: एक डोपामिनर्जिक neuronal विकास अध्ययन प्रणाली इन विट्रो में</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

Organotypic टुकड़ा संस्कृतियों में Purkinje सेल वृक्ष के समान आकृति विज्ञान के विश्लेषण

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Post-embedding Immunogold Labeling of Synaptic Proteins in Hippocampal Slice Cultures

Hippocampal टुकड़ा संस्कृतियों में पोस्ट-embedding Synaptic प्रोटीन Immunogold लेबल

Immunoelectron microscopy is a powerful tool to study biological molecules at the subcellular level. Antibodies coupled to electron-dense markers such as ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

Organotypic स्लाइस संस्कृति Oligodendrocyte गतिशीलता और myelination अध्ययन

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Organotypic hippocampal स्लाइस में बनती पूरे सेल रिकॉर्डिंग

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct ...

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

में neurovascular remodeling के विश्लेषण Entorhino-हिप्पोकैम्पस Organotypic स्लाइस संस्कृति

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures As a Model to Study Neuroprotection and Invasiveness of Tumor Cells

Organotypic हिप्पोकैम्पस एक मॉडल के रूप में Neuroprotection और ट्यूमर कोशिकाओं की इनवेसिव अध्ययन के लिए संस्कृतियों स्लाइस

In organotypic hippocampal slice cultures (OHSC), the morphological and functional characteristics of both neurons and glial cells are well preserved. ...

Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Cultures of Embryonic Mouse Brains for Live-Imaging of Migrating GABAergic Interneurons

Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Cultures of Embryonic Mouse Brains for Live-Imaging of Migrating GABAergic Interneurons

माजी Utero Electroporation और Organotypic स्लाइस भ्रूण माउस दिमाग के लाइव के लिए संस्कृतियों-GABAergic न्यूरॉन्स पलायन की इमेजिंग

GABAergic interneurons (INs) are critical components of neuronal networks that drive cognition and behavior. INs destined to populate the cortex migrate ...