Name: rnai interference by dsrna injection into drosophila embryos
Uploaded: 2011-04-11T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر ستيفن لطواقم dysfusion الضد ، [كدنا] Dys والذباب 1118 ث.

1. كوكتيل الجنين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء الأقفاص عند 25 درجة مئوية ويتم تغيير باستخدام 2-4 يوما ث عصير flies.Grape 1118 لوحات في كل ساعة خلال اليوم لمزامنة جمع البيض خلال فترة 1-2 أيام قبل جمع </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الأجنة ل1hr عند 25 در?...

<ol>
	<li>St Johnston, D., Nusslein-Volhard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+pattern+and+polarity+in+the+Drosophila+embryo.">The origin of pattern and polarity in the Drosophila embryo.</a> Cell. 68, 201-219 (1992).</li><li>Venken, K. J., Bellen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+technologies+for+gene+manipulation+in+Drosophila+melanogaster.">Emerging technologies for gene manipulation in Drosophila melanogaster.</a> Nat. Rev. Genet. 6, 167-178 (2005).</li><li>Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potent+and+specific+genetic+interference+by+double-stranded+RNA+in+Caenorhabditis+elegans.">Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 391, 806-811 (1998).</li><li>Kennerdell, J. R., Carthew, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+dsRNA-mediated+genetic+interference+to+demonstrate+that+frizzled+and+frizzled+2+act+in+the+wingless+pathway.">Use of dsRNA-mediated genetic interference to demonstrate that frizzled and frizzled 2 act in the wingless pathway.</a> Cell. 95, 1017-1026 (1998).</li><li>Misquitta, L., Paterson, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+disruption+of+gene+function+in+Drosophila+by+RNA+interference+(RNA-i):+a+role+for+nautilus+in+embryonic+somatic+muscle+formation.">Targeted disruption of gene function in Drosophila by RNA interference (RNA-i): a role for nautilus in embryonic somatic muscle formation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 96, 1451-1456 (1999).</li><li>Horowitz, A., Simons, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Branching+morphogenesis.">Branching morphogenesis.</a> Circ. Res. 103, 784-795 (2008).</li><li>Hogan, B. L., Kolodziej, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organogenesis:+molecular+mechanisms+of+tubulogenesis.">Organogenesis: molecular mechanisms of tubulogenesis.</a> Nat. Rev. Genet. 3, 513-523 (2002).</li><li>Ghabrial, A., Luschnig, S., Metzstein, M. M., Krasnow, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Branching+morphogenesis+of+the+Drosophila+tracheal+system.">Branching morphogenesis of the Drosophila tracheal system.</a> Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 19, 623-647 (2003).</li><li>Jiang, L., Crews, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysfusion+transcriptional+control+of+Drosophila+tracheal+migration,+adhesion,+and+fusion.">Dysfusion transcriptional control of Drosophila tracheal migration, adhesion, and fusion.</a> Mol. Cell. Biol. 26, 6547-6556 (2006).</li><li>Jiang, L., Crews, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+dysfusion+basic+helix-loop-helix+(bHLH)-PAS+gene+controls+tracheal+fusion+and+levels+of+the+trachealess+bHLH-PAS+protein.">The Drosophila dysfusion basic helix-loop-helix (bHLH)-PAS gene controls tracheal fusion and levels of the trachealess bHLH-PAS protein.</a> Mol. Cell. Biol. 23, 5625-5637 (2003).</li></ol>

طريقة حقن الرنا المزدوج الجديلة الحاضر هنا يمكن تحليل حساسة جدا وسريعة وظيفة الجينات في تطوير ذبابة الفاكهة القصبة الهوائية. ومن الممكن أن تطبق هذه الطريقة لتحليل وظيفة الجين على الأنسجة الأخرى ، وتطوير الجهاز.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Halocarbon oil 700</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>H8898</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Picospritzer III picopump</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Parker Precision Fluidics</td>
<td>051-0500-900</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micro-pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>21170M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microloaders</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>930001007</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

rnai interference by dsrna injection into drosophila embryos

الفحص الجيني هي واحدة من أقوى الوسائل المتاحة لاكتساب نظرة ثاقبة عملية بيولوجية معقدة 1. على مر السنين وأصبحت العديد من التحسينات وأدوات للتلاعب الجيني المتاحة في ذبابة الفاكهة 2. بعد وقت قصير من الاكتشاف الأولي Frie وميلو 3 التي يمكن استخدامها RNA المزدوج تقطعت بهم السبل لضربة قاضية في نشاط الجينات الفردية في ايليجانس انواع معينة ، وقد تبين تدخل الحمض النووي الريبي (رني) لتوفير منهج قوي الجينية العكسية لتحليل وظائف الجينات في تطوير الجهاز ذبابة الفاكهة 4 ، 5. وتتكون العديد من الأجهزة ، بما في ذلك الرئة والكلى والكبد والأوعية الدموية ، أنبوبي من شبكات متفرعة أن السوائل أو الغازات الحيوية النقل 6 ، 7. تحليل تشكيل ذبابة الفاكهة القصبة الهوائية يوفر نظام نموذجا ممتازا لدراسة التشكل الأجهزة الأخرى 8 أنبوبي. كشفت ذبابة الفاكهة بيركلي مشروع الجينوم مئات الجينات التي يتم التعبير عنها في النظام القصبة الهوائية. لدراسة الآلية الجزيئية والخلوية تشكيل الأنبوب ، فإن التحدي يكمن في فهم دور هذه الجينات في عملية التنمية القصبة الهوائية. هنا ، نحن وصف مفصل لطريقة حقن الرنا المزدوج الجديلة في جنين ذبابة الفاكهة في التعبير ضربة قاضية الجينات الفردية. نحن أفلحت أسفل الذاتية dysfusion التعبير الجيني (dys) الرنا المزدوج الجديلة عن طريق الحقن. Dys هو بروتين bHLH لتقييم الأداء وأعرب في خلايا الانصهار القصبة الهوائية ، وكان مطلوبا للاندماج فرع القصبة الهوائية 9 و 10. dys - رني القضاء عليها كليا التعبير dys وأسفرت عيب الانصهار القصبة الهوائية. هذه طريقة بسيطة نسبيا يوفر أداة لتحديد الجينات لrequried tissure وتطوير الجهاز في ذبابة الفاكهة.

Watch this Scientific Journal Video about RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos at JoVE.com

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

وقد ثبت RNA التدخل الفعال للغاية لتحليل الجينات في وظيفة<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; التنمية القصبة الهوائية. ويوضح بروتوكول مفصلة المستخدمة من قبل مختبر جيانج لحقن الرنا المزدوج الجديلة في الأجنة يطير إلى التعبير الجيني ضربة قاضية. هذا الأسلوب لديه القدرة على فحص الجينات اللازمة للتنمية الأنسجة والأعضاء في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt;.

رني التدخل عن طريق الحقن في الرنا المزدوج الجديلة ذبابة الفاكهة الأجنة

Genetic screening is one of the most powerful methods available for gaining insights into complex biological process 1. Over the years many improvements ...

Research

JoVE Journal

Biology

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

Injection of dsRNA into Female A. aegypti Mosquitos

حقن الرنا المزدوج الجديلة الى انثى البعوض بعوض A.

Reverse genetic approaches have proven extremely useful for determining  which genes underly resistance to vector pathogens in mosquitoes.  This video ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

التحضير للثقافات متعلق بالخلايا العصبية من أجنة ذبابة الفاكهة المرحلة Midgastrula

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E16 Rat Embryos

في الرحم وحقن داخل البطيني Electroporation الجنين الجرذ E16

In-utero in-vivo injection and electroporation of the embryonic rat neocortex provides a powerful tool for the manipulation of individual progenitors ...

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

في الرحم وحقن داخل البطيني Electroporation من أجنة الفئران E15

In-utero in-vivo injection and electroporation of the embryonic mouse neocortex provides a powerful tool for the manipulation of individual progenitors ...

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

تعيش تشريح ذبابة الفاكهة الأجنة : طرق مبسطة للفحص من قبل مجموعات المسخ تلطيخ جسم

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

داخل الجسم الحي الطرد المركزي الجنين ذبابة الفاكهة

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Bacterial Delivery of RNAi Effectors: Transkingdom RNAi

البكتيرية تسليم المستجيبات رني : Transkingdom رني

RNA interference (RNAi) represents a high effective mechanism for specific inhibition of mRNA expression. Besides its potential as a powerful laboratory ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

حقن داخل الصفاق الى اسماك الزرد الكبار

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

تستقيم تصوير ذبابة الفاكهة الأجنة

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

الخلية الأولية من الثقافات ذبابة الفاكهة الأجنة المعيدة

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...