Name: rnai interference by dsrna injection into drosophila embryos
Uploaded: 2011-04-11T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить Стивена Экипажи для dysfusion кДНК, DYS антител и W 1118 мух.

1. Эмбрион коллекции <ol><li> Настройка клетки при 25 ° С с использованием 2-4 дневных ш 1118 пластин сок flies.Grape меняются каждый час в течение суток для синхронизации сбора яиц в течение 1-2 дней до сбора </li><li> Сбор эмбрионов в 1 час при 25 ° С </li><li> Отрежьте прямоугольный кусок виноградного со...

<ol>
	<li>St Johnston, D., Nusslein-Volhard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+pattern+and+polarity+in+the+Drosophila+embryo.">The origin of pattern and polarity in the Drosophila embryo.</a> Cell. 68, 201-219 (1992).</li><li>Venken, K. J., Bellen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+technologies+for+gene+manipulation+in+Drosophila+melanogaster.">Emerging technologies for gene manipulation in Drosophila melanogaster.</a> Nat. Rev. Genet. 6, 167-178 (2005).</li><li>Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potent+and+specific+genetic+interference+by+double-stranded+RNA+in+Caenorhabditis+elegans.">Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 391, 806-811 (1998).</li><li>Kennerdell, J. R., Carthew, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+dsRNA-mediated+genetic+interference+to+demonstrate+that+frizzled+and+frizzled+2+act+in+the+wingless+pathway.">Use of dsRNA-mediated genetic interference to demonstrate that frizzled and frizzled 2 act in the wingless pathway.</a> Cell. 95, 1017-1026 (1998).</li><li>Misquitta, L., Paterson, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+disruption+of+gene+function+in+Drosophila+by+RNA+interference+(RNA-i):+a+role+for+nautilus+in+embryonic+somatic+muscle+formation.">Targeted disruption of gene function in Drosophila by RNA interference (RNA-i): a role for nautilus in embryonic somatic muscle formation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 96, 1451-1456 (1999).</li><li>Horowitz, A., Simons, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Branching+morphogenesis.">Branching morphogenesis.</a> Circ. Res. 103, 784-795 (2008).</li><li>Hogan, B. L., Kolodziej, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organogenesis:+molecular+mechanisms+of+tubulogenesis.">Organogenesis: molecular mechanisms of tubulogenesis.</a> Nat. Rev. Genet. 3, 513-523 (2002).</li><li>Ghabrial, A., Luschnig, S., Metzstein, M. M., Krasnow, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Branching+morphogenesis+of+the+Drosophila+tracheal+system.">Branching morphogenesis of the Drosophila tracheal system.</a> Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 19, 623-647 (2003).</li><li>Jiang, L., Crews, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysfusion+transcriptional+control+of+Drosophila+tracheal+migration,+adhesion,+and+fusion.">Dysfusion transcriptional control of Drosophila tracheal migration, adhesion, and fusion.</a> Mol. Cell. Biol. 26, 6547-6556 (2006).</li><li>Jiang, L., Crews, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+dysfusion+basic+helix-loop-helix+(bHLH)-PAS+gene+controls+tracheal+fusion+and+levels+of+the+trachealess+bHLH-PAS+protein.">The Drosophila dysfusion basic helix-loop-helix (bHLH)-PAS gene controls tracheal fusion and levels of the trachealess bHLH-PAS protein.</a> Mol. Cell. Biol. 23, 5625-5637 (2003).</li></ol>

Метод дсРНК инъекции присутствует здесь дает очень чувствительный и быстрый анализ функций генов дрозофилы трахеи развития. Этот метод потенциально может быть применена для анализа функции гена и для других тканей и органов развитии.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Halocarbon oil 700</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>H8898</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Picospritzer III picopump</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Parker Precision Fluidics</td>
<td>051-0500-900</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micro-pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>21170M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microloaders</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>930001007</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

rnai interference by dsrna injection into drosophila embryos

Генетический скрининг является одним из самых мощных методов, доступных для получения взглянуть на сложный биологический процесс, 1. За эти годы много улучшений и инструментов для генетических манипуляций стали доступны у дрозофилы 2. Вскоре после первоначального открытия Фри и Мелло 3 видно, что двухцепочечной РНК могут быть использованы для нокдаун активности отдельных генов в Caenorhabditis Элеганс, РНК-интерференция (RNAi) было показано, что обеспечивает мощный обратный генетический подход к анализу функций генов в развитии дрозофилы орган 4, 5. Многие органы, в том числе легких, почек, печени, сосудистой системы, состоят из трубчатых разветвленных сетей, транспорта жизненно важные жидкости или газы, 6, 7. Анализ дрозофилы трахеи образование обеспечивает отличную модель системы для изучения морфогенеза других трубчатых органов 8. Беркли дрозофилы генома проекта выявил сотни генов, которые выражаются в трахеи системы. Для изучения молекулярных и клеточных механизмов трубки образования, задача состоит в том, чтобы понять роль этих генов в развитии трахеи. Здесь мы описали подробный метод дсРНК инъекции в эмбрион дрозофилы нокдаун отдельных экспрессии генов. Мы успешно сбил эндогенных dysfusion (дисфункции) экспрессии генов с помощью инъекции дсРНК. Дисфункции является bHLH-PAS белка выражается в клетках трахеи синтеза, а это необходимо для трахеи филиала слияние 9, 10. дисфункции RNAi полностью устранить дисфункции выражение и в результате трахеи дефект синтеза. Этот сравнительно простой метод обеспечивает инструментом для выявления генов requried для tissure и развития органов у дрозофилы.

Watch this Scientific Journal Video about RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos at JoVE.com

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

РНК-интерференция была доказана очень эффективно анализировать функции генов в<em&gt; Drosophila</em&gt; Трахеи развития. Подробное протокол, используемый Цзян лаборатории, чтобы придать дсРНК в летают эмбрионов нокдауна экспрессии генов иллюстрируется. Эта технология обладает потенциалом для скрининга генов, необходимых для развития тканей и органов в<em&gt; Drosophila</em&gt;.

RNAi Вмешательство инъекций в дсРНК Drosophila Эмбрионы

Genetic screening is one of the most powerful methods available for gaining insights into complex biological process 1. Over the years many improvements ...

Research

JoVE Journal

Biology

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

Injection of dsRNA into Female A. aegypti Mosquitos

Инъекция дсРНК в женский А. Комары aegypti

Reverse genetic approaches have proven extremely useful for determining  which genes underly resistance to vector pathogens in mosquitoes.  This video ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Подготовка нейронных культур от Midgastrula этапе эмбрионы дрозофилы

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E16 Rat Embryos

In Utero инъекций Внутрижелудочковая и электропорации E16 крысиных эмбрионов

In-utero in-vivo injection and electroporation of the embryonic rat neocortex provides a powerful tool for the manipulation of individual progenitors ...

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

In Utero инъекций Внутрижелудочковая и электропорации E15 эмбрионов мыши

In-utero in-vivo injection and electroporation of the embryonic mouse neocortex provides a powerful tool for the manipulation of individual progenitors ...

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Живая Препарирование Drosophila Эмбрионы: Упрощенная методы скрининга Мутант Коллекции антител Окрашивание

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

В естественных условиях центрифугирования эмбрионов дрозофилы

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Bacterial Delivery of RNAi Effectors: Transkingdom RNAi

Бактериальные Доставка RNAi создания эффектов: Transkingdom RNAi

RNA interference (RNAi) represents a high effective mechanism for specific inhibition of mRNA expression. Besides its potential as a powerful laboratory ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

Внутрибрюшинного введения в взрослых данио рерио

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Вертикальная съемка Drosophila Эмбрионы

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Первичных клеточных культур из Drosophila Гаструла Эмбрионы

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...