Name: accurate and simple measurement of the pro-inflammatory cytokine il-1&beta; using a whole blood stimulation assay
Uploaded: 2011-03-01T18:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃŽÂ² using a Whole Blood Stimulation Assay at JoVE.com

وأيد هذا البحث من قبل برنامج بحوث جماعية للمعهد الوطني لالتهاب المفاصل وأمراض العظام والعضلات والجلد من المعاهد الوطنية للصحة.

1. جمع الدم الجامعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على الحد الأدنى من 10 مل من الدم المحيطي من الأفراد المتضررين فضلا عن العمر والجنس المتطابقة الاصحاء. وينبغي جمع الدم الوريدي في هيبارين الصوديوم vacutainer أنابيب جمع الدم ، بدلا من استخدام مضادا?...

<ol>
	<li>Martinon, F., Mayor, A., Tschopp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammasomes:+guardians+of+the+body.">The inflammasomes: guardians of the body.</a> Annu Rev Immunol. 27, 229-265 (2009).</li><li>Thurm, C. W., Halsey, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cytokine+production+using+whole+blood.">Measurement of cytokine production using whole blood.</a> Curr Protoc Immunol. 66, 7-18 .</li><li>Mariathasan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryopyrin+activates+the+inflammasome+in+response+to+toxins+and+ATP.">Cryopyrin activates the inflammasome in response to toxins and ATP.</a> Nature. 440, 228-232 (2006).</li><li>Gabay, C., Lamacchia, C., Palmer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-1+pathways+in+inflammation+and+human+diseases.">IL-1 pathways in inflammation and human diseases.</a> Nat Rev Rheumatol. 4, 232-241 (2010).</li><li>Franchi, L., Elgenbrod, T., Mu&#241;oz-Planillo, R., Nu&#241;ez, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammasome:+a+caspase-1-activation+platform+that+regulates+immune+responses+and+disease+pathogenesis.">The inflammasome: a caspase-1-activation platform that regulates immune responses and disease pathogenesis.</a> Nat Immunol. 3, 241-247 (2009).</li><li>Sims, J. E., Smith, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+IL-1+family:+regulators+of+immunity.">The IL-1 family: regulators of immunity.</a> Nat Rev Immunol. 2, 89-102 (2010).</li><li>Haug, R., Jo&#248;, G. B., Westvik, A. B., Kierulf, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+production+and+pattern+recognition+receptor+(PRR)+expression+in+whole+blood+stimulated+with+pathogen-associated+molecular+patterns+(PAMPs.">Chemokine production and pattern recognition receptor (PRR) expression in whole blood stimulated with pathogen-associated molecular patterns (PAMPs.</a> Cytokine. 32, 304-315 (2005).</li><li>Netea, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+requirement+for+the+activation+of+the+inflammasome+for+processing+and+release+of+IL-1bin+monocytes+and+macrophages.">Differential requirement for the activation of the inflammasome for processing and release of IL-1bin monocytes and macrophages.</a> Blood. 113, 2324-2335 (2009).</li><li>Latz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammasomes:+mechanisms+of+activation+and+function.">The inflammasomes: mechanisms of activation and function.</a> Curr Opin Immnol. 22, 28-33 (2010).</li><li>Masters, S. L., Simon, A., Aksentijevich, I., Kastner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Horror+autoinflammaticus:+the+molecular+pathophysiology+of+autoinflammtory+disease.">Horror autoinflammaticus: the molecular pathophysiology of autoinflammtory disease.</a> Annu Rev Immunol. 27, 621-668 (2009).</li></ol>

وفحص الدم الكامل ووصف هو أسلوب بسيط هو أن أوثق يحاكي الظروف الفسيولوجية بالمقارنة مع غيرها من التقنيات التي تتطلب عزل الخلايا واسعة تجهيز العينات والتلاعب. هذه الطريقة تستخدم مع الرؤية Cellometer AO لحساب خلايا الدم البيضاء في الدم كله ، وبالتالي ، يوفر وسيلة لتوحيد عينات...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sodium Heparin Blood Collection Tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>366480</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640 Media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>GIBCO</td>
<td>21870-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Acridine Orange</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A3568</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cellometer Vision</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nexcelom Bioscience</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Contact company for instrument information</td>
</tr>
<tr>
<td>Cellometer Cell Counting Chambers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nexcelom Bioscience</td>
<td>CHT4-SD100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>24-well Tissue Culture Plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning Costar</td>
<td>3524</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ultra Pure E. coli K12 LPS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>InvivoGen</td>
<td>tlrl-eklps</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adenosine 5&#180;-tripohasphate disodium salt hydrate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>A26209</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bio-plex 200 system</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Contact company for instrument information</td>
</tr>
<tr>
<td>Bio-Plex Pro human cytokine x-plex assay</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>x-plex assays are custom made according to specified cytokines of interest</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

accurate and simple measurement of the pro-inflammatory cytokine il-1&beta; using a whole blood stimulation assay

عمليات الالتهابات الناجمة عن إفراز وسطاء للذوبان من قبل الخلايا المناعية ، تؤدي إلى مظاهر مختلفة في الجلد والمفاصل والأنسجة الأخرى ، وكذلك تغيير التوازن خلوى. نظام المناعة الفطري يلعب دورا حاسما في التعرف على مسببات الأمراض وغيرها من المحفزات الذاتية خطر. واحدة من كبرى السيتوكينات الصادرة عن الخلايا المناعية الفطرية هو إينترليوكين (IL) -1. ولذلك ، فإننا الاستفادة من التحفيز الدم الكامل فحص لقياس إفراز السيتوكينات الالتهابية وتحديدا الموالية للالتهابات خلوى 1β IL - 1 ، 2 ، 3. المرضى الذين يعانون من الخلل الجيني في النظام المناعي الفطرية تسبب متلازمات autoinflammatory تظهر الافراج مبالغ فيها ناضجة IL - 1β على التحفيز مع LPS وحدها. من أجل تقييم المكون الفطري المناعي للمرضى الذين يعانون من التهابات المرتبطة الأمراض ، فإننا نستخدم المناعية محددة للكشف عن الاستجابات المناعية الخلوية إلى الممرض المرتبطة بأنماط الجزيئي (PAMPs) ، مثل الذيفان الداخلي الجرثومي سالبة الجرام ، lipopolysaccharide (LPS ). يتم التعرف على هذه المستقبلات التي PAMPs الاعتراف الممرض (PRRs) ، والتي توجد على خلايا نظام المناعة الفطرية 4 ، 5 ، 6 ، 7. إشارة الأولية ، LPS ، بالاشتراك مع اشارة الثانوية ، ATP ، أمر ضروري لتفعيل inflammasome ، وهو مجمع multiprotein أن العمليات الموالية للIL - 1β إلى شكله ، وناضجة النشطة بيولوجيا 4 ، 5 ، 6 ، 8 ، 9 ، 10. وفحص الدم الكامل يتطلب الحد الأدنى من التلاعب نموذج لتقييم الانتاج خلوى بالمقارنة مع الطرق الأخرى التي تتطلب عمالة كثيفة ، وعزل السكان استزراع خلايا محددة. هذا الأسلوب يختلف عن غيره من المقايسات كله تحفيز الدم ، بدلا من تمييع العينات مع نسبة من وسائل الإعلام RPMI ، ونحن تنفيذ عدد خلايا الدم البيضاء من الدم مباشرة ، وبالتالي تضعف كله ، وحفز عددا معروفة من خلايا الدم البيضاء في الثقافة 2. نتائج هذا الفحص الدم كله يبرهن على وجود أسلوب خاص رواية مفيد في توضيح الأفواج المريض مع تقديم pathophysiologies autoinflammatory.

Watch this Scientific Journal Video about Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃŽÂ² using a Whole Blood Stimulation Assay at JoVE.com

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² using a Whole Blood Stimulation Assay

نحن تصف المناعية بسيطة لقياس إنتاج السيتوكينات الموالية للالتهابات ، مثل IL - 1 إنتاج بيتا ، في المرضى الذين يعانون من الظواهر autoinflammatory. من خلال تفعيل خلايا الدم في الثقافات كلها مع الممرض المرتبطة بأنماط الجزيئية ، وتحديدا مع lipopolysaccharide ، يمكن إفراز خلوى تقييم ملائم في supernatants الدم الكامل.

دقيقة وبسيطة قياس الموالية للالتهابات سايتوكاين 1β ايل باستخدام تحفيز الدم الجامعة الفحص

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Accurate and Simple Evaluation of Vascular Anastomoses in Monochorionic Placenta using Colored Dye

دقيقة وبسيطة تقييم Anastomoses الأوعية الدموية في المشيمة المشيماء باستخدام صبغ الملونة

The presence of placental vascular anastomoses is a conditio sine qua non for the development of twin-to-twin transfusion syndrome (TTTS) and twin anemia ...

Utilizing Transcranial Magnetic Stimulation to Study the Human Neuromuscular System

استخدام التنشيط المغناطيسي عبر الجمجمة لدراسة النظام العصبي العضلي الإنسان

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been in use for more than 20 years 1, and has grown exponentially in popularity over the past decade.  While ...

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

فوق الجافية قياس الضغط داخل الجمجمة في الفئران باستخدام محول ضغط الألياف الضوئية

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood

السريع في نقاط الفحص من كفاءة الرعاية تخثر الدم الكامل في Enoxaparin

There is the need for a clinical assay to determine the extent to which a patient's blood is effectively anticoagulated by the ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

excitotoxic المواد تحفيز الدماغ باعتبارها Microslices<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج من السكتة الدماغية

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Fast and Accurate Exhaled Breath Ammonia Measurement

بسرعة ودقة مزفور التنفس قياس الأمونيا

This exhaled breath ammonia method uses a fast and highly sensitive spectroscopic method known as quartz enhanced photoacoustic spectroscopy (QEPAS) that ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

في الوقت الحقيقي السمسة فحوصات في الدم الكامل بالبشر

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

A Simple Device to Rapidly Prepare Whole Mounts of the Mouse Intestine

جهاز بسيط للتحضير السريع الجبال الجامعة للماوس الأمعاء

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe ...

Using Saccadometry with Deep Brain Stimulation to Study Normal and Pathological Brain Function

باستخدام Saccadometry مع ديب تحفيز الدماغ لدراسة العادية والمرضية وظيفة الدماغ

The oculomotor system involves a large number of brain areas including parts of the basal ganglia, and various neurodegenerative diseases including ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

على المدى الطويل قياس ضغط الدم في الانتقال بحرية الفئران عن طريق القياس

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...