Name: accurate and simple measurement of the pro-inflammatory cytokine il-1&beta; using a whole blood stimulation assay
Uploaded: 2011-03-01T18:45:00
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इस शोध गठिया और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के के Musculoskeletal और त्वचा रोग के राष्ट्रीय संस्थान के अंदर का रिसर्च प्रोग्राम द्वारा समर्थित किया गया था.

1. पूरे रक्त का संग्रह <ol><li> प्रभावित व्यक्तियों के रूप में अच्छी तरह के रूप में आयु और लिंग के मिलान स्वस्थ नियंत्रण से परिधीय रक्त की 10 एमएल की एक न्यूनतम प्राप्त करते हैं. शिरापरक रक्त में सोडियम हेपरिन...

<ol>
	<li>Martinon, F., Mayor, A., Tschopp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammasomes:+guardians+of+the+body.">The inflammasomes: guardians of the body.</a> Annu Rev Immunol. 27, 229-265 (2009).</li><li>Thurm, C. W., Halsey, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cytokine+production+using+whole+blood.">Measurement of cytokine production using whole blood.</a> Curr Protoc Immunol. 66, 7-18 .</li><li>Mariathasan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryopyrin+activates+the+inflammasome+in+response+to+toxins+and+ATP.">Cryopyrin activates the inflammasome in response to toxins and ATP.</a> Nature. 440, 228-232 (2006).</li><li>Gabay, C., Lamacchia, C., Palmer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-1+pathways+in+inflammation+and+human+diseases.">IL-1 pathways in inflammation and human diseases.</a> Nat Rev Rheumatol. 4, 232-241 (2010).</li><li>Franchi, L., Elgenbrod, T., Mu&#241;oz-Planillo, R., Nu&#241;ez, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammasome:+a+caspase-1-activation+platform+that+regulates+immune+responses+and+disease+pathogenesis.">The inflammasome: a caspase-1-activation platform that regulates immune responses and disease pathogenesis.</a> Nat Immunol. 3, 241-247 (2009).</li><li>Sims, J. E., Smith, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+IL-1+family:+regulators+of+immunity.">The IL-1 family: regulators of immunity.</a> Nat Rev Immunol. 2, 89-102 (2010).</li><li>Haug, R., Jo&#248;, G. B., Westvik, A. B., Kierulf, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+production+and+pattern+recognition+receptor+(PRR)+expression+in+whole+blood+stimulated+with+pathogen-associated+molecular+patterns+(PAMPs.">Chemokine production and pattern recognition receptor (PRR) expression in whole blood stimulated with pathogen-associated molecular patterns (PAMPs.</a> Cytokine. 32, 304-315 (2005).</li><li>Netea, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+requirement+for+the+activation+of+the+inflammasome+for+processing+and+release+of+IL-1bin+monocytes+and+macrophages.">Differential requirement for the activation of the inflammasome for processing and release of IL-1bin monocytes and macrophages.</a> Blood. 113, 2324-2335 (2009).</li><li>Latz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammasomes:+mechanisms+of+activation+and+function.">The inflammasomes: mechanisms of activation and function.</a> Curr Opin Immnol. 22, 28-33 (2010).</li><li>Masters, S. L., Simon, A., Aksentijevich, I., Kastner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Horror+autoinflammaticus:+the+molecular+pathophysiology+of+autoinflammtory+disease.">Horror autoinflammaticus: the molecular pathophysiology of autoinflammtory disease.</a> Annu Rev Immunol. 27, 621-668 (2009).</li></ol>

पूरे रक्त परख वर्णित एक सरल तरीका है कि और अधिक बारीकी से जब अन्य तकनीक है कि सेल अलगाव और व्यापक नमूना प्रसंस्करण और हेरफेर की आवश्यकता होगी की तुलना में शारीरिक स्थितियों mimics है. इस विधि ए ओ के साथ Cellometer व...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sodium Heparin Blood Collection Tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>366480</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640 Media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>GIBCO</td>
<td>21870-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Acridine Orange</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A3568</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cellometer Vision</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nexcelom Bioscience</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Contact company for instrument information</td>
</tr>
<tr>
<td>Cellometer Cell Counting Chambers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nexcelom Bioscience</td>
<td>CHT4-SD100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>24-well Tissue Culture Plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning Costar</td>
<td>3524</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ultra Pure E. coli K12 LPS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>InvivoGen</td>
<td>tlrl-eklps</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adenosine 5&#180;-tripohasphate disodium salt hydrate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>A26209</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bio-plex 200 system</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Contact company for instrument information</td>
</tr>
<tr>
<td>Bio-Plex Pro human cytokine x-plex assay</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>x-plex assays are custom made according to specified cytokines of interest</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

accurate and simple measurement of the pro-inflammatory cytokine il-1&beta; using a whole blood stimulation assay

सूजन प्रतिरक्षा कोशिकाओं द्वारा घुलनशील मध्यस्थों के स्राव से उत्पन्न प्रक्रियाओं, त्वचा, जोड़ों और अन्य ऊतकों के रूप में के रूप में अच्छी तरह से बदल साइटोकाइन homeostasis में विभिन्न अभिव्यक्तियों के लिए नेतृत्व. सहज प्रतिरक्षा प्रणाली रोगज़नक़ों और अन्य अंतर्जात खतरे उत्तेजनाओं को पहचानने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. प्रमुख सहज प्रतिरक्षा कोशिकाओं द्वारा जारी साइटोकिन्स के इंटरल्युकिन -1 (आईएल) है. इसलिए, हम एक पूरे रक्त उत्तेजना परख का उपयोग क्रम में भड़काऊ साइटोकिन्स के स्राव को मापने के लिए और विशेष रूप से समर्थक भड़काऊ cytokine 1 आईएल 1β, 2, 3. सहज प्रतिरक्षा प्रणाली के autoinflammatory सिंड्रोम के कारण आनुवंशिक रोग के साथ मरीजों को परिपक्व LPS के साथ अकेले उत्तेजना पर आईएल 1β के एक अतिरंजित रिलीज दिखा. आदेश में जो भड़काऊ जुड़े विकृतियों के साथ उपस्थित रोगियों की सहज प्रतिरक्षा घटक का मूल्यांकन करने के लिए, हम एक विशिष्ट रोगज़नक़ जुड़े आणविक (PAMPs) ग्राम नकारात्मक बैक्टीरियल endotoxin जैसे पैटर्न, के लिए सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का पता लगाने immunoassay lipopolysaccharide (LPS का उपयोग ). ये PAMPs रोगज़नक़ मान्यता (PRRs) रिसेप्टर्स, जो सहज प्रतिरक्षा प्रणाली 4, 5, 6, 7 की कोशिकाओं पर पाया जाता है के द्वारा मान्यता प्राप्त हैं. एक प्राथमिक संकेत है, एक माध्यमिक संकेत, एटीपी, inflammasome के सक्रियण एक multiprotein जटिल है कि अपने परिपक्व, bioactive 4 फार्म, 5, 6, 8, 9 समर्थक आईएल 1β प्रक्रियाओं के लिए आवश्यक है के साथ संयोजन के रूप में LPS, 10. पूरे रक्त परख न्यूनतम नमूना हेरफेर की आवश्यकता है cytokine उत्पादन का आकलन करने के लिए जब अन्य विधियों है कि श्रम गहन और विशिष्ट सेल आबादियों के अलगाव संवर्धन की आवश्यकता की तुलना में. इस विधि अन्य पूरे रक्त उत्तेजना assays से अलग है, RPMI मीडिया का एक अनुपात के साथ नमूने गिराए बजाय, हम एक सफेद रक्त कोशिका प्रदर्शन पतला पूरे रक्त से सीधे गिनती और इसलिए, 2 संस्कृति में एक सफेद रक्त कोशिकाओं के ज्ञात संख्या को प्रोत्साहित. यह विशेष रूप से पूरे रक्त परख के परिणाम एक उपन्यास autoinflammatory pathophysiologies के साथ पेश रोगी साथियों elucidating में उपयोगी तकनीक का प्रदर्शन.

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Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² using a Whole Blood Stimulation Assay

हम समर्थक भड़काऊ साइटोकिन्स के उत्पादन, आईएल -1 बीटा उत्पादन जैसे autoinflammatory phenotypes के साथ पेश रोगियों में, को मापने के लिए एक सरल immunoassay का वर्णन. रोगज़नक़ जुड़े lipopolysaccharide के साथ विशेष रूप से आणविक पैटर्न के साथ पूरे रक्त संस्कृतियों में कोशिकाओं को सक्रिय करके, cytokine स्राव सुविधा पूरे रक्त supernatants में मूल्यांकन किया जा सकता है.

समर्थक भड़काऊ cytokine आईएल - 1β के सटीक और सरल मापन एक पूरे रक्त उत्तेजना परख का उपयोग

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Accurate and Simple Evaluation of Vascular Anastomoses in Monochorionic Placenta using Colored Dye

Monochorionic अपरा में संवहनी Anastomoses रंग डाई का उपयोग का सटीक और सरल मूल्यांकन

The presence of placental vascular anastomoses is a conditio sine qua non for the development of twin-to-twin transfusion syndrome (TTTS) and twin anemia ...

Utilizing Transcranial Magnetic Stimulation to Study the Human Neuromuscular System

Transcranial चुंबकीय उत्तेजना का उपयोग मानव Neuromuscular प्रणाली का अध्ययन

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been in use for more than 20 years 1, and has grown exponentially in popularity over the past decade.  While ...

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

एपीड्यूरल फाइबर ऑप्टिक दबाव ट्रांन्सड्यूसर का प्रयोग चूहे में intracranial दबाव मापन

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood

पूरे रक्त में तेजी से प्वाइंट की देखभाल enoxaparin anticoagulant प्रभावकारिता की परख

There is the need for a clinical assay to determine the extent to which a patient's blood is effectively anticoagulated by the ...

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एक के रूप में मस्तिष्क Microslices की excitotoxic उत्तेजना<em&gt; इन विट्रो</em&gt; स्ट्रोक के मॉडल

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Fast and Accurate Exhaled Breath Ammonia Measurement

तेजी से और सही सांस exhaled अमोनिया मापन

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चूहे आज़ादी से चलती टेलीमेटरी का उपयोग में लंबे समय तक रक्तचाप माप

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