Name: non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry
Uploaded: 2011-05-02T17:00:00
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1. 과정을하기 전에 준비를 다음과 같은 항목을 수집 <ol><li> 절차를 수행하는 동안 마우스를 묶을 수있는 목조 플랫폼 구축을위한) 그림 1A에있는 이미지 참조) 및 1B하시기 바랍니다. </li><li> HBSS + 1.25mg/ml Collagenase TypeIV 또는 2.5 MG / ML Collagenase D - 림프절에 대한 소화 믹스 </li><li> 폐에 대한 소화 믹스 - HBSS가 + 1 MG / ML Collagenase </li><li> LDLNs을 시각화하기 위해 intraperitoneal 주사 PBS에서 라텍스 구슬 (1?...

<ol>
	<li>Grayson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controls+for+lung+dendritic+cell+maturation+and+migration+during+respiratory+viral+infection.">Controls for lung dendritic cell maturation and migration during respiratory viral infection.</a> J Immunol. 179, 1438-1438 (2007).</li><li>GeurtsvanKessel, C. H., Lambrecht, B. 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V. a. n. d. e. n., Derore, A., Simoens, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+nomenclature+of+murine+lymph+nodes:+Descriptive+study+and+nomenclatory+standardization+in+BALB/cAnNCrl+mice.">Anatomy and nomenclature of murine lymph nodes: Descriptive study and nomenclatory standardization in BALB/cAnNCrl mice.</a> J Immunol Methods. 312, 12-12 (2006).</li></ol>

우리는 폐에서 LDLNs에 바실러스 anthracis 포자의 인신 매매를 공부하기 위해이 프로토콜을 이용합니다. 유사한 어플 리케이션의 경우, 폐에 전달 입자의 개수는 신중하게 주입 자료가 유동세포계측법하여 LDLNs에서 검색된 수 있도록 선택하여야한다. 우리는 또한 성공적으로 세포 찬란 표시된 항체를 사용하여 특정 폐 세포 집단의 라벨링의 입양 전송을 위해이 방법을 사용했습니다. 또한,이 ...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> 70μm 셀 stariner </td><td> BD </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 아닐린 블루 </td><td> 어부 </td><td> A967 - 25 </td><td></td></tr><tr><td> 동물 먹이 바늘 </td><td> 포퍼 앤드 손즈 병원 </td><td> 7920 </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase </td><td> 시그마 </td><td> C2139 </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase TypeIV </td><td> 워싱턴 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Collagenase D </td><td> 로체 </td><td> 11088974103 </td><td></td></tr><tr><td> DPBS </td><td> Invitrogen </td><td> 14,190 </td><td></td></tr><tr><td> Fluoresbrite YG Microspheres (0.5μm) </td><td> Polysciences, Inc의 </td><td> 17,152 </td><td></td></tr><tr><td> 염화칼슘과 마그네슘 염화물없이 HBSS </td><td> Invitrogen </td><td> 14,170 </td><td></td></tr><tr><td> 케타민을 HCL (100mg/ml) </td><td> Hospira 부동산 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 후두경 블레이드 </td><td> PennCentury, Inc의 </td><td> 모델 LS - 1 </td><td> 을 참조하십시오 <a href="http://www.penncentury.com">www.penncentury.com</a> </td></tr><tr><td> 경량 광섬유 후두경 </td><td> WelchAllyn </td><td> 80,814 </td><td></td></tr><tr><td> 레드 형광 비즈 (0.5μm) </td><td> Invitrogen </td><td> F8812 </td><td> IP 주사 </td></tr><tr><td> Xylazine (100mg/ml) </td><td> 로이드 레버 토리스 </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry

이러한 폐포 macrophages 및 폐 돌기 세포 (LDCs)로 Phagocytic 세포가 지속적으로 폐에서 폐포 공간에서 항원을 샘플. LDCs는 특히 폐 배수 림프절 (LDLNs)들이 immunogens 1,2의 다양한 적절한 면역 반응을 시작 T 세포 흡입 항원을 제시 어디에.로 마이 그 레이션하는 것으로 알려져 있습니다 생쥐의 폐, 공기 항원 사이의 상호 작용 모델하려면, 항원은 intratracheally 5 에어로졸 6 등 intranasally 1,3,4 관리하실 수 있습니다. 각 경로로 배달 고유 기술 기술과 실험을 설계하기 전에 고려해야 할 제한 사항을 포함한다. 예를 들어, 비강 및 aerosolized 노출은 폐와 상부 호흡기의 넓이 모두에 항원을 제공합니다. 따라서 항원 가능성이 결과의 해석을 복잡, 비강 관련 림프 조직 (NALT) 7에 액세스할 수 있습니다. 또한, 삼키는, 재채기와 마우스의 호흡 속도는 전달 복용에 불일치가 발생할 수 있습니다. 상부 호흡 트랙트의 참여가 어떤 연구를 위해 선호하는 수 있지만, 그것은 특히 폐에서 시작된 이벤트에 초점을 실험을 복잡하게하실 수 있습니다. 그것은 폐에에 직접 테스트 자료를 제공하고 NALT를 무시으로이 설정에서, intratracheal (IT) 경로가 바람직합니다. 많은 그것 주입 프로토콜은 구강이나 폐에에 액세스할 수있는 기관의 수술 노출을 통해 기관 중 시각 삽관법를 포함. 여기에, 우리는 기지에 대한 간단한, 일관성, 비 수술 방법을 설명합니다. 기관의 개통은 후두경를 사용하여 시각이며 구부러진 gavage 바늘은 다음 innoculum를 제공하는 기관에 직접 삽입됩니다. 우리는 또한 수확 및 유동세포계측법에 의해 항원 인신 매매의 분석 LDLNs 및 폐의 처리를위한 절차를 설명합니다.

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Non-surgical Intratracheal Instillation of Mice with Analysis of Lungs and Lung Draining Lymph Nodes by Flow Cytometry

우리는기도를 통해 anesthetized 생쥐의 폐에 시험 물질의 비 수술 전달을 보여줍니다. 이 방법은 세균과 바이러스 병원균, 크린 시토킨, 항체, 구슬, 화학, 또는 염료로 폐 노출 수 있습니다. 우리는 더 이상 수확 및 유동세포계측법에 대한 폐, 폐 배수 림프절 (LDLNs) 처리 설명합니다.

유동세포계측법에 의해 폐, 폐 배수 림프절의 분석과 마우스의 비 수술 Intratracheal 떨어뜨림

Phagocytic cells such as alveolar macrophages and lung dendritic cells (LDCs) continuously sample antigens from the alveolar spaces in the 
lungs. LDCs, ...

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We present methods to study the effect of phenol soluble modulins (PSMs)  and other toxins produced and secreted by Staphylococcus  aureus on neutrophils. ...

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Detection of Fluorescent Nanoparticle Interactions with Primary Immune Cell Subpopulations by Flow Cytometry

유동 세포 계측법에 의해 주요 면역 세포 모집단과 형광 나노 입자의 상호 작용의 검출

Engineered nanoparticles are endowed with very promising properties for therapeutic and diagnostic purposes. This work describes a fast and reliable ...

A CFSE-based Assay to Study the Migration of Murine Skin Dendritic Cells into Draining Lymph Nodes During Infection with Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Gu&#233;rin

와 감염시 배수 림프절에 쥐 피부 수지상 세포의 마이그레이션을 연구하는 CFSE 기반 분석<em&gt; 소 결핵균</em&gt; Bacille 칼 메트 - GUERIN

Dendritic cells (DCs) are important for initiating immune responses, in part through their ability to acquire and shuttle antigen to the draining lymph ...

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세포 내 염색 및 유동 세포 계측법은 고혈압의 모델에 쥐 대동맥, 신장 및 림프절에서 림프구 하위 집합을 식별하는

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