Name: electrolytic inferior vena cava model (eim) of venous thrombosis
Uploaded: 2011-07-12T13:00:00
Duration: 6 min 3 s
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支持由美国国立卫生研究院1P01HL089407 - 01A1（劳伦斯，PI），动物一个核心，美国国立卫生研究院1 K01 HL080962 - 01A2（迈尔斯，PI）。

1。鼠标麻醉程序<ol><li>动物从它们的笼子中删除，并放置在手术前麻醉诱导气体感应室在2％异氟醚和100％的氧气流量在每分钟0.5升（蒸发器控制）。 </li><li>小鼠镇静麻醉诱导室，室拆除，剃腹腹部与电动快船，或室内保持一毛脱毛如果使用（1分）。 </li><li>虽然仍在镇静，他们权衡，眼睛是无菌眼药膏，然后放置在一个温暖的循环水加热装置，在背recumbancy全身麻醉下用鼻子使用异氟醚和氧气锥，润滑。此时氧率降低到每分钟0.2升。 </li><li>腹部洗必泰溶液喷洒（洗必泰双乙酸钠是迅速bacterialcidal和持久的），并用无菌纱布擦拭三次，直到手术部位是干净的。 </li></ol> 2。鼠标显微手术和恢复过程<ol><li>一个腹正中切口（2厘米），是用虹膜剪刀通过皮肤和腹壁，露出腹部。一个无菌生理盐水纱布浸泡的2x2是用来反映动物的左侧肠。鼠标限位到位，使下腔静脉（IVC）的可视化。 </li><li>在这一点上，异氟醚减少到2％的维修水平，氧率保持在每分钟0.2升，其余的手术。 </li><li>促进使用无菌敷贴拭子和额外的细腻光圈半弧形组织钳钝性分离。在处理鼠标组织，因为他们是极其脆弱的，必须小心。 </li><li>所有的下腔静脉侧分支，从肾静脉至髂分叉，与7-0非活性普理灵缝线结扎。回到分支机构保持了专利。 </li><li>在电解腔静脉模型（EIM），一个25G的不锈钢针连接到一个镀银铜线（KY - 30 - 1 - GRN，Electrospec，多佛尔港，新泽西州），插入暴露尾鳍下腔静脉（图1）对前壁（阳极）和定位。 </li><li>另一条导线植入皮下完成电路（阴极）。 </li><li>电流超过15分钟的250μAmps应用草苏昆方波刺激和恒定电流的单位（草技术，一个天文MED公司，西华威，扶轮社）。目前形成电解侵蚀下腔静脉内皮细胞表面，促进凝血的环境和随后的血栓形成的有毒产品的直接结果。 </li><li> 15分钟后，针被删除，棉签轻轻接触面积，以防止出血举行</li><li>在深水动物，放入下腔静脉针，然后取出，没有当前的应用程序。 </li><li>开腹网站是封闭在两层的方式。我们的实验室使用5-0薇乔，合成缝合线，在连续模式，关闭腹壁。胶粘剂皮胶是用来关闭皮肤。有没有外部缝线拆除。 </li><li>小鼠，然后在一个单独的鼠笼恢复，密切观察手术后的下一个加热灯（最小距离为24英寸，远离笼子）（45分钟到2小时），然后返回到原来的公屋单位。可以使用止痛药和消炎药，如果它不干预研究的目的。科学理由隐瞒止痛药，兽医学，和ICUCA审批是必要的。我们的实验室已经发现丁丙诺啡,0.05 - 0 .1毫克/公斤SQ是一个极好的前和手术后的小鼠的镇痛。此外，利多卡因在4mg/kg（1％溶​​液0.4毫升/公斤），可在切口部位注入的全身性镇痛药时，可能会混淆实验结果。 </li><li>通常，我们没有经历过手术后由于深静脉血栓形成的不良影响。然而，不良的手术后效果可以包括自发死亡麻醉，手术失血，因神经损伤和局部麻痹。正在缓慢复苏的动物，可以喂海狸鼠凝胶或潮湿的议员笼的地板上，以方便动物的恢复。动物切断手术后的并发症，应人道安乐死。 </li><li>在指定的时间点，安乐死是人道待遇，在按照安乐死美国兽医医疗协会的准则啮齿类动物中提出的建议。 </li></ol> 3。代表性的成果 EIM解决方案是一个模型，在连续血流存在形成血栓。下面的数字显示在这种新颖的模式调查的参数。 <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig1.jpg" alt="图1" /> 图1 definesthe解剖区域在一个25G的不锈钢插入针，连接到一个镀银铜线（KY - 30 - 1 - GRN，Electrospec，多佛尔港，新泽西州）。请注意，一个淋巴结是几乎目前，作为一个具有里程碑意义，有助于找到尾鳍下腔静脉。 <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig2.jpg" alt="图2" /> 图2：在不同菌株的EIM后第2天的血栓重量。正如预期的那样，血栓重量降低PAI - 1的KO小鼠和高凝三角洲CT的小鼠（^ CT）的较大。 <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig3.jpg" alt="图3" /> 图3：可溶性P -选择，深静脉血栓形成的制造商，测量在不同的菌株。被发现在PAI - 1的KO小鼠的最低水平，而最高级别的高凝三角洲CT小鼠。 <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig4.jpg" alt="图4" /> 图4血栓重量和可溶性P -选择在不同菌株之间的相关。值得注意的是，在本集团产生较短的血栓的大小，可溶性P -选择素检测是最低的（PAI - 1的KO小鼠）。在本集团产生最大的血栓大小，可溶性P -选择素检测是最高的（高凝三角洲CT）。 <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig5.jpg" alt="图5" /> 图5：为了证明存在的血流量，超声小鼠进行的EIM执行。图5显示了在鼠标后第2天的EIM进行超声。然后该标本的收获。注意血栓的形状表明，在流动存在血栓形成

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	<li>Diaz, J. A., Hawley, A. E., Alvarado, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model.">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104, 366-375 (2010).</li><li>Eitzman, D. T., Westrick, R. J., Nabel, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasminogen+activator+inhibitor-1+and+vitronectin+promote+vascular+thrombosis+in+mice.">Plasminogen activator inhibitor-1 and vitronectin promote vascular thrombosis in mice.</a> Blood. 95, 577-580 (2000).</li><li>Myers, D., Farris, D., Hawley, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selectins+influence+thrombosis+in+a+mouse+model+of+experimental+deep+venous+thrombosis.">Selectins influence thrombosis in a mouse model of experimental deep venous thrombosis.</a> J Surg Res. 108, 212-221 (2002).</li><li>Myers, D. D., Hawley, A. E., Farris, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P-selectin+and+leukocyte+microparticles+are+associated+with+venous+thrombogenesis.">P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis.</a> J Vasc Surg. 38, 1075-1089 (2003).</li><li>Pierangeli, S. S., Barker, J. H., Stikovac, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+human+IgG+antiphospholipid+antibodies+on+an+in+vivo+thrombosis+model+in+mice.">Effect of human IgG antiphospholipid antibodies on an in vivo thrombosis model in mice.</a> Thromb Haemost. 71, 670-674 (1994).</li><li>Pierangeli, S. S., Liu, X. W., Barker, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+thrombosis+in+a+mouse+model+by+IgG,+IgM+and+IgA+immunoglobulins+from+patients+with+the+antiphospholipid+syndrome.">Induction of thrombosis in a mouse model by IgG, IgM and IgA immunoglobulins from patients with the antiphospholipid syndrome.</a> Thromb Haemost. 74, 1361-1367 (1995).</li></ol>

鼠标是一个优良的研究工具，在体内实验。因此，发展紧密地模仿疾病或病理状态下的小鼠模型，是必要的。几个静脉血栓形成的小鼠模型已被用来研究深静脉血栓形成，包括：光化学（2），瘀（3-4）和机械创伤（5-6）。然而，这些模型都使用内部的内皮细胞的刺激，在连续血流存在产​​生的血栓。 EIM解决方案，下腔静脉内使用电解刺激，促进血液流动的存在的内皮激活（1）静脉血栓形成。这在技术上是简单，容易复制和成活率高（99％）。尽管事实上，用于创建电解电流，不会产生热量（1）。 EIM的模型准确模拟临床深静脉血栓形成，因此，作为一个有价值的工具，用于研究血栓的形成和解决的内在机制服务。 EIM的模型也可用于防止血栓形成疾病的新治疗方法的进步。

<table border="1"><tbody><tr><th>试剂名称</th><th>公司</th><th>目录编号</th><th>评论（可选） </th></tr><tr><td> DMEM培养液</td><td> Invitrogen公司</td><td> ABCD1234 </td><td></td></tr></tbody></table>

electrolytic inferior vena cava model (eim) of venous thrombosis

为了研究血栓形成，血栓形成的决议，并测试潜在的治疗化合物（1）动物模型为下肢深静脉血栓（DVT）的研究中的一个至关重要的作用。目前正在开发利用新的化合物在治疗和预防深静脉血栓形成。潜在的治疗拮抗剂化合物运送到受影响的血栓静脉一直是个问题。在治疗应用中，一个模型，采用局部瘀，始终生成内主要静脉血栓已于日前成立。电解下腔静脉模型（EIM）是允许在连续血流存在血栓形成的深静脉血栓形成的小鼠模型。这个模型允许治疗药物，在接触一个时尚动感的血栓，而且是比其他车型（1）深静脉血栓形成更为敏感。此外，这种血栓模型准确模拟血栓形成的临床情况，是理想的研究静脉内皮细胞激活，白细胞迁移，静脉血栓形成，治疗应用测试（1）。 EIM的模型是技术简单，容易复制，创建一致的血栓大小和允许大样本（即血栓和静脉壁），这是分析的目的所必需的。

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Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

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