Name: electrolytic inferior vena cava model (eim) of venous thrombosis
Uploaded: 2011-07-12T13:00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis at JoVE.com

Ondersteund door NIH 1P01HL089407-01A1 (Lawrence, PI), Animal Core A, NIH een K01 HL080962-01A2 (Myers, PI).

1. Muis Anesthesie Procedures <ol><li> Dieren uit hun kooi en geplaatst in een verdovingsmiddel pre-operatieve inductie kamer voor gasinductie op 2% isofluraan en 100% zuurstof bij een debiet van 0,5 liter per minuut (vaporizer gecontroleerd). </li><li> Muizen worden verdoofd in de verdoving inductie kamer, verwijderd van kamer en het ventrale buik wordt geschoren met de tondeuse, of onderhouden in de kamer als een haar ontharingscrème wordt gebruikt (1 min). </li><li> Hoewel nog steeds onder sedatie, ze zijn gewogen, zijn de ogen gesmeerd met steriele oogzalf, en vervolgens geplaatst in dorsale recumbancy op een warm water circuleert apparatuur voor verwarming van onder algehele narcose met een neus met behulp van isofluraan en zuurstof. Op dit punt de zuurstof tarief wordt verlaagd tot 0,2 liter per minuut. </li><li> De buik is bespoten met chloorhexidine-oplossing (chloorhexidine diacetaat wordt snel bacterialcidal en persistent) en veegde met een steriel gaasje drie keer of totdat de operatiewond schoon is. </li></ol> 2. Muis Micro-chirurgische en recovery procedures <ol><li> Een ventrale middellijn incisie (2 cm) is gemaakt met iris schaar door de huid en de buikwand het blootstellen van de buik. Een steriele zoutoplossing gedrenkt 2x2 in gaas wordt gebruikt om de darmen naar links van het dier kant weer te geven. Een muis restrainer is opgezet zodat visualisatie van de vena cava inferior (IVC). </li><li> Op dit punt wordt de isofluraan teruggebracht tot een onderhouds niveau van 2% en de zuurstof percentage blijft op 0,2 liter per minuut voor de rest van de chirurgische procedure. </li><li> Stompe dissectie wordt vergemakkelijkt met een steriele applicator staafje en een extra delicate iris half gebogen weefsel tang. Voorzichtigheid is geboden bij het hanteren muisweefsels want ze zijn uiterst kwetsbaar. </li><li> Alle IVC zijtakken, van de nier-aders naar de iliacale bifurcatie, worden geligeerd met 7-0 niet-reactief prolene hechtingen. Terug takken bleven patent. </li><li> In de elektrolytische IVC model (EIM), een 25G roestvrij stalen naald, bevestigd aan een verzilverd koperdraad (KY-30-1-GRN, Electrospec, Dover, New Jersey) is ingebracht in de blootgestelde caudale IVC, (figuur 1) en geplaatst tegen de voorste muur (anode). </li><li> Een andere draad wordt geïmplanteerd subcutaan het invullen van het circuit (kathode). </li><li> Een stroom van 250 μAmps meer dan 15 minuten werd toegepast met behulp van een Grass S48 blokgolf stimulator en een constante stroom eenheid (Grass Technologies, een Astro-Med, Inc, West Warwick, RI). De directe stroom resulteert in de vorming van giftige producten van elektrolyse dat de endotheliale oppervlak van het IVC het bevorderen van een trombogene omgeving en de daaropvolgende trombusvorming eroderen. </li><li> Na 15 minuten, wordt de naald verwijderd en een wattenstaafje wordt voorzichtig in contact met het gebied om het bloeden te voorkomen </li><li> In schijnvertoning dieren, wordt de naald geplaatst in de IVC en vervolgens verwijderd, zonder toepassing van de huidige. </li><li> De laparotomie site is gesloten in een twee-lagen mode. Ons laboratorium maakt gebruik van 5-0 Vicryl, een synthetisch hechtdraad, in een doorlopend patroon af te sluiten van de buikwand. Adhesive huidlijm wordt gebruikt om de huid te sluiten. Er zijn geen externe hechtingen voor verwijdering. </li><li> Muizen worden dan teruggevonden in een individuele muizen kooi, op de voet post-operatief waargenomen (45 minuten tot 2 uur) onder een warmtelamp (min. afstand 24 centimeter uit de buurt van kooi), keerde daarna terug naar hun oorspronkelijke woningen. Pijnstillers en anti-inflammatoire middelen kunnen worden gebruikt als het niet interfereert met studie doelstelling. Wetenschappelijke redenen om pijnstillers te weigeren, veterinaire en ICUCA goedkeuring nodig zijn. Ons laboratorium heeft uitgewezen dat Buprenorfine ,0.05-0 0,1 mg / kg SQ is een uitstekende pre-en post-operatieve analgeticum voor muizen. Bovendien kan Lidocaïne op 4mg/kg (0,4 ml / kg van een 1% oplossing) worden toegediend in de incisie site wanneer systemische analgetica kan experimentele resultaten verwarren. </li><li> We meestal niet ervaren post-operatieve schadelijke effecten als gevolg van DVT. Kan echter negatieve post-operatieve effecten zijn spontane narcose dood, chirurgische bloedverlies, en gedeeltelijke parese als gevolg van zenuw trauma. Dieren die zijn traag om te herstellen kunnen worden ingevoerd nutria gel of vochtige chow op de vloer van de kooi om het dier terugwinning te vergemakkelijken. Dieren met verbreken post-operatieve complicaties op humane wijze worden gedood. </li><li> Op de toegewezen tijdstip, is euthanasie humaan uitgevoerd in overeenstemming met de aanbevelingen uiteengezet door de American Veterinary Medical Association richtsnoeren inzake Euthanasie voor knaagdieren in te stellen. </li></ol> 3. Representatieve resultaten Het EIM is een model dat trombus vormen in de aanwezigheid van continue bloedstroom. De volgende cijfers laten zien parameters onderzocht in deze roman model. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig1.jpg" alt="Figuur 1" /> Figuur 1 definesthe anatomische gebied waar een 25G roestvrij staalnaald, bevestigd aan een verzilverd koperdraad (KY-30-1-GRN, Electrospec, Dover, New Jersey) is geplaatst. Merk op dat een lymfatische node is vrijwel aanwezig is en helpt als een mijlpaal op zoek naar de caudale IVC. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig2.jpg" alt="Figuur 2" /> Figuur 2: trombus gewicht 2 dagen na EIM in verschillende stammen. Zoals verwacht, trombus gewicht was lager in de PAI-1 KO muizen en groter in hypercoagulatie Delta CT muizen (^ CT). <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig3.jpg" alt="Figuur 3" /> Figuur 3: Oplosbaar P-selectine, een maker voor diepe veneuze trombose, werd gemeten in verschillende stammen. De laagste niveaus werden gevonden in PAI-1 KO muizen terwijl de hoogste niveaus werden gevonden in hypercoagulatie delta CT muizen. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig4.jpg" alt="Figuur 4" /> Figuur 4 Correlatie tussen trombus gewicht en oplosbaar P-selectine werd gevonden in verschillende stammen. Van de nota, in de groep die de kortere trombus grootte gegenereerd, de oplosbare P-selectine werd aangetoond was de laagste (PAI-1 KO muizen). In de groep die de grootste trombus grootte gegenereerd, de oplosbare P-selectine ontdekt was het hoogst (hypercoagulatie delta CT). <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig5.jpg" alt="Figuur 5" /> Figuur 5: Met het oog op de aanwezigheid van de bloedstroom te tonen, echografie werd uitgevoerd bij muizen ondergaan EIM. Figuur 5 toont de echografie uitgevoerd in een muis 2 dagen na EIM. Dan is de monster was oogst. Let op de dat de trombus vorm trombusvorming suggereren in aanwezigheid van stroom

<ol>
	<li>Diaz, J. A., Hawley, A. E., Alvarado, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model.">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104, 366-375 (2010).</li><li>Eitzman, D. T., Westrick, R. J., Nabel, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasminogen+activator+inhibitor-1+and+vitronectin+promote+vascular+thrombosis+in+mice.">Plasminogen activator inhibitor-1 and vitronectin promote vascular thrombosis in mice.</a> Blood. 95, 577-580 (2000).</li><li>Myers, D., Farris, D., Hawley, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selectins+influence+thrombosis+in+a+mouse+model+of+experimental+deep+venous+thrombosis.">Selectins influence thrombosis in a mouse model of experimental deep venous thrombosis.</a> J Surg Res. 108, 212-221 (2002).</li><li>Myers, D. D., Hawley, A. E., Farris, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P-selectin+and+leukocyte+microparticles+are+associated+with+venous+thrombogenesis.">P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis.</a> J Vasc Surg. 38, 1075-1089 (2003).</li><li>Pierangeli, S. S., Barker, J. H., Stikovac, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+human+IgG+antiphospholipid+antibodies+on+an+in+vivo+thrombosis+model+in+mice.">Effect of human IgG antiphospholipid antibodies on an in vivo thrombosis model in mice.</a> Thromb Haemost. 71, 670-674 (1994).</li><li>Pierangeli, S. S., Liu, X. W., Barker, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+thrombosis+in+a+mouse+model+by+IgG,+IgM+and+IgA+immunoglobulins+from+patients+with+the+antiphospholipid+syndrome.">Induction of thrombosis in a mouse model by IgG, IgM and IgA immunoglobulins from patients with the antiphospholipid syndrome.</a> Thromb Haemost. 74, 1361-1367 (1995).</li></ol>

De muis is een uitstekend research tool voor in vivo experimenten. Daarom is de ontwikkeling van muismodellen die nauw nabootsen ziekten of pathologische omstandigheden noodzakelijk zijn. Meerdere veneuze trombose muismodellen zijn gebruikt om DVT onderzoek, waaronder: fotochemische (2), stasis (3-4) en mechanische trauma (5-6). Echter, geen van deze modellen maken gebruik van een intern endotheel stimulans om een ​​thrombus in de aanwezigheid van continue bloedstroom te genereren. Het EIM, met behulp van elektrolytische stimulans binnen de IVC, bevordert de veneuze trombogenese door endotheel activatie in de aanwezigheid van de bloedstroom (1). Het is technisch eenvoudig, gemakkelijk reproduceerbaar en heeft een hoog overlevingspercentage (99%). Ondanks het feit dat een elektrische stroom wordt gebruikt om de elektrolyse te maken, wordt warmte niet gegenereerd (1). Het EIM-model simuleert nauw klinische DVT, en dus dient als een waardevol instrument voor het bestuderen van de intrinsieke mechanismen van trombusvorming en resolutie. Het EIM-model is ook nuttig voor de vooruitgang van de nieuwe therapeutische aanpak voor de bestrijding trombose ziekte.

<table border="1"><tbody><tr><th> Naam van het serum </th><th> Vennootschap </th><th> Catalogus nummer </th><th> Commentaar (optioneel) </th></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> ABCD1234 </td><td></td></tr></tbody></table>

electrolytic inferior vena cava model (eim) of venous thrombosis

Diermodellen dienen een belangrijke rol in diepe veneuze trombose (DVT) onderzoek met het oog op trombusvorming, trombus resolutie te bestuderen en om potentiële therapeutische stoffen (1) test. Nieuwe verbindingen te worden gebruikt in de behandeling en preventie van DVT worden momenteel ontwikkeld. De levering van potentiële therapeutische antagonist verbindingen aan een getroffen thrombosed ader is problematisch. In het kader van therapeutische toepassingen, een model dat gedeeltelijke stasis gebruikt en consequent genereert trombi binnen een belangrijke ader is onlangs vastgesteld. De elektrolytische vena cava inferior Model (EIM) is muismodel van DVT die trombusvorming in de aanwezigheid van continue bloedstroom mogelijk maakt. Dit model maakt therapeutische middelen om in contact met de trombus op een dynamische manier, en is gevoeliger dan de andere modellen van DVT (1). Daarnaast is deze trombose model simuleert nauw klinische situaties van trombusvorming en is ideaal om veneuze endotheel activatie, migratie van leukocyten, veneuze trombogenese, bestuderen en therapeutische toepassingen (1) test. Het EIM-model is technisch eenvoudig, gemakkelijk reproduceerbaar, creëert consistente trombi maten en zorgt voor een grote steekproef (dat wil zeggen trombus en ader muur) die nodig is voor analytische doeleinden.

Watch this Scientific Journal Video about Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis at JoVE.com

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

De elektrolytische inductie van endotheel activatie aan het interne oppervlak van de vena cava inferior resulteert in een veneuze soort trombusvorming te wijten aan endotheel activatie en gedeeltelijke bloed stasis, twee componenten van de triade Virchow&#39;s.

Elektrolytische Inferior Vena Cava Model (EIM) van veneuze trombose

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

Microchirurgische Veneuze Pouch Arteriële-splitsing Aneurysma&#39;s in het Rabbit Model: technische aspecten

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

Muis Compleet Stasis Model van Inferior Vena Cava trombose

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE).  In the United States (U.S.), the high morbidity and ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Volwassen muis Veneuze Hypertensie Model: halsslagader op externe halsader Anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Implantatie van de vena cava inferior Interpositie Graft in muismodel

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

Orthotopische Injectie van borstkankercellen in de uiervet Pad van Muizen tumorgroei te bestuderen.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Ferric-Chloride geïnduceerde trombose Muis Model op halsslagader en Mesenterium Vessel

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

Ferric Chloride-induced Murine Thrombosis Models

IJzer-Chloride geïnduceerde Murine Trombose Models

Arterial thrombosis (blood clot) is a common complication of many systemic diseases associated with chronic inflammation, including atherosclerosis, ...

Patch Angioplasty in the Rat Aorta or Inferior Vena Cava

Patch angioplastie in het Rat Aorta of Inferior Vena Cava

Pericardial patches are commonly used in vascular surgery to close vessels. To facilitate studies of the neointimal hyperplasia that forms on the patch, ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Canine halsslagader ferrichloride-geïnduceerde trombose: Een grote diermodel van vasculaire verwonding

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...