Name: vibratome sectioning for enhanced preservation of the cytoarchitecture of the mammalian organ of corti
Uploaded: 2011-06-17T13:00:00
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著者は、アガロースビーズを使用してセクションをマウントするために提案するための共焦点顕微鏡と博士建張のための子供の研究所イメージングコアの使用を承認したいと思います。この作品は、NIHの助成金DC010387によって賄われていた。

1。内側の耳の単離と固定<ol><li>コルチ器官の細胞のパターニングの分析については、安楽死は、適切に胚、大人を上演した。 </li><li>膜性内耳を含む、耳嚢をばらばらにする。マウスでは、これは簡単に（E）14.5日と古いが、これでE0.5は膣栓が検出された日である胚における胚で行うことができます。耳嚢の解剖は、正中線で断頭し、頭蓋骨の開放が最初に実行されます。それぞれの耳を（...

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	<li>Lim, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+structure+of+the+organ+of+Corti:+a+review.">Functional structure of the organ of Corti: a review.</a> Hear Res. 22, 117-146 (1986).</li><li>Raphael, Y., Altschuler, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+innervation+of+the+cochlea.">Structure and innervation of the cochlea.</a> Brain Res Bull. 60, 397-422 (2003).</li><li>Chung, W. S., Shin, C. H., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bmp2+signaling+regulates+the+hepatic+versus+pancreatic+fate+decision.">Bmp2 signaling regulates the hepatic versus pancreatic fate decision.</a> Dev Cell. 15, 738-748 (2008).</li><li>Sun, X., Mariani, F. V., Martin, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functions+of+FGF+signalling+from+the+apical+ectodermal+ridge+in+limb+development.">Functions of FGF signalling from the apical ectodermal ridge in limb development.</a> Nature. 418, 501-508 (2002).</li><li>Trinh, L. A., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibronectin+regulates+epithelial+organization+during+myocardial+migration+in+zebrafish.">Fibronectin regulates epithelial organization during myocardial migration in zebrafish.</a> Dev Cell. 6, 371-382 (2004).</li><li>Yin, C., Kikuchi, K., Hochgreb, T., Poss, K. D., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand2+regulates+extracellular+matrix+remodeling+essential+for+gut-looping+morphogenesis+in+zebrafish.">Hand2 regulates extracellular matrix remodeling essential for gut-looping morphogenesis in zebrafish.</a> Dev Cell. 18, 973-984 (2010).</li><li>Shim, K., Minowada, G., Coling, D. E., Martin, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sprouty2,+a+mouse+deafness+gene,+regulates+cell+fate+decisions+in+the+auditory+sensory+epithelium+by+antagonizing+FGF+signaling.">Sprouty2, a mouse deafness gene, regulates cell fate decisions in the auditory sensory epithelium by antagonizing FGF signaling.</a> Dev Cell. 8, 553-564 (2005).</li></ol>

免疫組織化学と共焦点イメージングが続くビブラトーム切片、の手順では、最小限の組織損傷とコルチ器官の可視化が可能になります。明らかに、ビブラトームセクションで内部の地域から採取した共焦点画像は固定のアーティファクトによって制限される細胞形態の優れた保全を示しています。このような柱細胞の細胞質の拡張子の区切りなど、時折携帯電話の中断は、（図示せず）が観?...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬の名前</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント（省略可能） </th></tr><tr><td>ライカは、ブレードミクロトームを振動VT1000S </td><td>ライカ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ツァイスLSM510レーザー走査型共焦点顕微鏡</td><td>ツァイス</td><td></td><td></td></tr><tr><td>学生デュモン＃5鉗子</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 91150〜20 </td><td></td></tr><tr><td>超高純度低融点アガロース</td><td>インビトロジェン</td><td> 16520-050 </td><td></td></tr><tr><td>ピールウェイ埋め込み型</td><td> Polysciences </td><td> 18986または18646A </td><td></td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン</td><td>ジャクソンイムノ</td><td> 001-000-162 </td><td></td></tr><tr><td>ヤギ血清</td><td>インビトロジェン</td><td> 16210-064 </td><td></td></tr><tr><td> S100 </td><td>ダコ</td><td> Z0311 </td><td></td></tr><tr><td>のAlexa Fluor ® 568ヤギ抗ウサギIgG </td><td>インビトロジェン</td><td> - 11036 </td><td> 1:1000希釈</td></tr><tr><td> Vectashield </td><td>ベクトル研究所</td><td> H - 1000 </td><td></td></tr><tr><td> YO - PRO - 1 </td><td>インビトロジェン</td><td> Y3603 </td><td></td></tr><tr><td>真空グリース</td><td>フィッシャー</td><td> S41718 </td><td></td></tr><tr><td>アッフィのジェルブルージェル</td><td> Bio - Rad社</td><td> 153-7301 </td><td></td></tr></tbody></table>

vibratome sectioning for enhanced preservation of the cytoarchitecture of the mammalian organ of corti

コルチ器の哺乳類の器官はmechanosensory髪とnonsensory支持細胞の高度に秩序化された細胞のモザイクです。 この細胞のモザイクの（1,2でレビュー）。可視化は、多くの場合、コルチ器官は横断面であることが必要です。特に、その核有毛細胞に関してbasally配置されているnonsensory柱とダイテルス&quot;細胞は、、コルチ器官を横断切片のない視覚化できません。しかし、柱とダイテルス&quot;細胞の微細な細胞質プロセスを含むコルチの哺乳類器官のデリケートな細胞構築は、標準的な免疫組織化学的染色技術と互換性のあるようなパラフィンおよび凍結切片のようなルーチン組織学的手続きによって維持することは困難です。 ここでは、共焦点顕微鏡に続く蝸牛、全体のマウントにこれらのビブラトーム切片の免疫組織化学染色の切片ビブラトームで構成されるシンプルかつ堅牢な手順を説明します。この手順は、マウスの肢芽、ゼブラフィッシュの腸、肝臓、膵臓、および心臓（選択された例については3-6を参照）を含む複数の臓器のimmunhistochemical解析に広く用いられている。さらに、この手順では、胚および成体マウス7の両方におけるコルチ器の変異体と制御器官における柱の細胞数のイメージングとquantitificatonの両方の判定に成功した。このメソッドは、しかし、現在広くコルチの哺乳類の器官を調べるために使用されていません。この手順の両方コルチ成人器官の微細な細胞構築の強化された保護を提供し、種々の細胞型の定量化を可能にするために可能性が説明されています。

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Vibratome Sectioning for Enhanced Preservation of the Cytoarchitecture of the Mammalian Organ of Corti

免疫組織化学と共焦点顕微鏡に続くコルチ器官を、切片ビブラトームの簡単な手順が説明されています。この手順では、コルチ器の哺乳類器官の微細な細胞構築の改良保全を可能にし、その結果、細胞の種類を正確に定量することができます。

ビブラトームは、コルチ器の哺乳類器官の細胞構築の強化された保全のためセクショニング

The mammalian organ of Corti is a highly ordered cellular mosaic of mechanosensory hair and nonsensory supporting cells (reviewed in 1,2).Visualization of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Methods for Experimental Manipulations after Optic Nerve Transection in the Mammalian CNS

哺乳類の中枢神経系における視神経切断後の実験操作のための方法

Retinal ganglion cells (RGCs) are CNS neurons that output visual information from the retina to the brain, via the optic nerve. The optic nerve can be ...

神経科学

Imaging Neuronal Responses in Slice Preparations of Vomeronasal Organ Expressing a Genetically Encoded Calcium Sensor

遺伝的にコードされたカルシウムセンサーを発現する鋤鼻器のスライス標本のイメージング神経細胞応答

The vomeronasal organ (VNO) detects chemosensory signals that carry information about the social, sexual and reproductive status of the individuals within ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

でProprioceptorsの可視化<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫および蛹

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

無傷の鋤鼻器官と副嗅球のex vivoでの準備

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

Vibratome Sectioning Mouse Retina to Prepare Photoreceptor Cultures

ビブラトームセクショニングマウス網膜は、感光体文化を準備する

The retina is a part of the central nervous system that has organized architecture, with neurons in layers from the photoreceptors, both rods and cones in ...

In-depth Physiological Analysis of Defined Cell Populations in Acute Tissue Slices of the Mouse Vomeronasal Organ

マウス鋤鼻器官の急性組織スライスで定義された細胞集団の中で、深さ生理学的解析

In most mammals, the vomeronasal organ (VNO) is a chemosensory structure that detects both hetero- and conspecific social cues. Vomeronasal sensory ...

Visualization of Cortical Modules in Flattened Mammalian Cortices

平坦化された哺乳類の皮質皮質モジュールの可視化

The cortex of mammalian brains is parcellated into distinct substructures or modules. Cortical modules typically lie parallel to the cortical sheet, and ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

くも膜下出血のマウスモデルにおける脳血管攣縮の定量化法の体積

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

成体マウス後根神経節の調査の哺乳類の軸索の再生: In Vivoエレクトロポレーション

Electroporation is an essential non-viral gene transfection approach to introduce DNA plasmids or small RNA molecules into cells. A sensory neuron in the ...

The Cutting and Floating Method for Paraffin-embedded Tissue for Sectioning

切削とフローティング区分のための組織のパラフィン包埋法

Sectioning of the paraffin-embedded tissue is widely used in histology and pathology. However, it is tedious. To improve this method, several commercial ...