Name: quantitative analysis of cancer metastasis using an avian embryo model
Uploaded: 2011-05-30T22:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Analysis of Cancer Metastasis using an Avian Embryo Model at JoVE.com

نريد أن يعترف تايسون فودز لتوفير بسخاء البويضات المخصبة. وكان ارنولد شانا مفيدة أثناء تصوير هذا البروتوكول. وأيد Trenis بالمر من قبل المعاهد الوطنية للصحة تحت L. روث الجائزة الوطنية كيرشتاين دائرة البحوث (F31 المعهد الوطني للسرطان). وأيد هذا العمل جزئيا من خلال المنح CCSRI # 700537 لرابطة الدفاع اليهودية والمعاهد الوطنية للصحة / NCI منح # CA120711 - 01A1 - 01A1 وCA120711 إلى الألف إلى الياء.

1. اعداد البيض للxenografting (الانبثاث عفوية) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضعت حديثا يتم تحضين بيض الدجاج المخصب في حاضنة الدورية لمدة 10 أيام عند 100 درجة فهرنهايت والرطوبة 60 ٪. يتم تناوب البيض أربع مرات كل ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في يوم 10 تنموي?...

<ol>
	<li>Ghiso, A. g. u. i. r. r. e., Kovalski, J. A., K, ., Ossowski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+dormancy+induced+by+downregulation+of+urokinase+receptor+in+human+carcinoma+involves+integrin+and+MAPK+signaling.">Tumor dormancy induced by downregulation of urokinase receptor in human carcinoma involves integrin and MAPK signaling.</a> J Cell Biol. 147, 89-104 (1999).</li><li>Chambers, A. F., Shafir, R., Ling, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+system+for+studying+metastasis+using+the+embryonic+chick.">A model system for studying metastasis using the embryonic chick.</a> Cancer research. 42, 4018-4025 (1982).</li><li>Chambers, A. F., Wilson, S. M., Tuck, A. B., Denhardt, G. H., Cairncross, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+metastatic+properties+of+a+variety+of+mouse,+rat,+and+human+cells+in+assays+in+nude+mice+and+chick+embryos.">Comparison of metastatic properties of a variety of mouse, rat, and human cells in assays in nude mice and chick embryos.</a> In Vivo. 4, 215-219 (1990).</li><li>Deryugina, E. I., Zijlstra, A., Partridge, J. J., Kupriyanova, T. A., Madsen, M. A., Papagiannakopoulos, T., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unexpected+effect+of+matrix+metalloproteinase+down-regulation+on+vascular+intravasation+and+metastasis+of+human+fibrosarcoma+cells+selected+in+vivo+for+high+rates+of+dissemination.">Unexpected effect of matrix metalloproteinase down-regulation on vascular intravasation and metastasis of human fibrosarcoma cells selected in vivo for high rates of dissemination.</a> Cancer Res. 65, 10959-10969 (2005).</li><li>Hahn-Dantona, E., Ramos-DeSimone, N., Sipley, J., Nagase, H., French, D. L., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+proMMP-9+by+a+plasmin/MMP-3+cascade+in+a+tumor+cell+model.+Regulation+by+tissue+inhibitors+of+metalloproteinases.">Activation of proMMP-9 by a plasmin/MMP-3 cascade in a tumor cell model. Regulation by tissue inhibitors of metalloproteinases.</a> Ann N Y Acad Sci. 878, 372-387 (1999).</li><li>Kim, J., Yu, W., Kovalski, K., Ossowski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+for+specific+proteases+in+cancer+cell+intravasation+as+revealed+by+a+novel+semiquantitative+PCR-based+assay.">Requirement for specific proteases in cancer cell intravasation as revealed by a novel semiquantitative PCR-based assay.</a> Cell. 94, 353-362 (1998).</li><li>Leong, H. S., Steinmetz, N. F., Ablack, A., Destito, G., Zijlstra, A., Stuhlmann, H., Manchester, M., Lewis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+of+embryonic+and+tumor+neovasculature+using+viral+nanoparticles.">Intravital imaging of embryonic and tumor neovasculature using viral nanoparticles.</a> Nat Protoc. 5, 1406-1417 (2010).</li><li>Lewis, J. D., Destito, G., Zijlstra, A., Gonzalez, M. J., Quigley, J. P., Manchester, M., Stuhlmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+nanoparticles+as+tools+for+intravital+vascular+imaging.">Viral nanoparticles as tools for intravital vascular imaging.</a> Nat Med. 12, 354-360 (2006).</li><li>Ossowski, L., Reich, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+malignant+phenotype+of+a+human+carcinoma+conditioned+by+growth+environment.">Changes in malignant phenotype of a human carcinoma conditioned by growth environment.</a> Cell. 33, 323-333 (1983).</li><li>Schmittgen, T. D., Livak, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+real-time+PCR+data+by+the+comparative+C(T)+method.">Analyzing real-time PCR data by the comparative C(T) method.</a> Nat Protoc. 3, 1101-1108 (2008).</li><li>Testa, J. E., Brooks, P. C., Lin, J. M., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eukaryotic+expression+cloning+with+an+antimetastatic+monoclonal+antibody+identifies+a+tetraspanin+(PETA-3/CD151)+as+an+effector+of+human+tumor+cell+migration+and+metastasis.">Eukaryotic expression cloning with an antimetastatic monoclonal antibody identifies a tetraspanin (PETA-3/CD151) as an effector of human tumor cell migration and metastasis.</a> Cancer Res. 59, 3812-3820 (1999).</li><li>Zijlstra, A., Lewis, J., Degryse, B., Stuhlmann, H., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Inhibition+of+Tumor+Cell+Intravasation+and+Subsequent+Metastasis+via+Regulation+of+In+Vivo+Tumor+Cell+Motility+by+the+Tetraspanin+CD151.">The Inhibition of Tumor Cell Intravasation and Subsequent Metastasis via Regulation of In Vivo Tumor Cell Motility by the Tetraspanin CD151.</a> Cancer Cell. 13, 221-234 (2008).</li><li>Zijlstra, A., Mellor, R., Panzarella, G., Aimes, R. T., Hooper, J. D., Marchenko, N. D., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+analysis+of+rate-limiting+steps+in+the+metastatic+cascade+using+human-specific+real-time+polymerase+chain+reaction.">A quantitative analysis of rate-limiting steps in the metastatic cascade using human-specific real-time polymerase chain reaction.</a> Cancer Res. 62, 7083-7092 (2002).</li></ol>

وقد استخدم CAM الفرخ على مدى عقود في نظام نموذجي لدراسة الجوانب المختلفة لتطور السرطان والبيولوجيا النقيلي. وقد تم تنفيذ مبدأ تقييم القدرات المنتشر في هذا النموذج من قبل مجموعة متنوعة من الفئات بما في ذلك تحليل السكون (Ghiso أغيري وآخرون ، 1999 ؛. Ossowski والرايخ ، 1983) ، إ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات (اختياري) </th></tr><tr><td> 1X Dulbecco في التعديل النسر متوسطة (DMEM) </td><td> Invitrogen </td><td> 11995073 </td><td></td></tr><tr><td> Dulbecco والفوسفات مخزنة المالحة (D - PBS) (1X) والسائلة </td><td> Invitrogen </td><td> 14190250 </td><td> الرقم الهيدروجيني 7،4 </td></tr><tr><td> التربسين ، 0.05 ٪ (1X) مع 4NA EDTA والسائلة </td><td> Invitrogen </td><td> 25300054 </td><td></td></tr><tr><td> رياضي هاتشر </td><td> التوت هيل </td><td> 1550HA </td><td rowspan="2"> هذه هي بعض من حاضنات المتاحة بسهولة أكثر. ومع ذلك ، سوف تظهر معدات الفيديو المختلفة. </td></tr><tr><td> رياضي الحاضنة </td><td> التوت هيل </td><td> 1502EA </td><td></td></tr><tr><td> DREMEL أداة دوارة </td><td> DREMEL </td><td></td><td></td></tr><tr><td> عجلات قطع DREMEL لا. 36 </td><td> DREMEL </td><td> 409 </td><td></td></tr><tr><td> محمول الماصة المعونة </td><td> الصياد </td><td> 1368115E </td><td></td></tr><tr><td> يميل القطن القضبان الرفيعة </td><td> الصياد </td><td> 23-400-001) </td><td></td></tr><tr><td> بيض </td><td> مختلف </td><td></td><td> ويمكن استخدام بائع عديدة ومختلفة. يجب أن يكون البيض حوالي 35-55 غرام. والدجاجات التي تبيض لهم يجب أن تكون بين 36 و 55 أسبوعا من العمر. </td></tr><tr><td> عدادة الكريات </td><td> Hausser العلمية وVWR </td><td> 15170-090 </td><td></td></tr><tr><td> الألياف البصرية المجهر منار </td><td> Amscope </td><td> HL250 - AY </td><td> 150W </td></tr><tr><td> إبرة قياس 25 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Sybr الاخضر المقتطف - N - PCR الأمبير الأنسجة كيت </td><td> سيغما الدريخ </td><td> XNATRG </td><td></td></tr></tbody></table>

quantitative analysis of cancer metastasis using an avian embryo model

خلال نشر الخلايا السرطانية الانبثاث من الورم الرئيسي ، إلى غزو الأنسجة المحيطة بها ، والانتشار إلى أعضاء بعيدة. الانبثاث هي عملية معقدة يمكن أن تنطوي على العديد من أنواع الأنسجة ، وفترات زمنية متنوعة ، وغالبا ما تحدث في أعماق الأجهزة ، مما يجعل من الصعب تحقيق وكميا. بالإضافة إلى ذلك ، تأثر فعالية عملية المتنقل بخطوات متعددة في تتالي النقيلي مما يجعل من الصعب تقييم مساهمة من جانب واحد للسلوك الخلية السرطانية. نتيجة لذلك ، كثيرا ما يتم تنفيذ المقايسات الانبثاث في حيوانات التجارب لتوفير سياق واقعي بالضرورة للدراسة الانبثاث. لسوء الحظ ، فإن تعقيد هذه النماذج التي لها علم وظائف الأعضاء المعقدة. الجنين الفرخ هو نموذج فريد في الجسم الحي أن يتغلب على الكثير من القيود على دراسة ورم خبيث ، ويرجع ذلك إلى سهولة الحصول على غشاء مشيمائي (CAM) ، وأوعية دموية جيدة خارج الأنسجة الجنينية تقع تحت قشر البيض الذي يتم تقبلا لxenografting الخلايا السرطانية (الشكل 1). وعلاوة على ذلك ، لأن الجنين الفرخ هو العوز المناعي بشكل طبيعي ، وتدعم CAM engraftment بسهولة من الأنسجة الطبيعية على حد سواء والورم. الأهم من ذلك ، CAM الطيور يدعم بنجاح خصائص الخلايا السرطانية أكثر بما في ذلك النمو ، والغزو ، الأوعية الدموية ، وإعادة تشكيل المكروية. هذا يجعل نموذج مفيد بشكل استثنائي من أجل التحقيق في الممرات التي تؤدي إلى ورم خبيث من السرطان والتنبؤ استجابة للعلاجات السرطان النقيلي جديدة محتملة. الكشف عن الخلايا التي تنشرها أنواع محددة PCR ألو يجعل من الممكن إجراء تقييم كمي لورم خبيث في الأجهزة التي استعمرها قليلة مثل 25 الخلايا. باستخدام الإنسان سرطانة بشرانية خط الخلية (HEp3) نستخدم هذا النموذج لتحليل الانبثاث عفوية الخلايا السرطانية إلى أعضاء بعيدة ، بما فيها الكبد والرئة الفرخ. علاوة على ذلك ، باستخدام بروتوكول ألو - PCR نظهر حساسية واستنساخ للمقايسة كأداة لتحليل وquantitate intravasation واعتقال والتسرب ، والاستعمار بوصفها عناصر فردية من ورم خبيث.

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Analysis of Cancer Metastasis using an Avian Embryo Model at JoVE.com

Quantitative Analysis of Cancer Metastasis using an Avian Embryo Model

باستخدام كمية PCR ، علينا أن نظهر كيف يمكن استخدام نموذج راسخة CAM فرخ لتحليل كمي لورم خبيث من الخلايا السرطانية البشرية إلى الأجهزة البعيدة.

تحليل الكمي الإنبثاث السرطان باستخدام الأجنة النموذجي الطيور

During metastasis cancer cells disseminate from the primary tumor, invade into surrounding tissues, and spread to distant organs. Metastasis is a complex ...

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Cell Biology

Medicine

Unit 1

Cancer

SCIENTISTS IN ACTION

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

نموذج مثلي من سرطان المثانة الفئران

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Quantitative Visualization and Detection of Skin Cancer Using Dynamic Thermal Imaging

الكمية التصور والكشف عن سرطان الجلد باستخدام التصوير الحراري الديناميكي

In 2010 approximately 68,720 melanomas will be diagnosed in the US alone, with around 8,650 resulting in death 1. To date, the only effective treatment ...

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

في ضوء بارد التصوير حيوية الجسم الحي من نقص الأكسجة ورم من الدماغ الانبثاث سرطان الثدي في نموذج الفأر

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

ومتعددة الوسائط التصوير من الأوعية الدموية في نموذج الفئران عاري من سرطان الثدي الإنبثاث العظام باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي، الحجمي التصوير المقطعي والموجات فوق الصوتية

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Models of Bone Metastasis

نماذج من الانبثاث العظام

Bone metastases are a common occurrence in several malignancies, including breast, prostate, and lung. Once established in bone, tumors are responsible ...

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

وسرطان المثانة نموذج مثلي للدراسات توصيل الجينات

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

باستخدام الكمي في الوقت الحقيقي PCR لتحديد الجهات المانحة Engraftment خلية في التنافسية نموذج الفئران زرع نخاع العظم

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Quantitative Multispectral Analysis Following Fluorescent Tissue Transplant for Visualization of Cell Origins, Types, and Interactions

تحليل الكمي متعددة الأطياف وبعد زرع الأنسجة نيون لتصور أصول الخليوي، وأنواع، والتفاعلات

With the desire to understand the contributions of multiple cellular elements to the development of a complex tissue; such as the numerous cell types that ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

على الفئران نموذج مثلي من سرطان البروستاتا البشرية الانبثاث

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

النخاعي السوائل عن طريق الرنا الميكروي التنميط الكمي في الوقت الحقيقي PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...