Name: targeted training of ultrasonic vocalizations in aged and parkinsonian rats
Uploaded: 2011-08-08T12:00:00
Duration: 11 min
Description: Watch this Scientific Journal Video about Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats at JoVE.com

בתמיכת המכון הלאומי לבריאות (NIDCD, P30-DC010754, T32-DC009401).

1. Pre / Post-אימון הקלטות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגין ניטור אולטרא עם Avisoft מקליט באמצעות תצורת שמוצג באיור 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קולות Ultrasonic יכול להיות פיקוח או חזותית על ידי צופה ספקטרוגרמה בזמן אמת, או aurally עם אוזניות פקוק לתוך ממשק הקלטה אולטרה סאונד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום פתוח מינית (מיוחמות) חולדה נקבה לכלוב הבית של חולדה זכר לנושא. סימנים של ייחום כוללים, לורדוסה האוזן נענוע, ומהיר מתרוצצות. נקבות מיוחמות להפיק קולות יותר גברים מאשר נשים שאינן מינית פתוחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי הזכר הראתה עניין הנשי (למשל, מרחרח, לרדוף, ו / או הרכבה), להסיר את הנקבה ולהקליט קולות של הזכר למשך 1-2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הזכר אינו להשמיע מיד, בקצרה להחזיר את הנקבה לכלוב של הזכר הביתה כדי לעורר הניקוד. </li></ol> 2. הדרכה קולית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגין ניטור אולטרא עם Avisoft מקליט באמצעות תצורה זהה שמוצג באיור 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את חולדה זכר בכלוב בביתו תחת המיקרופון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים חולדה נקבה לכלוב בבית של הזכר. כאמור, את העכברוש הנשי צריך להיות מיוחמות כדי למקסם את התגובה הניקוד מן הזכר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הזכר הראתה עניין הנשי להסיר את הנקבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לאחר הזכר מייצר את הניקוד היעד, פרס בו זמנית עם לחץ עט מצגת קצרה של בקבוק מים או אוכל לטפל. בתחילה, 50-kHz כל מאופנן תדר (איור 5 ב) שיחה מתוגמל. כפי הכשרה מתקדמת מחרוזות רק יותר ויותר מורכבים של שיחות, כגון מחרוזות של 5 עד 10 שיחות ברצף מהיר, מתחזקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך אימון עד נתת 30 תגבורת. זה לוקח בדרך כלל בין 5 - 10 דקות. </li></ol> 3. הכנות לקראת ניתוח אקוסטי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמיד בארכיון קבצי הצליל המקורי וערוך מדידות על עותק עבודה, כמו ניתוח ידרוש סינון הרעש מחיקת כל קובץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במצב אצווה של Avisoft SASLab Pro, לעבור גבוה לסנן את כל קבצי הצליל להיות מנותח בבית kHz 25 להסיר רעשים לא רצויים מתחת קולות קולי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להשתמש בתכונת זיהוי אוטומטי של SASLab Pro, סף רעש צריך קודם כל להיות נחוש. כדי לעשות זאת, לפתוח קובץ קול וליצור ספקטרוגרמה באמצעות ההגדרות שמוצג באיור 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התצוגה מדידות אוטומטי פרמטר צריך להיות ההתקנה בהתאם להגדרות שמוצג באיור 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצא שטח של ספקטרוגרמה שבו אין שיחות או רעשים, זהו רעש רקע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות &quot;אוטומטי (סף יחיד)&quot; אפשרות, להגדיר את סף בסעיף אלמנט ההפרדה של תיבת מדידות אוטומטי פרמטר ההתקנה שיח רק מעל רעש הרקע על ידי התאמת קו שחור בחלון כוח קשת מעל ספקטרוגרמה. באיור 4, סף הוגדר dB -55. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחלק התחתון של תיבת הדו שיח, בחר את &quot;דחה אם משרעת השיא הוא פחות&quot; ערך dB 1 מתחת לסף נמצא בשלב הקודם. שני אלה הערכים עכשיו צריך לשמש עבור כל קבצי קול ניתחו, בהנחה כל הגדרות ההקלטה היו זהים. </li></ol> 4. ניקודו זיהוי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי התווית קולות באמצעות מערכת אוטומטית סף לעיל, קודם ליצור ספקטרוגרמה עם ההגדרות לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ידנית למחוק כל הרעש הזה עונה על הקריטריונים הבאים: 1) זוהה בטעות הניקוד, 2) משפיע על אפליה של תחילת ו / או סוף הניקוד, ו / או 3) זוהה בטעות הגבוהה ביותר או התדר הנמוך ביותר הניקוד (מסומן על ידי קווים אדומים העליון והתחתון, בהתאמה). לחלופין, להתחיל / להפסיק את הזמנים של תוויות הניקוד ניתן להתאימם באופן ידני לאחר יצירת תוויות קבע בשלב 4.5 להלן. המשפיעים על מדידות רעש בתדר גבוה או נמוך, עם זאת, צריך להימחק באופן ידני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במקרים מסוימים הניקוד לא יוכלו להפריד את הרעשים שמסביב, כמו קול של מצעים במהלך תנועה. במקרים אלה, השיחה לא ניתן לנתח במדויק צריך להימחק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כל קולות זוהו, למחוק לצמיתות את הסעיפים שנמחקו של ספקטרוגרמה מתוך קובץ הצליל על ידי בחירת &quot;הסר סעיפים ספקטרוגרמה נמחק waveform ...&quot; מתוך התפריט הנפתח כלים. אם בפקודה זו לא מבוצע לפני ספקטרוגרמה סגור, כל העבודה מוחקים יאבדו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת תוויות קבע קובץ הצליל על ידי לחיצה על &#39;ערוך&#39; כפתור בסעיף אלמנט ההפרדה של חלון מדידות פרמטר אוטומטי ההתקנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזותית aurally לבדוק כל הניקוד שכותרתו לקבוע בקטגוריה שלו: תדירות פשוטה, מווסתת (FM), או הרמונית. חמורIGN את התווית המתאימה באמצעות מוגדרים מראש טקסט מודולים. דוגמאות של כל קטגוריה הניקוד מוצגים באיור 5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את ספקטרוגרמה, שמור את הקובץ קול, ולהמשיך עם קובץ הצליל הבא כדי להיות מנותח. </li></ol> 5. מדידות אקוסטיות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר קולות בכל קבצי קול זוהו, להשתמש בכלי עיבוד אצווה (כלים: Batch Processing) באופן אוטומטי למדוד את הפרמטרים האקוסטיים של כל הקבצים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתיבת עיבוד אצווה דיאלוג, בחר &quot;מדידות פרמטר אוטומטי&quot; מתוך התפריט הנפתח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את &quot;תהליך כל הקבצים בתיקייה הנבחרת&quot; תיבת הסימון ולחץ על הלחצן &quot;תיקיה&quot; ובחר את התיקייה שבה נשמרים קבצי קול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ &quot;התחל&quot; של כל קובץ ינותחו באופן אוטומטי בהתאם להגדרות האחרון שהיה בשימוש בתיבה אוטומטית פרמטר מדידה ההתקנה דיאלוג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המדידות יישמרו בקובץ טקסט כי ניתן להגדיר באמצעות פרמטרים DDE / קובץ יומן הגדרת הפקודה. זהו קובץ טקסט אז יכול להיות מיובאים לתוך תוכנית לניתוח סטטיסטי. </li></ol> 6. נציג תוצאות: קולות Ultrasonic של חולדות מושפעים משינויים פיזיולוגיים הקשורים להזדקנות 6-OHDA מודלים מחלת פרקינסון 13 בדרך כלל, אנו רואים ירידה באיכות של קולות קולי המאופיינת על ידי ירידה של הפרמטרים הבאים אקוסטי כמותי:. ברוחב פס, בתדירות שיא, משך , ועוצמה. איור 6 מציג את קולות תדר מאופנן של עכברוש במודל פ&quot;ד בשלוש נקודות זמן שונות: בסיסית, לאחר גיוס של מחלת הפרקינסון, ואחרי אימון הניקוד. בתנאי פ&quot;ד, השיחה מראה ירידה, רוחב פס עוצמת משך,. בנוסף, אפנון תדר הפך סדיר. בנוסף השפלה של פרמטרים אקוסטיים ספציפיים, אנחנו גם רואים את המורכבות הכוללת פחות סוגי קולות המיוצר החולדות ומעלה פרקינסון. לדוגמה, לאחר גיוס של פ&quot;ד חולדה מייצר מספר גדול יותר של שיחות פשוטות שיחות תדירות פחות מווסתת. הכשרה הניקוד לאחר, פרמטרים אקוסטיים רבים, כגון משך ועוצמת, הבסיס רמות גישה ומספר גדל שיחות מורכבות (איור 6). חולדות בני המניפסט השפלה דומה של פרמטרים אקוסטיים קולות קולי שלהם. אנו בודקים את ההשפעות של אימון קולי בחולדות בגיל. <img src="/files/ftp_upload/2835/2835fig1.jpg" alt="איור 1"/> באיור 1. מספר קולות בכל הפעלה (יעד פגש חולדות כל כל שבוע) והמחיר הניקוד (שגיאה מתכוון תקן מוצג) הן להגדיל במשך 6 שבועות אימון בקבוצה של שני צעירים (9 מו) ומבוגרים (32 מו) פישר 344/Brown נורבגיה חולדות F1. <img src="/files/ftp_upload/2835/2835fig2.jpg" alt="איור 2"/> איור 2 קולות נציג של כל אחת משלוש הקטגוריות של 50 קולות kHz;. (א) פשוטה, (ב) תדר מאופנן, ו (ג) הרמוני. <img src="/files/ftp_upload/2835/2835fig3.jpg" alt="איור 3"/> איור 3. נציג תדר מאופנן קולות מן חולדה אחת בתחילת המחקר (א), (ב) שלאחר פ&quot;ד אינדוקציה, ו (ג) אימון לאחר הניקוד.

<ol>
	<li>Fox, C. M., Morrison, C. E., Ramig, L. O., Sapir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+perspectives+on+the+Lee+Silverman+Voice+Treatment+(LSVT)+for+individuals+with+idiopathic+Parkinson+disease.">Current perspectives on the Lee Silverman Voice Treatment (LSVT) for individuals with idiopathic Parkinson disease.</a> Am J Speech Lang Pathol. 11, 111-123 (2002).</li><li>Roy, N., Stemple, J., Merrill, R. M., Thomas, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+voice+disorders+in+the+elderly:+preliminary+findings.">Epidemiology of voice disorders in the elderly: preliminary findings.</a> Laryngoscope. 117, 628-633 (2007).</li><li>Ramig, L. O., Sapir, S., Fox, C., Countryman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+vocal+loudness+following+intensive+voice+treatment+(LSVT)+in+individuals+with+Parkinson's+disease:+a+comparison+with+untreated+patients+and+normal+age-matched+controls.">Changes in vocal loudness following intensive voice treatment (LSVT) in individuals with Parkinson's disease: a comparison with untreated patients and normal age-matched controls.</a> Mov. Disord. 16, 79-83 (2001).</li><li>Sapir, S., Ramig, L. O., Fox, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Lee+Silverman+Voice+Treatment®+for+voice,+speech+and+other+orofacial+disorders+in+patients+with+Parkinson's+disease.">The Lee Silverman Voice Treatment® for voice, speech and other orofacial disorders in patients with Parkinson's disease.</a> Future Neurology. 1, 563-570 (2006).</li><li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=50-kHz+chirping+(laughter?)+in+response+to+conditioned+and+unconditioned+tickle-induced+reward+in+rats:+effects+of+social+housing+and+genetic+variables.">50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: effects of social housing and genetic variables.</a> Behav. Brain Res. 115, 25-38 (2000).</li><li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T+tf/J+mouse+model+of+autism.">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PLoS One. 3, e3067-e3067 (2008).</li><li>Wohr, M., Houx, B., Schwarting, R. K., Spruijt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+experience+and+context+on+50-kHz+vocalizations+in+rats.">Effects of experience and context on 50-kHz vocalizations in rats.</a> Physiol. Behav. 93, 766-776 (2008).</li><li>Lahvis, G. P., Alleva, E., Scattoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translating+mouse+vocalizations:+prosody+and+frequency+modulation.">Translating mouse vocalizations: prosody and frequency modulation.</a> Genes Brain Behav. 10, 4-16 (2011).</li><li>Brudzynski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Communication+of+adult+rats+by+ultrasonic+vocalization:+biological,+sociobiological,+and+neuroscience+approaches.">Communication of adult rats by ultrasonic vocalization: biological, sociobiological, and neuroscience approaches.</a> ILAR J. 50, 43-50 (2009).</li><li>Johnson, A. M., Ciucci, M. R., Russell, J. A., Hammer, M. J., Connor, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+output+from+the+excised+rat+larynx.">Ultrasonic output from the excised rat larynx.</a> J. Acoust. Soc. Am. 128, EL75-EL79 (2010).</li><li>Fulceri, F., Biagioni, F., Lenzi, P., Falleni, A., Gesi, M., Ruggieri, S., Fornai, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nigrostriatal+damage+with+6-OHDA:+validation+of+routinely+applied+procedures.">Nigrostriatal damage with 6-OHDA: validation of routinely applied procedures.</a> Ann N Y Acad Sci. 1074, 344-348 (2006).</li><li>Ciucci, M. R., Vinney, L., Wahoske, E. J., Connor, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+translational+approach+to+vocalization+deficits+and+neural+recovery+after+behavioral+treatment+in+Parkinson+disease.">A translational approach to vocalization deficits and neural recovery after behavioral treatment in Parkinson disease.</a> J. Commun. Disord. 43, 319-326 (2010).</li><li>Ciucci, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+dopamine+synaptic+activity:+degradation+of+50-kHz+ultrasonic+vocalization+in+rats.">Reduction of dopamine synaptic activity: degradation of 50-kHz ultrasonic vocalization in rats.</a> Behav. Neurosci. 123, 328-336 (2009).</li><li>Wright, J. M., Gourdon, J. C., Clarke, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+call+categories+within+the+rich+repertoire+of+adult+rat+50-kHz+ultrasonic+vocalizations:+effects+of+amphetamine+and+social+context.">Identification of multiple call categories within the rich repertoire of adult rat 50-kHz ultrasonic vocalizations: effects of amphetamine and social context.</a> Psychopharmacology (Berl). 211, 1-13 (2010).</li><li>Burgdorf, J., Kroes, R. A., Beinfeld, M. C., Panksepp, J., Moskal, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncovering+the+molecular+basis+of+positive+affect+using+rough-and-tumble+play+in+rats:+a+role+for+insulin-like+growth+factor+I.">Uncovering the molecular basis of positive affect using rough-and-tumble play in rats: a role for insulin-like growth factor I.</a> Neuroscience. 168, 769-777 (2010).</li><li>W&#246;hr, M., Schwarting, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+communication+in+rats:+effects+of+morphine+and+naloxone+on+vocal+and+behavioral+responses+to+playback+of+50-kHz+vocalizations.">Ultrasonic communication in rats: effects of morphine and naloxone on vocal and behavioral responses to playback of 50-kHz vocalizations.</a> Pharmacol Biochem Behav. 94, 285-295 (2009).</li></ol>

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי מדיניות שירות בריאות הציבור על טיפול השתמש ההומאנית של חיות מעבדה, מדריך NIH לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה, ואת מעשה רווחת בעלי החיים. פרוטוקול השימוש בבעלי חיים אושרה על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת שימוש (IACUC) מאוניברסיטת ויסקונסין במדיסון הספר לרפואה ובריאות הציבור.

קולות Ultrasonic בחולדות להיראות פגיע תהליכי הזדקנות ומחלות, כגון מחלת פרקינסון. אלה קולות קולי לספק מודל התנהגות של פונקציה קולית, כולל גירעונות המלווים שינויים פיזיולוגיים עקב מחלה והזדקנות. בנוסף, שינויים אקוסטיים קולות קולי נמדדים בקלות לכימות. יתר על כן, קולי קולות יכול להיות שונה באמצעות התערבויות התנהגותיות. לכן, קולי קולות עכברוש לספק מודל שימושי ללמוד את ההשפעה של המחלה, ההזדקנות, התערבויות טיפוליות על התנהגות שני מנגנוני הנוירוביולוגי הבסיסית. השיטה שלנו של אימון קולי משתמש גירוי מותנה (קליק) הקשורים חיזוק חיובי (גמול מים או אוכל לטפל). לחץ ואחריו פרס משמש כדי לחזק את קולות של מורכבות גדלה והולכת. אנו מגדירים קולות מורכבים כמו אלה המכילים &quot;סלסול&quot; (תדר מאופנן) רכיב (איור 5 ב) לעומת אלה &quot;שטוח&quot; ולשמור על תדר בודד (איור 5 א). רכיב זה תדר מאופנן מזוהה בקלות על ידי סינוסי המראה שלה. בעוד 50-kHz קולות ניתן סינוסי לחלוטין (איור 5 ב), מקובל המפגש המורכב יותר של 50 קילוהרץ קולות המורכבים בחלקו של רכיב זה תדר מאופנן, וכן גם קפיצות גדולות בתדירות או מרכיב שטוח קצר. אלה קולות מורכבים יותר יכול להיות הפסקות קצרות של פחות מ -10 אלפיות בין רכיבים אלא נחשבים ניקוד בודד. למרות נוסף מפורט תת סיווג של קולות אלה ניתן מקוון, 14 אנו מסווגים את כל 50-kHz קולות המכילות רכיב תדר מאופנן מורכב כדי להפחית את הצורך בסיווג סובייקטיבית באינטרנט ולצמצם את השתנות חיזוק. במעבדה שלך חשוב לבחור כיצד נתונים מסווג ונותחו על פי תכנון מחקר המתאימה לצורך המחקר. ישנם גורמים רבים שיש לקחת בחשבון בעת ​​שימוש בפרוטוקול זה. קודם כל, למרות ההומוגניות הגנטית ועקביות פרוצדורליים, חולדות יש תגובה משתנה לאימונים. חולדות חלק טבעי להשמיע יותר מאחרים, 5 או מונעים על ידי חשיפה יותר נשים מאשר על ידי גמול מזון או מים. אחת הדרכים שאנו אחראים השתנות זו היא על ידי בחינת השינוי פרמטרים אקוסטיים קולות מן ההתחלה חולדות &quot;הפרט הנגע הפוסט שלהם שלאחר האימון קולות. אמנם לא דנו בפרוטוקול זה, יש לנו גם מבחני התנהגות לכמת עניין הנקבה, כגון חביון לעלות. בנוסף, בהתאם לגיל ורמת הפעילות של עכברוש יחיד, גבי חוט עשוי להיות נחוץ על הכלוב הביתה במהלך האימון כדי למנוע בריחה. למרות ההשתנות בודדים, השתמשנו בהצלחה בפרוטוקול זה על מגוון רחב של זנים וגילאים כדי לשפר את קולות יחסית הבסיס לכל חולדה של הפרט. חולדות רגישים שינויים קטנים לכאורה בסביבה, כגון ריחות, טמפרטורה, וכוח אדם. המאמץ צריך להיעשות כדי למנוע ריחניים ומוצרי טיפוח אישי, כגון קרמים, מוצרי שיער, ובשמים. לפני שתנסה הדרכה, אדם חייב להיות נוח באינטראקציה עם וטיפול חולדות. יתר על כן, כל הסתירות אדם או הסביבה עלולים להשפיע על התגובה הניקוד של החולדות. כי חולדות הן לילית, הם צריכים להיות כל הזמן על מחזור אור הפוך, כדי לאפשר הכשרה להתקיים במהלך החלק האפל של מחזור שלהם כאשר הם הפעילים ביותר. אנו להאיר חדר ההדרכה שלנו עם אורות אדומים. בנוסף, אם פרס המים משמש במהלך האימון, חולדות צריך גישה מוגבלת למים. חולדות שלנו הם מים מוגבלת ל 21 שעות לפני האימון. שלוש שעות של חשיפה המים נקבע על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים שלנו השתמש ועדת להיות תקופה לפחות פעם מגבילים שאפשרו מים כדי להיות שימושי חיזוק במחקרים התנהגותיים שלנו מבלי להציג פשרה משמעותית על בריאות בעלי חיים או רווחתם. חולדות מקבלים גישה למים בזמנים אקראיים (10 דקות עד 30 דקות) לאחר האימון, ולאחר מכן יש גישה חופשית למים במשך שלוש שעות במהלך החלק האפל של מחזור אור שלהם. חולדות יש לבדוק כל יום סימנים של התייבשות שקל בכל יום אחר, כדי להבטיח שאין אובדן משמעותי (יותר מ 10%) משקל. מגבלה מזון אינו נחוץ אם באמצעות לטפל מזון כפרס. מטפלת ספציפית חולדות זמינים מסחרית, אבל מצאנו פיסה קטנה של דגני בוקר ממותקים להיות תגמול אפקטיבי. כאמור, חולדות נקבות מיוחמות לתגובה ניקוד גבוה יותר מן הזכרים מאשר אי - מינית נקבות פתוח. על ידי שמירה על מספר גדול של נשים במושבה, קיימת סבירות גבוהה כילפחות נקבה אחת יהיו מיוחמות בכל יום נתון. עם זאת, ייחום ניתן גם המושרה פרמקולוגית על ידי הזרקה תת עורית 10 מיקרוגרם של β-estradiol ב 0.1 סטרילי סמ&quot;ק שמן שומשום 48 שעות לפני האימון ואחריו 500 מיקרוגרם של פרוגסטרון 0.1 סמ&quot;ק שמן שומשום סטרילי 4 שעות לפני אימון חולדות נקבות. בנוסף, חולדות זכרים כי הם תמימים כדי חולדות נקבות חייב להיות מנוסה מינית לפני אימון ווקאלית. מטרה זו מושגת על ידי הצבת חולדה נקבה כי הוא מציג סימנים של פתיחות מינית (מתרוצצות, האוזן לורדוסה נענוע) לכלוב בבית של הזכר עד mounts ו פולט הגבר. זכרים לא יכול לעלות במהלך הפגישות הראשונות והנקבה ניתן להסיר לאחר עניין הזכר מראה לנקבה על ידי רחרוח ו / או לרדוף אחרי הנקבה סביב הכלוב. התנסות מינית נעשית פעם אחת ביום למשך שבועיים. זו תקופת זמן מספקת גם הזדמנות עבור חולדות להרגיל את הניסוי (ים) וחדר הקלטה. מגבלה אחת שיטה זו היא קביעה סובייקטיבית של סוג הניקוד. בנוסף, גורם זה מגביל את המהירות של איסוף נתונים, כמו כל שיחה יש לבחון באופן עצמאי מסווג באופן ידני. בהקשר זה את החשיבות של בעל מדרגים מנוסים אשר הוכשרו באופן עקבי בזיהוי הניקוד. אמינות שניהם התוך והבין rater יש לבחון בתוך המעבדה שלך. לסיכום, קולי קולות במכרסמים משמשים מודלים שונים ללמוד מוח והתנהגות יחסים, כולל מצבים רגשיים, תגמול והתמכרות, ומדינות המחלה, כגון אוטיזם. 6,14-16 זו שיטה חדשה היא דרך ללמוד את המנגנונים הדרכה קולית ממוקדות לטיפול בגירעונות קול הזדקנות מחלת פרקינסון. שיטה זו יש את הפוטנציאל להיות מיושם על מודלים מחלה אחרים המשפיעים תקשורת קול.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th></tr><tr><td> אולטרסאונד Condenser מיקרופון CM16/CMPA </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 40011 </td></tr><tr><td> UltraSoundGate 116Hb </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 41161 </td></tr><tr><td> Avisoft הקלטה </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 10201 </td></tr><tr><td> Avisoft SASLab-Pro </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 10101 </td></tr></tbody></table>

targeted training of ultrasonic vocalizations in aged and parkinsonian rats

גירעונות קוליות סיבוך נפוץ של מחלת פרקינסון הן (PD) והזדקנות: הם יכולים להפחית באופן משמעותי את איכות החיים על ידי השפעה יכולות תקשורת 1, 2 אימון ממוקד (דיבור / טיפול קול) יכול לשפר את הגירעונות קול ספציפי, 3, 4 אף. המנגנון הבסיסי של התערבויות התנהגותיות אינם מובנים היטב. חקירה שיטתית של גירעונות קול טיפול כדאי לשקול הרבה גורמים שקשה לשלוט בבני אדם, כגון גיל, סביבת הבית, בגיל שלאחר תחילת המחלה, חומרת המחלה, ותרופות. השיטה המוצגת כאן משתמשת במודל של בעלי חיים ניקוד המאפשר לימוד שיטתי של כמה הבסיסית הסנסורית מנגנוני השינוי עם הדרכה קולית ממוקדות. קולי הקלטה וניתוח להליכים המצוינים בפרוטוקול זה החלות על כל חקירה של קולות מכרסם קולי. קולי קולות של מכרסמים הם מתעוררים כמודל ערך לחקור את מצעים עצביים של התנהגות. 5-8 שני מכרסם קולות אנושיים לשאת ערך סמיוטי ומיוצרים על ידי שינוי זרימת האוויר egressive עם מועקה בגרון. 9, 10 לפיכך, קולות מכרסמים יכול להיות מודל שימושי ללמוד גירעונות קול בהקשר הסנסורית. בנוסף, מודלים חולדה לאפשר לנו ללמוד את הבסיס הנוירוביולוגי של ההתאוששות מן הגירעונות עם הדרכה ממוקדת. המודל פ&quot;ד אנו משתמשים ארוך אוונס חולדות (צ&#39;ארלס ריבר מעבדות International, Inc) ו להשרות פרקינסון על ידי עירוי חד צדדית של 7 מיקרוגרם של hydroxydopamine-6 ​​(6 OHDA) לתוך הצרור המוח הקדמי המדיאלי הגורמת בינונית עד קשה של ניוון presynaptic נוירונים striatal (לפרטים ראה Ciucci, 2010). 11, 12 עבור דגם ההזדקנות שלנו אנו משתמשים 344/Brown פישר נורבגיה F1 (המכון הלאומי להזדקנות). השיטה העיקרית שלנו קולות לעורר היא לחשוף חולדות זכרים בלתי מנוסים חולדות נקבות פתוח מבחינה מינית. כאשר הזכר הופך מעוניין הנקבה, הנקבה יוסר הזכר ממשיך להשמיע. על ידי קולות מורכבים מתגמל עם מזון או מים, הן את מספר קולות מורכבים שיעור קולות יכול להיות מוגברת (איור 1). מיקרופון קולי רכוב מעל הכלוב בית של הזכר הרשומות קולות. הקלטת מתחילה אחרי הנקבה מוסר לבודד את שיחות גברים. קולות ניתן לצפות בזמן אמת לאימונים או נרשמו ונותחו מקוון. על ידי הקלטה אקוסטית ניתוח קולות לפני ואחרי אימון ווקאלית, ההשפעות של המחלה ושיקום התיפקוד הרגיל עם אימונים ניתן להעריך. מודל זה גם מאפשר לנו להתייחס ציין התנהגותיות (ווקאלי) שיפורים לשינויים במוח ובמערכת neuromuscular.

Watch this Scientific Journal Video about Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats at JoVE.com

Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats

הפרעות קוליות מתיש הזדקנות מחלת פרקינסון. קולות קולי של חולדות, מושפע גם בתנאים אלו, יכול לשמש כדי ללמוד הפרעות אלה קול, מצעים העצבית שלהם, את האופי של התאוששות תפקודית עם התערבות התנהגותית.

אימון ממוקד של קולות Ultrasonic בחולדות ומעלה פרקינסון

Voice deficits are a common complication of both Parkinson disease (PD) and aging; they can significantly diminish quality of life by impacting ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Assessment of Ultrasonic Vocalizations During Drug Self-administration in Rats

הערכת קולות Ultrasonic במהלך והתרופות עצמית הממשל חולדות

Drug self-administration procedures are commonly used to study behavioral and neurochemical changes associated with human drug abuse, addiction and ...

Kinematics and Ground Reaction Force Determination: A Demonstration Quantifying Locomotor Abilities of Young Adult, Middle-aged, and Geriatric Rats

קינמטיקה ואת תגובת קרקע חיל קביעת: הפגנה כימות של תנועה היכולות של מבוגרים צעירים, בגיל העמידה, ועל החולדות הגריאטרי

Behavior, in its broadest definition, can be defined as the motor manifestation of physiologic processes.  As such, all behaviors manifest through the ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

תיוג של פלורסנט מדרדר מאפשר להקלטה ממוקדת חד תאית מיחידת נוירונים שזוהו<em&gt; בvivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

הדמייה תפקודית באמצעות שיבוש Ultrasonic הדם למוח הגדר מנגן משופרת MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

הקרינה ופליטת אור הדמיה של Ca subcellular<sup&gt; 2 +</sup&gt; בבני נוירונים בהיפוקמפוס

Susceptibility to neuron cell death associated to neurodegeneration and ischemia are exceedingly increased in the aged brain but mechanisms responsible ...

Sequential Extraction of Soluble and Insoluble Alpha-Synuclein from Parkinsonian Brains

הפקה רציפה של המסיס ובלתי מסיס אלפא-סינוקלאין ממוח פרקינסון

Alpha-synuclein (&#945;-syn) protein is abundantly expressed mainly within neurons, and exists in a number of different forms - monomers, tetramers, ...

Assessment of Hippocampal Dendritic Complexity in Aged Mice Using the Golgi-Cox Method

הערכת המורכבות בהיפוקמפוס דנדריטי בעכברים בגילאים בשיטת Golgi-Cox

Dendritic spines are the protuberances from the neuronal dendritic shafts that contain&#160; excitatory synapses. The morphological and branching ...

An Objective and Reproducible Test of Olfactory Learning and Discrimination in Mice

מבחן אובייקטיבי, לשחזור של למידה חוש הריח ואפליה בעכברים

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

כריתת למינציה ואת חוט השדרה חלון השרשה בעכבר

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...