Name: whole mount preparation of the adult drosophila ventral nerve cord for giant fiber dye injection
Uploaded: 2011-06-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection at JoVE.com

プロジェクトは、もっぱら著者の責任であり、必ずしも母子保健と人間開発や国立研究所の公式見解を表していないコンテンツをタグ付けするために母子保健と人間開発の国立研究所からの助成金番号R01HD050725によってサポートされていました説明国立衛生研究所。私たちは、原稿とビデオへの入力のためGodenschwegeラボだけでなく、バ​​ーバラSchreaderのメンバーに感謝。

1。腹神経索の解剖 GF充填解剖と染料は、室温で行うことができます。すべての解剖が冷たいな手順については（4℃）生理食塩水は細胞の新陳代謝を遅くして、より長い神経細胞が生き続けるために使用する必要があります。 <ol><li> CO 2の成人のハエ（4日以上）を麻酔またはそれらが固定化されるまで、氷上で冷やします。氷で麻酔すると、より時間がかかり?...

<ol>
	<li>Power, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+thoracico-abdominal+nervous+system+of+an+adult+insect+Drosophila+melanogaster.">The thoracico-abdominal nervous system of an adult insect Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Neurol. 88, 347-409 (1948).</li><li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A., Tanouye, T. A., Phelan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Making+an+escape:+development+and+function+of+the+Drosophila+giant+fibre+system.">Making an escape: development and function of the Drosophila giant fibre system.</a> Semin. Cell Dev. Biol. 17, 31-41 (2006).</li><li>Boerner, J., Duch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Average+shape+standard+atlas+for+the+adult+Drosophila+ventral+nerve+cord.">Average shape standard atlas for the adult Drosophila ventral nerve cord.</a> J. Comp. Neurol. 518, 2437-2455 (2010).</li><li>Gu, H., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+sity.">Cholinergic synaptic transmission in adult Drosophila Kenyon cells in sity.</a> J. Neurosci. 26, 265-272 (2006).</li><li>Boerner, J., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+for+the+Drosophila+ventral+nerve+cord+standard+in+neuronal+circuit+reconstruction+and+in-depth+analysis+of+mutant+morphology.">Application for the Drosophila ventral nerve cord standard in neuronal circuit reconstruction and in-depth analysis of mutant morphology.</a> J. Neurogent. 24, 158-1567 (2010).</li><li>Godenschwege, T. A., Kristiansen, L. V., Uthaman, S. B., Hortsch, M., Murphey, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conderved+role+for+Drosophila+Neuroglian+and+human+L1-CAM+in+central-synapse+formation.">A conderved role for Drosophila Neuroglian and human L1-CAM in central-synapse formation.</a> Curr. Biol. 16, 12-23 (2006).</li><li>Uthaman, S. B., Godenschwege, T. A., Murphey, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mechanism+distinct+from+highwire+for+the+Drosophila+ubiquitin+conjugase+bendless+in+synaptic+growth+and+maturation.">A mechanism distinct from highwire for the Drosophila ubiquitin conjugase bendless in synaptic growth and maturation.</a> J. Neurosci. 28, 8615-8623 (2008).</li><li>Storkebaum, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dominant+mutations+in+the+tyrosyl-tRNA+synthetase+gene+recapitulate+in+Drosophila+features+of+human+Charcot-Marie-Tooth+neuropathy.">Dominant mutations in the tyrosyl-tRNA synthetase gene recapitulate in Drosophila features of human Charcot-Marie-Tooth neuropathy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 11782-11787 (2009).</li><li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+recordings+from+the+Drosophila+giant+fiber+system+(GFS).">Electrophysiological recordings from the Drosophila giant fiber system (GFS).</a> Cold Spring Harb. Protoc. 2010, pdb.prot5453-pdb.prot5453 (2010).</li><li>Augustin, H., Allen, M. J., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+Recordings+from+the+Giant+Fiber+Pathway+of+D.+melanogaster.">Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster.</a> J. Vis. Exp. , (2011).</li></ol>

神経系は、ハエの体からそれを抽出することなく解剖することができます。これは、最初、次の2つの利点が、解剖は神経系へのダメージが少ない、そして第二に、ほとんどの神経は、筋肉や感覚器官に付着したままでいる。解剖を行って、説明されているように、まっすぐ前方に色素標識GFSのためのサンプルを準備します。便利に、GFSにシナプス後ニューロンは、筋肉に付着したままでいる...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬の名前</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント</th></tr><tr><td> Sylgard 184シリコーンエラストマーキット</td><td>ダウコーニング</td><td></td><td></td></tr><tr><td>解剖顕微鏡</td><td> AmScope </td><td> SM - 2TZ </td><td></td></tr><tr><td> Vannasはさみスーパーファイン</td><td>アカデミックインスツルメンツ</td><td> VS1023 </td><td></td></tr><tr><td>デュモン鉗子Dumontstar 55 </td><td>ファイン科学ツール</td><td> 11295〜51 </td><td></td></tr><tr><td>アウステルリッツの昆虫ピン</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 26002〜10 </td><td> Ø 0.1ミリメートル</td></tr><tr><td>ホウケイ酸ガラス電極</td><td>世界の精密機器</td><td> 1B100F - 4 </td><td></td></tr><tr><td> 700C垂直ピペットプラー</td><td>デビッドKopfは楽器</td><td> 700Cモデル</td><td></td></tr><tr><td>ルシファーイエローCH二リチウム塩</td><td>シグマ</td><td> L0259 </td><td> H 2 Oの1％ </td></tr><tr><td>固定ステージ正立顕微鏡とカメラ</td><td>ニコン</td><td> FN - 1＆DS - U2カメラ</td><td></td></tr><tr><td>計画フルーア10Xエア目的</td><td>ニコン</td><td> CFIプランフルーア16ミリメートル10倍、NA 0.3 WD </td><td></td></tr><tr><td>フッ素40X水浸対物</td><td>ニコン</td><td> CFIフルーア40X W NA 0.80 WD 2.0ミリメートル</td><td></td></tr><tr><td> 3D油圧マニピュレーター</td><td>ナリシゲインターナショナル</td><td>モデルMW0 - 3 </td><td></td></tr><tr><td>アンプ</td><td>楽器をはじめ、（株） </td><td>モデル5A </td><td></td></tr></tbody></table>

whole mount preparation of the adult drosophila ventral nerve cord for giant fiber dye injection

ニューロンの軸索と樹枝状形態を分析するために、それはニューロン構造の正確なラベル付けを得るために不可欠です。ない組織の損傷に少しでも標識サンプルを準備するので変異体異常の同定を可能にする、私たちは細胞の形態を分析し、お互いに個々のサンプルを比較することができます。 実証解剖の方法では神経系は成人フライの内側主に残ります。背側を切開して、腹部と胸部が開かれ、ほとんどの内臓のが削除されます。 GFの細胞体と樹状突起を含む脳がそのまま頭に2のまま腹神経索（VNC）と巨大な繊維（GFS）1の大きい軸索を含む子宮頸結合（CVC）の唯一の背側は、公開されています。この準備ではVNCのほとんどの神経はそれらの筋肉に接続されたままにしてください。 解剖の後、蛍光色素を持つ巨大な繊維（GF）の細胞内の充填が実証される。 CVCにGFの軸索は、背面に配置されていますので、微分干渉コントラスト（DIC）光学系と顕微鏡下で容易に可視化することができる。これは、このサイトでは染料とGFの軸索の注入は、VNCの軸索とその端子を含む全体のGFにラベルを付けることができます。ニューロンは、落射蛍光顕微鏡で充填した後、直ちに画像化できるようにGFSの信頼性と強力な染色では、このメソッドの結果。また、蛍光シグナルは高分解能共焦点顕微鏡に適した標準的な免疫組織化学の手順3を使用して拡張することができます。

Watch this Scientific Journal Video about Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection at JoVE.com

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

アン<em&gt; in vivoで</em成人の&gt;解剖<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;腹神経索（VNC）が示されています。この特定の解剖法は、高分解能のイメージングのための蛍光染料と巨大な繊維の神経細胞のその後のラベル付けを可能にするVNCへのダメージが少ない。

成人の全体のマウントの準備ショウジョウバエ</emジャイアント繊維染料注入のための>腹神経索

To analyze the axonal and dendritic morphology of neurons, it is essential to obtain accurate labeling of neuronal structures. Preparing well labeled ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

ホールマウントの胎児神経系の可視化ショウジョウバエ胚

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

神経科学

Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster

Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster

の巨大線維経路からの電気生理学的記録 D.キイロ</em

When startled adult D. melanogaster react by jumping into the air and flying away. In many invertebrate species, including D. melanogaster, the "escape" ...

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

用いて、化合物の生理活性をスクリーニングするためのペアNanoinjectionと電気生理学的アッセイキイロショウジョウバエジャイアントファイバシステム

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

ホールマウントマッスル分析による再現性のあるマウスの坐骨神経クラッシュと再生のその後の評価

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

DiI-Labeling of DRG Neurons to Study Axonal Branching in a Whole Mount Preparation of Mouse Embryonic Spinal Cord

マウス胚の脊髄の全載標本での分岐軸索勉強するDRGニューロンのDII -標識

Here we  present a technique to label the trajectories of small groups of DRG neurons  into the embryonic spinal cord by diffusive staining using the ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

全マウント神経筋接合解析のための トランス対アブドミン筋 の解剖

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

における嗅覚受容ニューロンのホールマウント免疫標識<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;アンテナ

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

アン<em&gt;体外</em筋求心性神経の焼成特性を研究するための&gt;成体マウス筋肉神経の準備

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

Whole Mount Dissection and Immunofluorescence of the Adult Mouse Cochlea

成体マウス蝸牛のホールマウント解剖および免疫蛍光

The organ of Corti, housed in the cochlea of the inner ear, contains mechanosensory hair cells and surrounding supporting cells which are organized in a ...

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

前根刺激のための斜め脊髄スライスの調製

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...

成人の全体のマウントの準備ショウジョウバエ腹神経索