Name: patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip
Uploaded: 2007-10-01T13:21:11
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

<p> इस काम NIH अनुदान EB007278 द्वारा समर्थित किया गया था. </p>

<p class="jove_title"> एक BFC बनाना </p><p class="jove_content"><strong></strong> BFCs एक 4 &quot;सी मास्टर वफ़र पर ढलाई polydimethylsiloxane (PDMS) द्वारा किए गए हैं. </p><p class="jove_step"> एक मास्टर वफ़र करना </p><ol><li> 30 मिनट के लिए 130 सी वेफर्स dehydrating द्वारा प्रारंभ डिग्री सेल्सियस </li><li> एक स्पिन coater पर ?...

<ol>
	<li>Rosenthal, A., Macdonald, A., Voldman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Patterning+Chip+for+Controlling+the+Stem+Cell+Microenvironment.">Cell Patterning Chip for Controlling the Stem Cell Microenvironment.</a> <em style='font-style: italic'>Biomaterials</em>. <b>28</b>, 3208-3216 (2007).</li></ol>

<p> हालांकि प्रोटोकॉल और वीडियो यहाँ दिखाया पैटर्न माउस भ्रूणीय स्टेम कोशिकाओं (mESCs) BFC <sup>एक</sup> का उपयोग कर का वर्णन करने के लिए, BFCs व्यावहारिक रूप से ब्याज की किसी भी कोशिका प्रकार के पैटर्न के लिए इस्तेमाल किया जा सक?...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PDMS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dw Corning</td>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silicon master mould</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue culture dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>35-3001</td>
<td>35 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>3/4" binder clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hexamethyldisiloxane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Shin-Etsu MicroSi</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>SU8-2050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PM acetate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isopropanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BSA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>7.5% Bovine Serum Albumin </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip

<p class="jove_content"> सेल सेल diffusible संकेतन और सेल सेल संपर्क (juxtacrine संकेतन) से मिलकर बातचीत ट्यूमर के विकास, स्टेम सेल भेदभाव, और स्टेम सेल आत्म नवीकरण जैसे कई जैविक प्रक्रियाओं में महत्वपूर्ण हैं. तरीकों का एक नंबर वर्तमान में इन विट्रो में सेल संकेतन मिलाना मौजूद है. Modulating diffusible संकेतन की कुल राशि का एक तरीका संस्कृति के दौरान सेल बोने घनत्व भिन्न है. सेल बोने, वास्तविक रिक्ति सेल सेल और सेल सेल संपर्क की राशि में काफी भिन्नता में इस परिणाम, और स्थानीय पर्यावरण लिख नहीं कर सकते के यादृच्छिक प्रकृति के कारण. Modulating संकेतन सेल के लिए एक अधिक विशिष्ट दृष्टिकोण आणविक inhibitors या आनुवंशिक दृष्टिकोण का उपयोग करने के लिए नीचे विशिष्ट संकेत प्रोटीन दस्तक है, लेकिन इन दोनों तरीकों में से सबसे अच्छा अणुओं के छोटे संख्या से छेड़छाड़ करने के लिए अनुकूल हैं. यहाँ, हम modulating संकेतन सेल सेल है कि एक सब्सट्रेट पर वांछित स्थानों पर कोशिकाओं के विभिन्न संख्या रखकर कोशिकाओं का एक समूह के स्थानीय पर्यावरण modulates एक नया दृष्टिकोण प्रदर्शित करता है. यह विधि एक पूरक कोशिकाओं के बीच स्थानीय diffusible और juxtacrine संकेतन नियंत्रण प्रदान करता है. हमारे विधि जैव फ्लिप चिप (BFC) का उपयोग, एक microfabricated सिलिकॉन चिप microwells, प्रत्येक आकार के सैकड़ों हजारों युक्त या तो एक एकल कक्ष या कक्षों की छोटी संख्या पकड़ बनाता है. हम बस उन्हें कुओं की सरणी पर pipetting और सरणी बंद उतार कोशिकाओं धोने के द्वारा कोशिकाओं के साथ चिप लोड. चिप तो एक सब्सट्रेट पर रूप से फ़्लिप किया है, जिससे कोशिकाओं कुओं और सब्सट्रेट बाहर गिर, उनके patterning को बनाए रखने. बाद कोशिकाओं संलग्न है, चिप (या पर बाईं) हटाया जा सकता है. सेल patterning के लिए इस दृष्टिकोण में अद्वितीय है कि: 1) सब्सट्रेट के रसायन शास्त्र को बदल नहीं करता है किसी भी सब्सट्रेट पर इस तरह कोशिकाओं को पैदा करना और की ओर पलायन की अनुमति, 2) patterning की अनुमति देता है ऊतक संस्कृति polystyrene, कांच, matrigel सहित, और यहां तक ​​कि सेल परतों फीडर, और 3) पारंपरिक microcontact मुद्रण के साथ संगत है, उन द्वीपों के अंदर रखा कोशिकाओं के साथ बाह्य मैट्रिक्स द्वीपों के सृजन की अनुमति है. इस वीडियो में, हम माउस भ्रूण स्टेम कोशिकाओं ऊतक संस्कृति polystyrene पर BFC का उपयोग patterning प्रदर्शित करता है. </p>

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Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

<p class="jove_content">हम एक सब्सट्रेट पर वांछित स्थानों पर कोशिकाओं रखने के लिए एक सरल तरीका प्रदर्शित करता है. यह विधि एक सिलिकॉन सब्सट्रेट कोशिकाओं के साथ भरा microwells युक्त चिप flipping द्वारा कोशिकाओं के पैटर्न. इस पद्धति का एक नया करने के लिए कोशिकाओं के बीच diffusible और juxtacrine संकेतन मिलाना प्रदान करता है.</p>

जैव फ्लिप चिप का प्रयोग भ्रूण स्टेम कोशिकाओं के patterning

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

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