Name: patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip
Uploaded: 2007-10-01T13:21:11
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

<p>この作品は、NIHの助成金EB007278によってサポートされていました。 </p>

<p class="jove_title"> BFCの作成</p><p class="jove_content"><strong></strong> BFCsは4&quot;シリコンマスターウエハ上に成形ポリジメチルシロキサン（PDMS）で作られています。 </p><p class="jove_step">マスターのウェハの作成</p><ol><li> 130℃で30分間Siウェハを脱水することにより開始℃に</li><li>スピンコーター上にウエハを配置、それぞれ、40〜30ミリメートルの機能の高さを得るために30秒のためにウェーハ、300回転/秒の3000から4000回...

<ol>
	<li>Rosenthal, A., Macdonald, A., Voldman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Patterning+Chip+for+Controlling+the+Stem+Cell+Microenvironment.">Cell Patterning Chip for Controlling the Stem Cell Microenvironment.</a> <em style='font-style: italic'>Biomaterials</em>. <b>28</b>, 3208-3216 (2007).</li></ol>

<p>パターンのマウス胚性幹細胞（mESCs）にBFC <sup>1を</sup>使用して記述するここに示されているプロトコルやビデオが、BFCsはパターンに興味のある実質的に任意のセル型を使用することができます。一つ加える必要が唯一の変更は、マイクロウェルの大きさを変更することです。我々の経験で、最高の動作する​​別の細胞型、マイクロウェルの直径と結合されていない細胞の直径よりも大きい10ミクロンに等?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PDMS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dw Corning</td>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silicon master mould</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue culture dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>35-3001</td>
<td>35 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>3/4" binder clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hexamethyldisiloxane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Shin-Etsu MicroSi</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>SU8-2050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PM acetate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isopropanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BSA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>7.5% Bovine Serum Albumin </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip

<p class="jove_content">拡散性シグナル伝達および細胞間接触（juxtacrineシグナリング）で構成された細胞間相互作用は、腫瘍の増殖、幹細胞の分化、および幹細胞の自己複製のような多数の生物学的プロセスにおいて重要である。メソッドの数は現在、in vitroでの細胞内シグナル伝達を調節するために存在します。拡散性シグナル伝達の変調総量の一つの方法は、培養中の細胞の播種密​​度を変化させることです。細胞播種、実際の細胞間の間隔と細胞間接触の量にかなりの変化でこの結果、及び地域の環境を処方することができないのランダムな性質に起因する。変調細胞のシグナル伝達のためのより具体的なアプローチは、特定のシグナル伝達タンパク質をノックダウンする分子阻害剤や遺伝的アプローチを使用することですが、これらのメソッドの両方が最良の分子の数が少ないが操作するのに適しています。ここで、我々は、基板上に所望の位置でセルの異なる数字を配置することで細胞のクラスタのローカル環境を調節する調節する細胞間シグナル伝達への新しいアプローチを示しています。このメソッドは、セル間の局所拡散性とjuxtacrineシグナリングを制御するための補完的な方法を提供します。我々の手法はバイオフリップチップ（BFC）、細胞の単一細胞または小数値のいずれかを保持するためにマイクロウェルの数百から数千、各サイズを含む微細加工シリコンチップを使用しています。我々は、単に井戸の配列にそれらをピペッティングし、配列からアンロードされた細胞を洗浄することにより、細胞をチップにロードする。細胞は彼らのパターニングを維持し、井戸のそして基板上に落ちるそれによってチップは、その後、基板上に反転されます。細胞が接続した後、チップは（または上左）削除することができます。細胞のパターニングへのこのアプローチは、その点でユニークです：1）このように細胞が増殖して移行できるように、基板の化学的性質を変更しないこと、2）任意の基板上にパターン形成を可能にする、組織培養ポリスチレン、ガラス、マトリゲルを含む、とさらにフィーダー細胞層、および3）それらの島々の中に置かれた細胞と細胞外マトリックスの島々の創造を可能にする、従来のマイクロコンタクトプリンティングと互換性があります。このビデオでは、我々はBFCを用いて組織培養ポリスチレン上にマウス胚性幹細胞のパターニングを示す。 </p>

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Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

<p class="jove_content">我々は、基板上に所望の位置にセルを配置するための簡単​​な方法を示しています。このメソッドは、パターン基板上への細胞で満たされたマイクロウェルを含有するシリコーンチップを反転して細胞を。このメソッドは、セル間の拡散性とjuxtacrineシグナリングを変調する新しい方法を提供します。</p>

バイオフリップチップを用いた胚性幹細胞のパターニング

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

Research

JoVE Journal

Biology

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the body suggests that they hold great promise for both ...

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