Name: patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip
Uploaded: 2007-10-01T13:21:11
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

<p> 이 작품은 NIH 부여 EB007278에 의해 지원되었다. </p>

<p class="jove_title"> BFC 만들기 </p><p class="jove_content"><strong></strong> BFCs는 4 &quot;시 마스터 웨이퍼를 통해 성형 polydimethylsiloxane (PDMS)에 의해 만들어집니다. </p><p class="jove_step"> 마스터 웨이퍼 만들기 </p><ol><li> 130 30 분시의 웨이퍼를 dehydrating부터 시작 ° C. </li><li> 스핀 - coater에서 웨이퍼를 놓고, 각각 40~30밀리미터의 기능을 높이를 얻을 수 30 s에 대한 3000-4000 RPM 300 RPM / s에서 램프, 웨이퍼에 SU8 - 2050 (Microchem)을 붓고, 그리?...

<ol>
	<li>Rosenthal, A., Macdonald, A., Voldman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Patterning+Chip+for+Controlling+the+Stem+Cell+Microenvironment.">Cell Patterning Chip for Controlling the Stem Cell Microenvironment.</a> <em style='font-style: italic'>Biomaterials</em>. <b>28</b>, 3208-3216 (2007).</li></ol>

<p> 여기에 나와있는 프로토콜 및 비디오 패턴 마우스 배아 줄기 세포 (mESCs)에 BFC <sup>1을</sup> 사용 설명하지만, BFCs는 패턴의 관심 실질적으로 모든 세포 유형을 사용할 수 있습니다. 하나는해야 수있는 유일한 변화는 microwells의 크기를 변경하는 것입니다. 우리의 경험에서 가장 잘 작동 다른 세포 유형, microwell 직경과 무소속의 세포 직경보다 10 미크론와 같은 높이의 패턴을 하나의 세포로 BFC를 사용할 수 있습니다....

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PDMS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dw Corning</td>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silicon master mould</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue culture dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>35-3001</td>
<td>35 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>3/4" binder clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hexamethyldisiloxane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Shin-Etsu MicroSi</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>SU8-2050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PM acetate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isopropanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BSA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>7.5% Bovine Serum Albumin </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip

<p class="jove_content"> diffusible 신호와 세포 세포 접촉 (juxtacrine 신호)의 구성 세포 - 세포 상호 작용은 종양 성장, 줄기 세포 분화와 줄기 세포 자체 재생과 같은 다양한 생물 학적 과정에 중요합니다. 방법 숫자는 현재 체외에서 세포 신호를 변조하기 위해 존재합니다. diffusible 신호의 modulating 총액의 한 가지 방법은 문화 중에 세포 시딩 밀도를 변경할 수 있습니다. 셀 심는 실제 셀 - 셀 간격 및 셀 셀 문의 금액에 상당한 차이이 결과와 지역 환경을 처방할 수의 무작위 특성으로 인해. modulating 세포 신호에 대한보다 구체적인 접근 방식은 특정 신호 단백질을 노크 분자 억제제 또는 유전자 접근 방법을 사용하는 것입니다하지만, 이러한 방법 모두는 최고의 분자 작은 숫자를 조작하는 데 적합합니다. 여기, 우리는 기판에 원하는 장소에서 세포의 서로 다른 숫자를 배치하여 세포의 클러스터의 로컬 환경을 modulates modulating 세포 세포 신호 전달에 대한 새로운 접근 방식을 보여줍니다. 이 방법은 세포 사이의 지역 diffusible 및 juxtacrine 신호를 제어하는​​ 보완적인 방법을 제공합니다. 우리의 방법은 바이오 플립 칩 (BFC)의 사용, 단일 셀 또는 셀 작은 숫자 중 하나를 잡아 microwells, 각 크기의 수백 - 투 - 수천을 포함하는 microfabricated 실리콘 칩을 수 있습니다. 우리는 단순히 우물의 배열에 그들을 pipetting하고 배열에서 내렸어요 세포를 세척하여 세포와 칩로드합니다. 세포들이 patterning을 유지, 우물과 기판에 빠질 의하여이 칩은 다음, 기판에 뒤집혀 있습니다. 세포가 첨부되면 칩 (또는 왼쪽) 제거할 수 있습니다. 세포 patterning이 방법은 독특한 것을에 : 1) 따라서 세포가 세포 분열 따위에 의해 번식하고 마이 그 레이션 수 있도록 기판의 화학을 변경하지 않고 조직 문화 폴리스티렌, 유리, matrigel 포함한 모든 기판에 patterning이 가능 2), 그리고 심지어 피더 세포 레이어를하며, 3) 그 제도 안에 세포와 세포외 기질 제도의 창조를 허용 전통 microcontact 인쇄와 호환됩니다. 이 비디오에서는, 우리는 BFC를 사용하여 조직 문화의 폴리스티렌에 마우스 배아 줄기 세포의 patterning을 보여줍니다. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

<p class="jove_content">우리는 기판에 원하는 장소에서 세포를 삽입하기위한 간단한 방법을 보여줍니다. 이 방법은 패턴을 기판에 전지 가득 microwells를 포함하는 실리콘 칩을 틀지하여 세포를. 이 방법은 세포 사이의 diffusible 및 juxtacrine 신호를 조절하는 새로운 방법을 제공합니다.</p>

바이오 플립 칩을 사용하여 배아 줄기 세포의 Patterning

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

Research

JoVE Journal

Biology

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

인간의 배아 줄기 (ES) 세포의 전파

연구

생물학

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Murine 배아 줄기 세포로부터 조혈 줄기 세포의 유도

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

CD4 + HIV에 대한 일회용 Microfluidic 칩을 사용하여 T - 림프구 캡처

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

바이오 - 래드 총 RNA 키트를 사용 Neuroprecursor 셀에서 RNA 추출

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Immunosurgery에 의해 인간 배아 줄기 세포의 유도

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

인간 배아 줄기 세포에서 염색질의 Immunoprecipitation

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem (mES) Cells Using the Hanging Drop Method

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method

공중 드롭 방법을 사용하여 마우스 배아 줄기 (MES) 세포의 체외 차별에

Stem cells have the remarkable potential to develop into many different cell types. When a stem cell divides, each new cell has the potential to either ...

Culture and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells  

인간 배아 줄기 세포의 문화 및 유지 관리

Human embryonic stem (hES) cells must be monitored and cared for in order to maintain healthy, undifferentiated cultures. At minimum, the cultures must be ...

Freezing and Thawing Human Embryonic Stem Cells

인간 배아 줄기 세포를 동결 융해

Since James Thomson et al developed a technique in 1998 to isolate and grow hES in culture, freezing cells for later use and thawing and expanding cells ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

절연 및 마우스 배아 새싹 세포의 유도

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...