Name: patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip
Uploaded: 2007-10-01T13:21:11
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

<p> Эта работа была поддержана NIH грант EB007278. </p>

<p class="jove_title"> Создание BFC </p><p class="jove_content"><strong></strong> BFCs изготавливаются методом литья полидиметилсилоксан (PDMS) над 4 &quot;пластин мастер Si. </p><p class="jove_step"> Создание мастер пластин </p><ol><li> Начните с обезвоживания Si пластин в течение 30 мин при температуре 130 ° C. </li><li> Место пластины на спин-для нанесения покрыт...

<ol>
	<li>Rosenthal, A., Macdonald, A., Voldman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Patterning+Chip+for+Controlling+the+Stem+Cell+Microenvironment.">Cell Patterning Chip for Controlling the Stem Cell Microenvironment.</a> <em style='font-style: italic'>Biomaterials</em>. <b>28</b>, 3208-3216 (2007).</li></ol>

<p> Хотя протокол и видео показано здесь описывать использованием BFC с <sup>1</sup> по шаблону мышиных эмбриональных стволовых клеток (mESCs), BFCs могут быть использованы для картины практически любой тип клеток, представляющих интерес. Единственное изменение, один, возможно, придется сделать это, чтобы измен?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PDMS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dw Corning</td>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silicon master mould</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue culture dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>35-3001</td>
<td>35 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>3/4" binder clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hexamethyldisiloxane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Shin-Etsu MicroSi</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>SU8-2050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PM acetate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isopropanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BSA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>7.5% Bovine Serum Albumin </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip

<p class="jove_content"> Межклеточных взаимодействий, состоящий из диффундирующие сигнализации и межклеточных контактов (juxtacrine сигнализации) играют важную роль в многочисленных биологических процессов, таких как рост опухолей, дифференциация стволовых клеток и стволовых клеток самообновлению. Число методов в настоящее время существуют для модуляции клеточной сигнализации в пробирке. Один из методов модуляции общую сумму диффундирующие сигнализация варьировать плотность клеток во время посева культуры. Из-за случайного характера клеточных посева, это приводит к значительному изменению фактического межклеточных расстояние и количество межклеточных контактов и не может предписать местным условиям. Более конкретный подход для режима сигнализации ячейки использовать молекулярные ингибиторы или генетические подходы, чтобы сбить конкретных сигнальных белков, но оба эти методы лучше всего подходят для манипулирования небольшое количество молекул. Здесь мы демонстрируем новый подход к модуляции межклеточной сигнализации, который модулирует локального окружения кластера клеток путем размещения разного числа клеток в нужное место на подложке. Этот метод обеспечивает дополнительный способ управлять местной диффузии и juxtacrine сигналов между клетками. Наш метод позволяет использовать Био Flip Chip (BFC), microfabricated силиконовые чип, содержащий сотни до тысячи лунки, каждый размером провести ни одну ячейку или небольшого числа клеток. Мы загружаем чип с клетками, просто с помощью пипетки их на массиве скважин и стиральные выгружен клетки от массива. Чип затем перевернуть на подложку, в результате чего клетки выходят из колодцев и на подложку, поддерживая их кучность стрельбы. После клетки прилагается, чип может быть удален (или левой далее). Такой подход к ячейке кучность уникален тем, что: 1) не меняет химию подложки, тем самым позволяя клеткам размножаться и мигрировать, 2) позволяет структурирование на любую подложку, в том числе ткани культуры полистирола, стекла, Матригель, и даже фидерных слоев клеток, и 3) совместим с традиционной печати микроконтактной, позволяя создавать внеклеточной матрицы с острова клетки помещаются внутри этих островах. В этом видео, мы демонстрируем структурирование мышиных эмбриональных стволовых клеток на ткани культуры полистирола использованием BFC. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

<p class="jove_content">Мы демонстрируем простой метод для размещения клеток в нужное место на подложке. Этот метод модели клетки, щелкая силиконовых чипов содержащие лунки заполнены клеток на подложке. Этот метод обеспечивает новый способ модуляции диффузии и juxtacrine сигналов между клетками.</p>

Структурирование эмбриональных стволовых клеток Использование Био Flip Chip

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

Research

JoVE Journal

Biology

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

Распространение человеческих эмбриональных стволовых (ЭС) клеток

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Вывод гемопоэтических стволовых клеток мышей эмбриональных стволовых клеток

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

CD4 + T-лимфоцитов Захват Использование одноразовых микрофлюидный чип на ВИЧ

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

РНК Извлечение из Neuroprecursor ячеек с использованием Bio-Rad Всего РНК Kit

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Вывод человеческих эмбриональных стволовых клеток на применение специфических иммунных сывороток в хирургии

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

Хроматин Иммунопреципитация из человеческих эмбриональных стволовых клеток

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem (mES) Cells Using the Hanging Drop Method

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method

В пробирке Дифференциация Мышь эмбриональных стволовых (MES) ячеек с использованием висячей капли Метод

Stem cells have the remarkable potential to develop into many different cell types. When a stem cell divides, each new cell has the potential to either ...

Culture and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells  

Культура и поддержание человеческих эмбриональных стволовых клеток

Human embryonic stem (hES) cells must be monitored and cared for in order to maintain healthy, undifferentiated cultures. At minimum, the cultures must be ...

Freezing and Thawing Human Embryonic Stem Cells

Замораживание и размораживание человеческих эмбриональных стволовых клеток

Since James Thomson et al developed a technique in 1998 to isolate and grow hES in culture, freezing cells for later use and thawing and expanding cells ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Выделение и Вывод мышиных эмбриональных зародышевых клеток

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...