Name: patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip
Uploaded: 2007-10-01T13:21:11
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

<p> Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüsü, hibe EB007278 tarafından desteklenen oldu. </p>

<p class="jove_title"> BFC yapma </p><p class="jove_content"><strong></strong> BFCs 4 &quot;Si ana gofret üzerinde kalıp polidimetilsiloksan (PDMS) tarafından yapılır. </p><p class="jove_step"> Bir ana gofret yapma </p><ol><li> 130 30 dakika Si gofret dehydrating başlayın ° C </li><li> Bir spin-lak gofret koyun, sırasıyla, 40-30 mm özelliği yükseklikleri verim s için 30 300 dev / s 3000-4000 rpm rampası, gofret üzerine SU8-2050 (Microchem) dökün ve spin. </li><li> Iplik sonra, 65 ° C ocak gofret, hemen 95 ° C &#39;de 5-6 dak...

<ol>
	<li>Rosenthal, A., Macdonald, A., Voldman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Patterning+Chip+for+Controlling+the+Stem+Cell+Microenvironment.">Cell Patterning Chip for Controlling the Stem Cell Microenvironment.</a> <em style='font-style: italic'>Biomaterials</em>. <b>28</b>, 3208-3216 (2007).</li></ol>

<p> Burada gösterilen protokol ve video desen fare embriyonik kök hücreleri (mESCs) BFC <sup>1</sup> kullanarak tarif olmasına rağmen, BFCs desen ilgi pratikte herhangi bir hücre tipi için kullanılabilir . Biri yapmak gerekebilir tek değişiklik, mikro oyukların boyutunu değiştirmek için. Bizim tecrübelerimize göre en iyi sonucu verir desen tek hücre başka bir hücre tipi, kuyu çapı ve unattached hücre çapı 10 mikrondan daha büyük eşit yükseklikte BFC kullanmak. </p><p> BFCs protokolünde önemli değişiklikler olmada...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PDMS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dw Corning</td>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silicon master mould</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue culture dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>35-3001</td>
<td>35 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>3/4" binder clips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>hexamethyldisiloxane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Shin-Etsu MicroSi</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>SU8-2050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PM acetate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isopropanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BSA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>7.5% Bovine Serum Albumin </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

patterning of embryonic stem cells using the bio flip chip

<p class="jove_content"> Difüze sinyalizasyonu ve hücre-hücre teması (juxtacrine sinyalizasyon) oluşan hücre-hücre etkileşimleri, tümör büyümesini, kök hücre farklılaşması ve kök hücre kendini yenileme gibi çok sayıda biyolojik süreçlerde önemli. Yöntemler bir dizi in vitro hücre sinyal modüle var. Difüze sinyal modüle toplam miktarın bir yöntem kültür sırasında hücre ekim yoğunluğu değişebilir. Hücre tohumlama, bu gerçek, hücre-hücre aralığı ve hücre-hücre teması miktarı önemli farklılıklar sonuçları ve yerel çevre reçete rasgele doğası nedeniyle. Modüle hücre sinyal iletimi için daha özel bir yaklaşım özel sinyalleme proteinleri yıkmak için moleküler inhibitörleri ya da genetik yaklaşımlar kullanmak, ancak bu yöntemlerin her ikisinin en iyi moleküllerin az sayıda işlemek için uygundur. Burada, bir substrat üzerindeki istenilen noktada farklı hücre koyarak hücrelerden oluşan bir küme yerel çevre modüle modüle hücre-hücre sinyalleşme için yeni bir yaklaşım göstermektedir. Bu yöntem, hücreler arasındaki yerel yayılabilir ve juxtacrine sinyalizasyon kontrol etmek için birbirini tamamlayıcı bir şekilde sağlar. Bizim metodumuz Bio Flip-Chip (BFC) kullanımı, tek bir hücrenin veya hücre az sayıda tutmak için mikro oyukların, her büyüklükte yüzlerce-binlerce içeren bir microfabricated silikon çip yapar. Biz sadece dizi kuyu üzerine pipetleme ve dizi kapalı boş hücreleri yıkama hücreleri ile yonga yükleyin. Hücreleri desenlendirme bakımı, kuyuların ve yüzey üzerine dökülür sayede çip, sonra bir yüzey üzerine çevrilmiş. Hücreleri bağlı sonra, çip (veya sol) silinebilir. Bu yaklaşım, hücre desenlendirme benzersiz olduğunu: 1) böylece hücreleri çoğalırlar ve geçiş için izin, yüzey kimyası değiştirmez;, doku kültürü polistren, cam, matrigel de dahil olmak üzere, herhangi bir yüzey üzerine desenlendirme sağlar 2) ve Hatta besleyici hücre tabakaları ve 3) Bu adaların içine yerleştirilen hücreler ile ekstraselüler matriks adalar oluşturmaya olanak sağlayarak, geleneksel microcontact baskı ile uyumludur. Bu video, BFC kullanarak, doku kültürü polistiren üzerine fare embriyonik kök hücreleri desenlendirme göstermektedir. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip at JoVE.com

Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

<p class="jove_content">Biz, bir substrat üzerindeki istenilen noktada hücre yerleştirmek için basit bir yöntem ortaya koymaktadır. Bu yöntem desen hücreleri yüzeye hücreleri ile dolu mikro oyukların içeren bir silikon çip saygısız. Bu yöntem yayılabilir ve juxtacrine hücreleri arasındaki sinyal modüle etmek için yeni bir yol sağlar.</p>

Bio Flip-Chip kullanarak Embriyonik Kök Hücreler, Desenlendirme

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

Research

JoVE Journal

Biology

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

İnsan Embriyonik Kök Hücre (ES) yayılması

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Murin Embriyonik Kök Hücre Hematopoetik Kök Hücre türetilmesi

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

CD4 + T-Lenfosit Yakalama HIV için Disposable mikroakışkan Chip

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

Bio-Rad Total RNA Kiti Kullanarak Neuroprecursor Hücreler RNA Ekstraksiyon

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Immunosurgery İnsan Embriyonik Kök Hücreleri türetilmesi

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

İnsan Embriyonik Kök Hücre Kromatin Immunoprecipitation

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem (mES) Cells Using the Hanging Drop Method

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method

Asma Bırak Yöntemiyle Fare Embriyonik Kök (MES) Hücreler in vitro Farklılaşma

Stem cells have the remarkable potential to develop into many different cell types. When a stem cell divides, each new cell has the potential to either ...

Culture and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells  

İnsan Embriyonik Kök Hücre Kültürü ve Bakım

Human embryonic stem (hES) cells must be monitored and cared for in order to maintain healthy, undifferentiated cultures. At minimum, the cultures must be ...

Freezing and Thawing Human Embryonic Stem Cells

İnsan Embriyonik Kök Hücreler Donma ve Çözülme

Since James Thomson et al developed a technique in 1998 to isolate and grow hES in culture, freezing cells for later use and thawing and expanding cells ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Fare Embriyonik Germinal Hücreleri İzolasyon ve türetilmesi

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...