Name: mouse eye enucleation for remote high-throughput phenotyping
Uploaded: 2011-11-19T14:00:00
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Bartly J. Mondino MD, 줄스 스타 인 안구 연구소, UCLA의 이사;, 그리고 라미 네즈 - 솔리스, 재키 선배 화이트와 Sanger 연구소, 웰컴 트러스트 게놈 캠퍼스에서 쟌 Estabel 실명 방지를위한 연구. 이 연구는 안과 및 Visual 연구에서 동물의 사용에 대한 ARVO 보호 정책을 준수합니다.

1. 무딘 절개 : 고정되지 않은 표본에서 마우스 눈의 핵의 제거 <ol><li> 노출과 뒤쪽 세계 (안구) 표면에 대한 액세스를 개선하기 위해 눈꺼풀를 분열. </li><li> 궤도의 (이하) 세계 (눈 소켓) 뒤에 곡선 드레스 forcep를 놓습니다. Mahajan Sharptip 드레싱 forcep은 (재료 및 시약 표 참조)이 단계를 쉽게하기 위해 뾰족한 팁을 사용자 정의 악기입니다. </li><li> forcep을 닫고 세계를 쥐어 피하려면 조심하면서 전 ?...

<ol>
	<li>Song, B. J., Tsang, S. H., Lin, C. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+retinal+degeneration+and+targets+for+gene+therapy.">Genetic models of retinal degeneration and targets for gene therapy.</a> Gene Ther. Mol. Biol. 11, 229-262 (2007).</li><li>Mahajan, V. B., Mondino, B. J., Tsang, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+Mouse+Eye+Phenomics+System.">A high-throughput Mouse Eye Phenomics System.</a> Cold Spring Harbor Laboratories, Mouse Genetics Meeting. , (2010).</li><li>Smith, R. S., John, S. W. M., Nishina, P. M., Sundberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In Research Methods For Mutant Mice. , (2002).</li><li>Chang, B., Hawes, N. L., Hurd, R. E., Davisson, M. T., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+degeneration+mutants+in+the+mouse.">Retinal degeneration mutants in the mouse.</a> Vision Res. 42, 517-525 (2002).</li><li>Anderson, M. G., Smith, R. S., Hawes, N. L., Zabaleta, A., Chang, B., Wiggs, J. L., John, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+genes+encoding+melanosomal+proteins+cause+pigmentary+glaucoma+in+DBA/2J+mice.">Mutations in genes encoding melanosomal proteins cause pigmentary glaucoma in DBA/2J mice.</a> Nat. Genet. 30, 81-85 (2002).</li><li>Hawes, N. L., Smith, R. S., Chang, B., Davisson, M., Heckenlively, J. R., John, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+fundus+photography+and+angiography:+a+catalogue+of+normal+and+mutant+phenotypes.">Mouse fundus photography and angiography: a catalogue of normal and mutant phenotypes.</a> Mol. Vis. 5, 22-22 (1999).</li><li>Won, J., Shi, L. Y., Hicks, W., Wang, J., Hurd, R., Naggert, J. K., Chang, B., Nishina, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+resources+for+vision+research.">Mouse model resources for vision research.</a> J. Ophthalmol. 2011, 391384-391384 (2011).</li><li>Pinto, L. H., Vitaterna, M. H., Siepka, S. M., Shimomura, K., Lumayag, S., Baker, M., Fenner, D., Mullins, R. F., Sheffield, V. C., Stone, E. M., Heffron, E., Takahashi, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+from+screening+over+9000+mutation-bearing+mice+for+defects+in+the+electroretinogram+and+appearance+of+the+fundus.">Results from screening over 9000 mutation-bearing mice for defects in the electroretinogram and appearance of the fundus.</a> Vision. Res. 44, 3335-3345 (2004).</li><li>Heckenlively, J. R., Winston, J. V., Roderick, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+mouse+retinal+degenerations.+I.+Correlation+of+indirect+ophthalmoscopy,+electroretinograms,+and+histology.">Screening for mouse retinal degenerations. I. Correlation of indirect ophthalmoscopy, electroretinograms, and histology.</a> Doc. Ophthalmol. 71, 229-239 (1989).</li><li>Tsang, S. H., Gouras, P., Yamashita, C. K., Kjeldbye, H., Fisher, J., Farber, D. B., Goff, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+degeneration+in+mice+lacking+the+gamma+subunit+of+the+rod+cGMP+phosphodiesterase.">Retinal degeneration in mice lacking the gamma subunit of the rod cGMP phosphodiesterase.</a> Science. 272, 1026-1029 (1996).</li><li>Tsang, S. H., Woodruff, M. L., Jun, L., Mahajan, V., Yamashita, C. K., Pedersen, R., Lin, C. S., Goff, S. P., Rosenberg, T., Larsen, M., Farber, D. B., Nusinowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+carrying+the+H258N+mutation+in+the+gene+encoding+the+beta-subunit+of+phosphodiesterase-6+(PDE6B)+provide+a+model+for+human+congenital+stationary+night+blindness.">Transgenic mice carrying the H258N mutation in the gene encoding the beta-subunit of phosphodiesterase-6 (PDE6B) provide a model for human congenital stationary night blindness.</a> Hum. Mutat. 28, 243-254 (2007).</li></ol>

대부분의 유전자 변형 마우스는 눈을 검사하지 않는 실험실에 존재합니다. 우리 비디오 기술은 눈 작은 경험이있는 실험실에서 조직 획득을 최적화 할 수 원격 수술 기술 이전을위한 간단한 표준화 된 방법을 보여줍니다. 이 비디오 기술은 의미있는 비교 phenotypic와 분자 연구를 방지 비 표준화 조직 수집 및 고정 방법에 의한 전문 사이트 제한된 수의를 사용하는 것입니다 높은 처리량 phenotyping에...

<table border="1"><tbody><tr><th> 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 코멘트 </th></tr><tr><td> 구부러진 드레싱 Forcep </td><td> Storz Ophthalmics </td><td> E1408 </td><td></td></tr><tr><td> Mahajan Sharptip 드레싱 forcep </td><td> Storz Ophthalmics </td><td> E1406 (REF SP7-64520) </td><td></td></tr><tr><td> 곡선 Westcott의 가위 </td><td> Storz Ophthalmics </td><td> E3321 WH </td><td></td></tr><tr><td> 15 ° BD 비버 Microsurgical 블레이드 </td><td> Becton - 디킨슨 </td><td> 374881 </td><td></td></tr><tr><td> 0.22 미세 Castroviejo Suturing의 포셉 </td><td> Storz Ophthalmics </td><td> E1805 </td><td></td></tr><tr><td> 0.12 Colibri 포셉 </td><td> Storz Ophthalmics </td><td> 132분의 2 </td><td></td></tr><tr><td> 30 게이지 바늘 </td><td> Becton - 디킨슨 </td><td> 305128 </td><td></td></tr><tr><td> 바이오 해저드 메일 서버 </td><td> 어부 </td><td> 03-523-4 </td><td></td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> 어부 </td><td> 13-374-10 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 섬광 튜브 </td><td> 휘튼 </td><td> 4500413033 </td><td></td></tr><tr><td> PBS, pH를 7.4 </td><td> Invitrogen </td><td> 70011-044 </td><td></td></tr><tr><td> 16 % Paraformaldehyde </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 15,700 </td><td></td></tr><tr><td> 0.1M 나트륨 인산염 버퍼에 2.5 %의 Paraformaldehyde / 2.5 %의 글 루타 알데히드 </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 15700 및 16300 </td><td> 실험실에서 혼합 </td></tr><tr><td> 50 % 글 루타 알데히드 </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 16,300 </td><td></td></tr><tr><td> 0.25 % Formvar </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 15,810 </td><td></td></tr><tr><td> 순경슬롯 그리드 당 </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> M2010-CR </td><td></td></tr><tr><td> 4 % 오스뮴의 Tetroxide </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 19,140 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 SOD3 항체 </td><td> Abcam </td><td> Ab21974 </td><td></td></tr><tr><td> 염소 안티 - 토끼 알렉사 형석 488 </td><td> Invitrogen </td><td> A11070 </td><td></td></tr><tr><td> Spurr의 삽입 수지 </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 14,300 </td><td></td></tr></tbody></table>

mouse eye enucleation for remote high-throughput phenotyping

마우스 눈은 인간의 안과 질환의 병진 연구의 중요한 유전 모델입니다. 이러한 황반 변성, photoreceptor 변성, 백내장, 녹내장, retinoblastoma, 그리고 당뇨병 성 망막증과 같은 인간에 실명을 야기하는 안구 질환을 치료는 1-5 대부분의 유전자 변형과 녹아웃 마우스가 아닌 안과 질환을 연구하기 위해 실험실에 의해 생성되었습니다. 유전자 변형 마우스에 recapitulated하지만, 한 장기 시스템 사이의 유전 절약은 동일한 유전자의 많은도 안구 개발과 질병에 역할을 할 수 있습니다 제안합니다. 따라서,이 마우스는 눈에 새로운 유전자형 - 표현형의 상관 관계를 발견하기위한 중요한 자원을 나타냅니다. 이 마우스는 전 세계에 흩어져 있기 때문에, 취득, 유지 관리 및 효율적 비용 효율적인 방법으로 표현형을하기가 어렵습니다. 따라서, 대부분의 높은 처리량 안과 phenotyping 화면은 라이브 쥐에 눈을 검토하기 위해 안과 전문 현장에서 필요로 몇 가지 위치로 제한됩니다. 6-9는 우리 연구실에서 개발 한 대체 접근 방식은 유전자 변형 마우스 눈 크고 작은 규모의 설문 조사에서 사용할 수있는 원격 조직 - 취득하는 방법입니다. 비디오 기반의 수술 기술 이전, 조직 고정 및 배송을위한 표준화 된 절차는 실험실 돌연변이 동물로부터 전체 눈을 수집하고 분자 및 형태학 phenotyping에 보내 할 수 있습니다. 이 비디오 문서에서는, 우리는 원격 phenotyping 분석을 위해 떼어 낸 및 재관류 모두 고정 마우스 눈을 명백히하다하고 전송하는 기술을 제시한다.

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Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping

분해 기술은 높은 처리량 화면에서 phenotyping을 수행 할 조직 고정에 대한 마우스 눈의 핵의 제거를 보여줍니다.

원격 높은 처리량 Phenotyping에 마우스 눈 핵의 제거

The mouse eye is an important genetic model for the translational study of human ophthalmic disease. Blinding diseases in humans, such as macular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics

단백질 치료제 제조 셀 라인의 개발을위한 높은 처리량 자동 플랫폼

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연구

의학

A Mouse Model of the Cornea Pocket Assay for Angiogenesis Study

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A normal cornea is clear of vascular tissues. However, blood vessels can be induced to grow and survive in the cornea when potent angiogenic factors are ...

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

의식 억제 마우스에 인슈린 과다 - euglycemic 클램프

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Remote Magnetic Navigation for Accurate, Real-time Catheter Positioning and Ablation in Cardiac Electrophysiology Procedures

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High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

급성 이식 - 대 - 호스트 질병의 생체의 유효성을 검사에 대한 높은 처리량 순차적 엘리사

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

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신경 보호 전략에 대한 치료 요인의 납품을위한 설계 성인 줄기 세포의 높은 처리량 특성

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Fluorescent Dye Labeling of Erythrocytes and Leukocytes for Studying the Flow Dynamics in Mouse Retinal Circulation

마우스 망막 순환에서 유동 역학을 연구하기위한 적혈구 및 백혈구의 형광 염료 표지

The retinal and choroidal blood flow dynamics may provide insight into the pathophysiology and sequelae of various ocular diseases, such as glaucoma, ...

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate (HoLEP).

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate HoLEP.

양성 전립선 비 대 증에 대 한 수술 치료: Holmium 레이저 Enucleation (HoLEP) 전립선의.

Benign prostatic hyperplasia (BPH) commonly occurs among elderly males. The condition causes symptoms in the lower urinary tract, thereby reducing the ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

마우스 모델 Rubeosis Iridis의 아이리스 Neovascularization 펑크 유발

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

High-throughput Nitrobenzoxadiazole-labeled Cholesterol Efflux Assay

높은 처리량 Nitrobenzoxadiazole 표시 된 콜레스테롤 경과 분석 결과

Atherosclerosis leads to cardiovascular disease (CVD). It is still unclear whether cholesterol-HDL (cHDL) concentration plays a causal role in ...