Name: mouse eye enucleation for remote high-throughput phenotyping
Uploaded: 2011-11-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping at JoVE.com

Bartly J. Mondino MD, Jules Stein Göz Enstitüsü, UCLA Direktörü ve Ramiro Ramirez-Solis, Jacqui Beyaz ve Sanger Enstitüsü, Wellcome Trust Genom Kampüsü&#39;nde Jeanne Estabel Körlük Engellenir Araştırma. Bu araştırma Oftalmik ve Görsel Araştırma Hayvanları Kullanım ARVO Bildirimi ile uyumludur.

1. Künt diseksiyon: sabitlenmemiş örneklerinde fare göz Enükleasyon <ol><li> Maruz kalma ve posterior dünya (gözün) yüzey erişimi geliştirmek için göz kapaklarını açarak çekin. </li><li> Yörüngede (altında) dünya (göz çukuru) arkasında eğik pansuman forcep yerleştirin. Mahajan Sharptip pansuman forcep (malzeme ve reaktiflerin tabloya bakınız) bu adımı kolaylaştırmak için sivri uçlu özel bir araçtır. </li><li> Forcep kapatın ve dünya sıkma önlemek için dikkatli olmak ise dünya...

<ol>
	<li>Song, B. J., Tsang, S. H., Lin, C. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+retinal+degeneration+and+targets+for+gene+therapy.">Genetic models of retinal degeneration and targets for gene therapy.</a> Gene Ther. Mol. Biol. 11, 229-262 (2007).</li><li>Mahajan, V. B., Mondino, B. J., Tsang, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+Mouse+Eye+Phenomics+System.">A high-throughput Mouse Eye Phenomics System.</a> Cold Spring Harbor Laboratories, Mouse Genetics Meeting. , (2010).</li><li>Smith, R. S., John, S. W. M., Nishina, P. M., Sundberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In Research Methods For Mutant Mice. , (2002).</li><li>Chang, B., Hawes, N. L., Hurd, R. E., Davisson, M. T., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+degeneration+mutants+in+the+mouse.">Retinal degeneration mutants in the mouse.</a> Vision Res. 42, 517-525 (2002).</li><li>Anderson, M. G., Smith, R. S., Hawes, N. L., Zabaleta, A., Chang, B., Wiggs, J. L., John, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+genes+encoding+melanosomal+proteins+cause+pigmentary+glaucoma+in+DBA/2J+mice.">Mutations in genes encoding melanosomal proteins cause pigmentary glaucoma in DBA/2J mice.</a> Nat. Genet. 30, 81-85 (2002).</li><li>Hawes, N. L., Smith, R. S., Chang, B., Davisson, M., Heckenlively, J. R., John, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+fundus+photography+and+angiography:+a+catalogue+of+normal+and+mutant+phenotypes.">Mouse fundus photography and angiography: a catalogue of normal and mutant phenotypes.</a> Mol. Vis. 5, 22-22 (1999).</li><li>Won, J., Shi, L. Y., Hicks, W., Wang, J., Hurd, R., Naggert, J. K., Chang, B., Nishina, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+resources+for+vision+research.">Mouse model resources for vision research.</a> J. Ophthalmol. 2011, 391384-391384 (2011).</li><li>Pinto, L. H., Vitaterna, M. H., Siepka, S. M., Shimomura, K., Lumayag, S., Baker, M., Fenner, D., Mullins, R. F., Sheffield, V. C., Stone, E. M., Heffron, E., Takahashi, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+from+screening+over+9000+mutation-bearing+mice+for+defects+in+the+electroretinogram+and+appearance+of+the+fundus.">Results from screening over 9000 mutation-bearing mice for defects in the electroretinogram and appearance of the fundus.</a> Vision. Res. 44, 3335-3345 (2004).</li><li>Heckenlively, J. R., Winston, J. V., Roderick, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+mouse+retinal+degenerations.+I.+Correlation+of+indirect+ophthalmoscopy,+electroretinograms,+and+histology.">Screening for mouse retinal degenerations. I. Correlation of indirect ophthalmoscopy, electroretinograms, and histology.</a> Doc. Ophthalmol. 71, 229-239 (1989).</li><li>Tsang, S. H., Gouras, P., Yamashita, C. K., Kjeldbye, H., Fisher, J., Farber, D. B., Goff, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+degeneration+in+mice+lacking+the+gamma+subunit+of+the+rod+cGMP+phosphodiesterase.">Retinal degeneration in mice lacking the gamma subunit of the rod cGMP phosphodiesterase.</a> Science. 272, 1026-1029 (1996).</li><li>Tsang, S. H., Woodruff, M. L., Jun, L., Mahajan, V., Yamashita, C. K., Pedersen, R., Lin, C. S., Goff, S. P., Rosenberg, T., Larsen, M., Farber, D. B., Nusinowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+carrying+the+H258N+mutation+in+the+gene+encoding+the+beta-subunit+of+phosphodiesterase-6+(PDE6B)+provide+a+model+for+human+congenital+stationary+night+blindness.">Transgenic mice carrying the H258N mutation in the gene encoding the beta-subunit of phosphodiesterase-6 (PDE6B) provide a model for human congenital stationary night blindness.</a> Hum. Mutat. 28, 243-254 (2007).</li></ol>

Çoğu transgenik fareler gözleri incelemek yok laboratuvarlarda bulunması. Bizim video tekniği gözleri ile az deneyime sahip laboratuvarlar doku edinimi optimize etmek için uzaktan cerrahi beceri transferi için basit ve standartlaştırılmış bir yöntem gösterilmektedir. Bu video tekniği anlamlı karşılaştırmalı fenotipik ve moleküler çalışmalar önlemek standart olmayan doku toplama ve fiksasyon yöntemleri nedeniyle uzman sitelere sınırlı sayıda kullanımı yüksek hacimli fenotiplendirme, bü...

<table border="1"><tbody><tr><th> Isim </th><th> Şirket </th><th> Katalog Numarası </th><th> Yorumlar </th></tr><tr><td> Kavisli Giyinme Forcep </td><td> Storz Ophtalmics&#39;in </td><td> E1408 </td><td></td></tr><tr><td> Mahajan Sharptip soyunma forcep </td><td> Storz Ophtalmics&#39;in </td><td> E1406 (REF SP7-64520) </td><td></td></tr><tr><td> Kavisli Westcott Makas </td><td> Storz Ophtalmics&#39;in </td><td> E3321 WH </td><td></td></tr><tr><td> 15 ° BD Beaver Mikrocerrahi Blade </td><td> Becton-Dickinson </td><td> 374881 </td><td></td></tr><tr><td> 0.22 İnce Castroviejo dikişin Forseps </td><td> Storz Ophtalmics&#39;in </td><td> E1805 </td><td></td></tr><tr><td> 0.12 Colibri forseps </td><td> Storz Ophtalmics&#39;in </td><td> 2/132 </td><td></td></tr><tr><td> 30-gauge iğne </td><td> Becton-Dickinson </td><td> 305128 </td><td></td></tr><tr><td> Biohazard Mailer </td><td> Balıkçı </td><td> 03-523-4 </td><td></td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> Balıkçı </td><td> 13-374-10 </td><td></td></tr><tr><td> Cam sintilasyon şişeleri </td><td> Wheaton </td><td> 4500413033 </td><td></td></tr><tr><td> PBS, pH 7.4 </td><td> Invitrogen </td><td> 70011-044 </td><td></td></tr><tr><td> % 16 paraformaldehit </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> 15700 </td><td></td></tr><tr><td> 0.1M sodyum fosfat tamponlu% 2.5 lik Paraformaldehyde /% 2.5 glutaraldehit </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> 15700 &amp; 16300 </td><td> Laboratuvarda Karışık </td></tr><tr><td> 50% Glutaraldehit </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> 16300 </td><td></td></tr><tr><td> 0.25% Formvar </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> 15810 </td><td></td></tr><tr><td> PolisSlot Izgara başına </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> M2010-CR </td><td></td></tr><tr><td> % 4 osmiyum tetroksit </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> 19140 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-SOD3 antikor </td><td> Abcam </td><td> Ab21974 </td><td></td></tr><tr><td> Keçi anti-tavşan Alexa Fluor 488 </td><td> Invitrogen </td><td> A11070 </td><td></td></tr><tr><td> Spurr sitesi gömme reçine </td><td> Elektron Mikroskopi Bilimleri </td><td> 14300 </td><td></td></tr></tbody></table>

mouse eye enucleation for remote high-throughput phenotyping

Fare insan gözü oftalmik hastalık translasyonel çalışma için önemli bir genetik modelidir. Bu tür makula dejenerasyonu, fotoreseptör dejenerasyonu, katarakt, glokom, retinoblastom ve diyabetik retinopati gibi, insanlarda körleştiriyor hastalıklar 1-5 En transgenik ve nakavt fareler olmayan oftalmik hastalıklar çalışma laboratuarları tarafından üretilen oylandı. Transgenik farelerin değinmeyecek ama oylandı organ sistemleri arasındaki genetik koruma, aynı genlerin çoğunun da oküler geliştirme ve hastalık bir rol oynadığını düşündürmektedir. Dolayısıyla, bu farelerin gözünde yeni genotip-fenotip ilişkisi keşfetmek için önemli bir kaynak oluşturmaktadır. Bu farelerin dünyaya yayılmış olduğundan, bu satın korumak ve verimli, maliyet-etkin şekilde fenotip bunları zordur. Böylece, en yüksek verim oftalmik fenotipleme ekranlarında canlı farelerde gözler incelemek, oftalmik uzmanlığı bünyesinde gerektiren birkaç yerle sınırlıdır. 6-9 laboratuar tarafından geliştirilen diğer bir yaklaşım, transgenik fare gözünde büyük ya da küçük-çaplı araştırmalar kullanılabilir uzak doku-kazanılması için bir yöntemdir. Video tabanlı cerrahi beceri transferi, doku fiksasyonu ve nakliye için Standartlaştırılmış prosedürler herhangi bir laboratuar mutant hayvanlar kadar tüm gözler toplamak ve moleküler ve morfolojik fenotipleme için bunları göndermek için izin verir. Bu video makalede, uzaktan fenotipleme analizleri için sabitlenmemiş ve perfüzyon hem sabit fare gözler tanıttılar ve aktarmak için teknikler mevcut.

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping at JoVE.com

Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping

Diseksiyon tekniği high-throughput ekranlarında fenotipleme gerçekleştirmek için doku fiksasyonu fare gözün enükleasyonu göstermektedir.

Uzaktan Yüksek throughput fenotipleme için Fare Göz Enükleasyon

The mouse eye is an important genetic model for the translational study of human ophthalmic disease. Blinding diseases in humans, such as macular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics

Protein Therapeutics İmalat Hücre Hatları Kalkınma Yüksek throughput Otomatik Platformu

The fast-growing biopharmaceutical industry demands speedy development of highly efficient and reliable production systems to meet the increasing ...

A Mouse Model of the Cornea Pocket Assay for Angiogenesis Study

Anjiyogenez Çalışması Kornea Cep Testi Fare Modeli

A normal cornea is clear of vascular tissues. However, blood vessels can be induced to grow and survive in the cornea when potent angiogenic factors are ...

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Bilinçli Mesnetlenmemiş Fare hiperinsülinemik öglisemik Kelepçeleri

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Remote Magnetic Navigation for Accurate, Real-time Catheter Positioning and Ablation in Cardiac Electrophysiology Procedures

Kardiyak Elektrofizyoloji İşlemleri Doğru, gerçek zamanlı Kateter Konumlandırma ve Ablasyon için uzaktan Manyetik Navigasyon

New remote navigation systems have been developed to improve current limitations of conventional manually guided catheter ablation in complex cardiac ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

Akut Graft-Versus-Host Hastalığı Biyomarkörler onaylanması için Yüksek Verimli Sıralı ELISA

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

High Throughput Characterization of Adult Stem Cells Engineered for Delivery of Therapeutic Factors for Neuroprotective Strategies

Nöroprotektif Stratejileri Tedavi Faktörleri teslimi için tasarlandı Erişkin Kök Hücre Yüksek Verimli Karakterizasyonu

Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a powerful cellular resource and have been used in numerous studies as potential candidates to ...

Fluorescent Dye Labeling of Erythrocytes and Leukocytes for Studying the Flow Dynamics in Mouse Retinal Circulation

Fare Retinal Sirkülasyonunda Akış Dinamikleri Çalışmak İçin Eritrositler ve Lökositlerin Floresan Boya Etiketlenmesi

The retinal and choroidal blood flow dynamics may provide insight into the pathophysiology and sequelae of various ocular diseases, such as glaucoma, ...

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate (HoLEP).

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate HoLEP.

Benign Prostatik Hiperplazi için cerrahi tedavi: holmiyum lazer enükleasyon prostat (HoLEP).

Benign prostatic hyperplasia (BPH) commonly occurs among elderly males. The condition causes symptoms in the lower urinary tract, thereby reducing the ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Delici cisim kaynaklı Iris neovaskülarizasyon Rubeosis Iridis bir fare modeli olarak

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

High-throughput Nitrobenzoxadiazole-labeled Cholesterol Efflux Assay

Yüksek işlem hacmi Nitrobenzoxadiazole etiketli kolesterol sızma tahlil

Atherosclerosis leads to cardiovascular disease (CVD). It is still unclear whether cholesterol-HDL (cHDL) concentration plays a causal role in ...