Name: use of the epiairway model for characterizing long-term host-pathogen interactions
Uploaded: 2011-09-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions at JoVE.com

نود أن نشكر باتريك هايدن (ماتيك) لإجراء مناقشات مفيدة ، وروبرت سميث وبيري ليبي للعلوم الصحية للجامعة جورجيا EM المهارات الخاصة بهم. وقد تم تمويل هذه الدراسة من خلال منحة NIDCD DC010187 إلى DAD

1. تستعد الحكومة للسلامة الأحيائية لأنسجة EpiAirway <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يرتدي معطف المختبر المكرسة ، مع ربط الشعر الى الوراء وعلى القفازات ، وبدء تدفق الصفحي. بعد 5 دقائق ، ونقل أي الأدوات في خزانة (pipettors ، نصائح ، وأنابيب أجهزة الطرد المركزي ، ...

<ol>
	<li>Murphy, T. F., Apicella, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nontypeable+Haemophilus+influenzae:+a+review+of+clinical+aspects,+surface+antigens,+and+the+human+immune+response+to+infection.">Nontypeable Haemophilus influenzae: a review of clinical aspects, surface antigens, and the human immune response to infection.</a> Rev. Infect. Dis. 9, 1-15 (1987).</li><li>Murphy, T. F., Faden, H., Bakaletz, L. O., Kyd, J. M., Forsgren, A., Campos, J., Virji, M., Pelton, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nontypeable+Haemophilus+influenzae+as+a+pathogen+in+children.">Nontypeable Haemophilus influenzae as a pathogen in children.</a> Ped. Infect. Dis. J. 28, 43-48 (2009).</li><li>Hotomi, M., Arai, J., Billal, D. S., Takei, S., KIkeda, Y., Ogami, M., Kono, M., Beder, L. B., Toya, K., Kimura, M., Yamanaka, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nontypeable+Haemophilus+influenzae+isolated+from+intractable+acute+otitis+media+internalized+into+cultured+human+epithelial+cells.">Nontypeable Haemophilus influenzae isolated from intractable acute otitis media internalized into cultured human epithelial cells.</a> Auris Nasus Larynx. 37, 137-144 (2010).</li><li>Chemuturi, N. V., Hayden, P., Kalausner, M., Donovan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+human+tracheal/bronchial+epithelial+cell+culture+and+bovine+nasal+respiratory+explants+for+nasal+drug+transport+studies.">Comparison of human tracheal/bronchial epithelial cell culture and bovine nasal respiratory explants for nasal drug transport studies.</a> J. Pharm. Sci. 94, 1976-1985 (2005).</li><li>Sharma, M., Schoop, R., Hudson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficacy+of+Echinacea+in+a+3-D+tissue+model+of+human+airway+epithelium.">The efficacy of Echinacea in a 3-D tissue model of human airway epithelium.</a> Phytother. Res. 24, 900-904 (2010).</li><li>Sexton, K., Balharry, D., BeruBe, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+biomarkers+of+pulmonary+exposure+to+tobacco+smoke+components.">Genomic biomarkers of pulmonary exposure to tobacco smoke components.</a> Pharmacogenet Genomics. 10, 853-860 (2008).</li><li>Babu, R. J., Dayal, P., Singh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cyclodextrins+on+the+complexation+and+nasal+permeation+of+melatonin.">Effect of cyclodextrins on the complexation and nasal permeation of melatonin.</a> Drug Deliv. 6, 381-388 (2008).</li><li>Balharry, D., Sexton, K., BeruBe, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vitro+approach+to+assess+the+toxicity+of+inhaled+tobacco+smoke+components:+nicotine,+cadmium,+formaldehyde+and+urethane.">An in vitro approach to assess the toxicity of inhaled tobacco smoke components: nicotine, cadmium, formaldehyde and urethane.</a> Toxicology. 244, 66-76 (2008).</li><li>Fahy, J. V., Dickey, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Airway+mucus+function+and+dysfunction.">Airway mucus function and dysfunction.</a> N. Engl. J. Med. 363, 2233-2247 (2010).</li><li>Huang, Y., Mikami, F., Jono, H., Zhang, W., Weng, X., Koga, T., Xu, H., Yan, C., Kai, H., Li, J. -. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opposing+roles+of+PAK2+and+PAK4+in+synergistic+induction+of+MUC5AC+mucin+by+bacterium+NTHi.">Opposing roles of PAK2 and PAK4 in synergistic induction of MUC5AC mucin by bacterium NTHi.</a> 359, 691-696 (2007).</li></ol>

هذا الأسلوب يسمح للتحقيق في التفاعلات المضيف الممرض على المدى الطويل في خلفية ذات الصلة بيولوجيا من الأنسجة الابتدائية التنفسي للإنسان في واجهة الهواء السائل. هنا استخدمنا NTHi كما يصيب الكائن ، ولكن يمكن كميا أي تفاعل البكتيريا التي لا يدخل السمسة غير مقبولة على مر ا...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> كتالوج # </th><th> تعليقات </th></tr><tr><td> سابونين </td><td> Calbiochem </td><td> 558255 - 25GM </td><td> 1 ٪ في برنامج تلفزيوني من دون مد الكالسيوم أو المغنسيوم ، وتصفية تعقيم </td></tr><tr><td> 1 X Dulbecco والفوسفات مخزنة المالحة مع الكالسيوم والمغنيسيوم </td><td> Lonza </td><td> 17 - 513Q </td><td></td></tr><tr><td> 1 X Dulbecco والفوسفات مخزنة المالحة دون الكالسيوم أو المغنسيوم </td><td> Lonza </td><td> 17 - 515Q </td><td></td></tr><tr><td> EpiAirway المضادات الحيوية خالية من الأنسجة </td><td> ماتيك </td><td> AIR - 100 - ABF </td><td></td></tr><tr><td> وسائل الاعلام EpiAirway صيانة خالية من المضادات الحيوية </td><td> ماتيك </td><td> AIR - 100 - MM - ABF </td><td> الموردة مع طقم </td></tr><tr><td> الفوسفات مخزنة 10X محلول ملحي </td><td> EMD </td><td> 6506 </td><td> لتمييع 1X قبل الاستخدام </td></tr><tr><td> الجيلاتين </td><td> JT بيكر </td><td> 2124-01 </td><td> إضافة إلى التركيز النهائي من 0.1 ٪ في برنامج تلفزيوني X 1 و الأوتوكلاف </td></tr><tr><td> Difco قاعدة متوسطة GC (آجار الشوكولاته) </td><td> VWR </td><td> 90002-016 </td><td> الأوتوكلاف 36 ز في 500 مل O 2 DDH وباردة إلى 60 درجة مئوية </td></tr><tr><td> BBL الهيموغلوبين (آجار الشوكولاته) </td><td> VWR </td><td> 90000-662 </td><td> الأوتوكلاف 10 ز في 500 مل O 2 DDH بارد إلى 60 درجة مئوية ، والاختلاط مع قاعدة المتوسطة أعلاه GC </td></tr><tr><td> دينار بحريني تخصيب IsoVitaleX BBL (أجار الشوكولاته) </td><td> VWR </td><td> 90000-414 </td><td> تبريد خليط من قاعدة GC المتوسطة والهيموجلوبين إلى 55 درجة مئوية ، وإضافة 10 مل من IsoVitaleX ممهى ، صب لوحات أجار الشوكولاتة </td></tr><tr><td> ملقط تشريح ، غيض غرامة ، ومنحني </td><td> VWR </td><td> 82027-406 </td><td></td></tr><tr><td> الحقائب التعقيم الختم الذاتي </td><td> VWR </td><td> 89140-802 </td><td></td></tr><tr><td> جنتاميسين سلفات ، 10 ملغ / مل </td><td> Lonza </td><td> 17 - 519Z </td><td> إضافة microliters 10 / مل لMM EpiAirway لقتل جنتاميسين </td></tr></tbody></table>

use of the epiairway model for characterizing long-term host-pathogen interactions

Nontypeable المستدمية النزلية (NTHi) هي تكييف الإنسان الجراثيم سلبية الغرام التي يمكن أن تسبب التهابات متكررة ومزمنة في الأغشية المخاطية التنفسية 1 ، 2. لدراسة الآليات التي من خلالها هذه الكائنات على البقاء على قيد الحياة وداخل أنسجة الجهاز التنفسي ، وهذا نموذج التي يمكن أن يؤديها بنجاح على المدى الطويل المشترك ثقافة البكتيريا والخلايا البشرية هو مطلوب. نستخدم الإنسان التنفسي الأنسجة الطلائية الأولية التي أثيرت في واجهة الهواء السائل ، نموذج EpiAirway (ماتيك ، آشلاند ، MA). هذه هي غير خلدت جيدا ومتباينة ، 3 الابعاد الأنسجة التي تحتوي على منعطفات ضيقة ، وخلايا مهدبة وnonciliated ، والخلايا التي تنتج القدح الميوسين ، والابقاء على القدرة على إنتاج السيتوكينات في الاستجابة للعدوى. ويمكن استخدام هذا النموذج ذات الصلة بيولوجيا في المختبر من مجرى الهواء العلوي الإنسان في عدد من الطرق ، والهدف العام من هذا الأسلوب هو لأداء على المدى الطويل المشترك ثقافة الأنسجة EpiAirway مع NTHi وquantitate الخلية المرتبطة البكتيريا والمنضوية مع مرور الوقت . كذلك ، يمكن تحديد الإنتاج والميوسين ملف خلوى من المصابين المشترك الثقافات. يحسن هذا النهج على الأساليب الموجودة في العديد من البروتوكولات التي تستخدم الحالية مغمورة أحادي الطبقة أو Transwell الثقافات من الخلايا البشرية ، وهي ليست قادرة على دعم الالتهابات البكتيرية على مدى فترات طويلة 3. على سبيل المثال ، إذا كان الكائن الحي يمكن أن تتكرر في وسائل الإعلام الفوقية ، وهذا يمكن أن يؤدي إلى مستويات غير مقبولة من السمسة وفقدان الخلايا المضيفة والقت القبض على التجربة. نموذج EpiAirway يسمح توصيف التفاعلات المضيف الممرض على المدى الطويل. علاوة على ذلك ، منذ المصدر للEpiAirway أمر طبيعي الإنسان الرغامى خلايا الشعب الهوائية بدلا من خط خلده ، كل واحدة على تمثيل ممتاز من الإنسان التنفسي العلوي الفعلية أنسجة المسالك ، سواء من حيث الهيكل وظيفة 4. لهذا الأسلوب ، الأنسجة EpiAirway مفطوم الخروج من المركبات المضادة للميكروبات ومكافحة الفطريات لمدة 2 أيام قبل التسليم ، ويتم تنفيذ كافة الإجراءات في إطار المضادات الحيوية خالية من الشروط. هذا يتطلب اعتبارات خاصة ، حيث يتم استخدام كل من البكتيريا والأنسجة البشرية الأساسية للسلامة الأحيائية في الحكومة نفسها ، وشارك في تربيتها لفترات طويلة.

Watch this Scientific Journal Video about Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions at JoVE.com

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions

هذا الأسلوب يسمح توصيف البكتيرية تمديد التعاون مع EpiAirways الثقافة البشرية والجهاز التنفسي الأولية الأنسجة الطلائية نمت في واجهة الهواء السائل ، وهو ذات الصلة بيولوجيا<em&gt; في المختبر</em&gt; النموذج. ويمكن استخدام هذا النهج مع أي ميكروب التي قابلة للالمدى الطويل المشترك الثقافة.

استخدام نموذج لوصف EpiAirway طويل الأجل المضيف الممرض التفاعلات

Nontypeable Haemophilus influenzae  (NTHi) are human-adapted Gram-negative bacteria that can cause recurrent and chronic infections of the respiratory ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging

استخدام اعتراض البصرية لدراسة التفاعلات المرضي المضيف الحيوي للخلية الحية التصوير

Dynamic live cell imaging allows direct visualization of real-time interactions between cells of the immune system1, 2; however, the lack of spatial and ...

A Comparative Approach to Characterize the Landscape of Host-Pathogen Protein-Protein Interactions

A المنهج المقارن لتوصيف المشهد من المضيف الممرض البروتين البروتين التفاعلات

Significant efforts were gathered to generate  large-scale comprehensive protein-protein interaction network maps. This is  instrumental to understand the ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

على المدى الطويل المزمن<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; عدوى مجرى الهواء في الفئران

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

استخدام<em&gt; الشيجلا الفلكسنرية</em&gt; لدراسة التفاعلات الالتهام الذاتي الهيكل الخلوي

Shigella flexneri is an intracellular pathogen that can escape from phagosomes to reach the cytosol, and polymerize the host actin cytoskeleton to promote ...

Long Term Intravital Multiphoton Microscopy Imaging of Immune Cells in Healthy and Diseased Liver Using CXCR6.Gfp Reporter Mice

المدى الطويل حيوي داخلي Multiphoton المجهر التصوير من الخلايا المناعية في السليمة والمريضة الكبد عن طريق الفئران CXCR6.Gfp مراسل

Liver inflammation as a response to injury is a highly dynamic process involving the infiltration of distinct subtypes of leukocytes including monocytes, ...

Evaluation of the Efficacy And Toxicity of RNAs Targeting HIV-1 Production for Use in Gene or Drug Therapy

تقييم فعالية وسمية الرنا استهداف HIV-1 الإنتاج للاستخدام في الجينات أو العلاج بالعقاقير

Small RNA therapies targeting post-integration steps in the HIV-1 replication cycle are among the top candidates for gene therapy and have the potential ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

و إيل-8 عابر نموذج الماوس المعدلة وراثيا ل<em&gt; في فيفو</em&gt; رصد طويل الأمد للردود الالتهابية

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...

Long-term In Vivo Tracking of Inflammatory Cell Dynamics Within Drosophila Pupae

Long-term In Vivo Tracking of Inflammatory Cell Dynamics Within Drosophila Pupae

طويلة الأمد في فيفو تتبع ديناميات الخلايا التحريضية داخل الخوادر المورفولوجية

During the rapid inflammatory response to tissue damage, cells of the innate immune system are quickly recruited to the injury site. Once at the wound, ...

Complementary Use of Microscopic Techniques and Fluorescence Reading in Studying Cryptococcus-Amoeba Interactions

Complementary Use of Microscopic Techniques and Fluorescence Reading in Studying Cryptococcus-Amoeba Interactions

الاستخدام التكميلي للتقنيات المجهرية والقراءة الفلورية في دراسة تفاعلات Cryptococcus-Amoeba

To simulate Cryptococcus infection, amoeba, which is the natural predator of cryptococcal cells in the environment, can be used as a model for ...

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

تقييم استجابات المضيف الممرض ونجاعة اللقاح في الفئران

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...