Name: derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues
Uploaded: 2011-08-21T12:00:00
Duration: 18 min 17 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> وقد تم تمويل هذا المشروع من خلال منحة من جمعية التصلب المتعدد لكندا RKRWO هي المستفيدة من دراسية لمن جمعية التصلب المتعدد في كندا. حقوق السحب الخاصة هي المستفيدة من المنح الدراسية ما بعد الدكتوراه من جمعية التصلب المتعدد من كندا والمعاهد الكندية لأبحاث الصحة. </p>

<ol>
	<li>Avellana-Adalid, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+of+rat+oligodendrocyte+progenitors+into+proliferative+"oligospheres"+that+retain+differentiation+potential.">Expansion of rat oligodendrocyte progenitors into proliferative "oligospheres" that retain differentiation potential.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci Res</em>. <b>45</b>, 558-570 (1996).</li><li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue.">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>85</b>, 890-902 (1980).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+death+and+control+of+cell+survival+in+the+oligodendrocyte+lineage.">Cell death and control of cell survival in the oligodendrocyte lineage.</a> <em style='font-style: italic'>Cell</em>. <b>70</b>, 31-46 (1992).</li><li>Chan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NGF+controls+axonal+receptivity+to+myelination+by+Schwann+cells+or+oligodendrocytes.">NGF controls axonal receptivity to myelination by Schwann cells or oligodendrocytes.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>43</b>, 183-1891 (2004).</li><li>Camara, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-mediated+axoglial+interactions+initiate+myelination+in+the+central+nervous+system.">Integrin-mediated axoglial interactions initiate myelination in the central nervous system.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>185</b>, 699-712 (2009).</li><li>Ishibashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+promote+myelination+in+response+to+electrical+impulses.">Astrocytes promote myelination in response to electrical impulses.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>49</b>, 823-832 (2006).</li><li>Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+rat+and+mouse+oligodendrocyte+precursor+cells.">Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Protoc</em>. <b>2</b>, 1044-1051 (2007).</li><li>Pedraza, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production,+characterization,+and+efficient+transfection+of+highly+pure+oligodendrocyte+precursor+cultures+from+mouse+embryonic+neural+progenitors.">Production, characterization, and efficient transfection of highly pure oligodendrocyte precursor cultures from mouse embryonic neural progenitors.</a> <em style='font-style: italic'>Glia</em>. <b>56</b>, 1339-1352 (2008).</li><li>Lewin, G. R., Ritter, A. M., Mendell, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+role+of+nerve+growth+factor+in+the+development+of+myelinated+nociceptors.">On the role of nerve growth factor in the development of myelinated nociceptors.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci</em>. <b>12</b>, 1896-1905 (1992).</li><li>Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+in+vitro+studies+on+the+nerve+growth+factor+(NGF)+requirement+of+neurons.+II.+Sensory+neurons.">Quantitative in vitro studies on the nerve growth factor (NGF) requirement of neurons. II. Sensory neurons.</a> <em style='font-style: italic'>Dev Biol</em>. <b>58</b>, 106-113 (1977).</li></ol>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> الإعلان عن أي تضارب في المصالح. </p>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> هذا التقرير يصف طريقة لعزل OPCs الفئران عن التمايز في الثقافات OL - OL المخصب أو / DRGN المشترك الثقافات. عند المثقف وحده ، OPCs تفرق في عملية شريان الحياة MBP <sup>+ هاء</sup> ، وإنتاج النخاعين مثل أوراق غشائي. عندما تضاف إلى أسرة DRGN neurite ، شريان الحياة في غلف neurites DRGN مع MBP <sup>+</sup> غشاء <sup>هاء.</sup> هذا النموذج يفيد التحقيق في الأسس التي تحكم معقدة رأ بوساطة ensheathment محواري. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> في حين أن قيمة كبيرة ، وإنشاء مثل هذه الثقافات يشكل تحديا تقنيا. على وجه الخصوص ، وتشمل الجوانب تطالب كفاءة الهضم الأنسجة / التفكك ، والحفاظ على توازن درجة الحموضة ثقافة الإعلام ، والتغيرات DRGN وسائل الإعلام. من المهم أن نرى أن طول الهضم ، ويجري استيعاب كمية الأنسجة وكمية سحن يؤثر على فعالية ونتيجة نهاية تفارق الأنسجة. ليس من غير المألوف بالنسبة للباحثين من ذوي الخبرة للحصول على غلة الخلوية منخفضة من فصل أنسجة الجهاز العصبي. بالإضافة إلى ذلك ، OPCs الفئران تميل إلى أن تكون حساسة للتغيرات في درجة الحموضة وسائل الإعلام والثقافة ، وخاصة في ظل الظروف القلوية. الحفاظ على الثقافات في CO <sub>2</sub> و 8.5 ٪ يهدف إلى منع حدوث ذلك ، تظهر منذ OPCs على تحمل الظروف الحمضية أفضل بقليل الأساسية. فيما يتعلق DRGNs التغذية ، ويجب إجراء تغييرات وسائل الإعلام بسرعة حتى لا يجفف الخلايا العصبية ، ومع ذلك ، يجب أن يكون لطيف حتى لا تعطل السرير neurite النامية. وسائل الاعلام قد المفاجئ التغييرات طرد من السرير neurite الركيزة ، ويؤدي على الأرجح في التفكك التام من ساترة. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ميزة المحتملة لهذا النظام النموذجي يلقي بظلاله بشكل كبير طبيعته تطالب تقنيا. ميزة واحدة من هذا النظام هو استخدام ما بعد الولادة الفئران لاشتقاق ثقافة الخلية ، ملتفا على ضرورة التضحية تربية الإناث لحصاد الأنسجة الجنينية. ميزة أخرى هي عدم وجود شرط لعوامل النمو (GFS) للتوسع في OPCs. ثقافات مختلطة الدبقية توفير بيئة تدعم نشر OPCs ، ويفترض أن يعود إلى وجود عوامل التغذية نجمية المشتقة. أساليب أخرى ، مثل الاشتقاق عبر neurospheres <sup>7،8</sup> ، تعتمد على خصائص مولد للتفتل من GFS مثل عامل نمو الخلايا الليفية الأساسية (bFGF) ، عامل نمو البشرة (EGF) وصفائح المستمدة عامل النمو (PDGF) للتوسع OPC. وبالمثل ، وذلك باستخدام ما بعد الولادة (P5 - 10) الفئران ليتجنب DRGNs شرط المكمل لثقافة الإعلام مع عامل نمو الاعصاب (NGF) ، وهو عامل التغذية العصبية اللازمة للبقاء على قيد الحياة <em>في المختبر</em> من DRGNs الجنينية <sup>9 و 10.</sup> فمن مصلحة لتجنب استخدام NGF كما أنه يؤثر سلبا على قدرة myelinating عملية شريان الحياة عند المثقف مع DRGNs <sup>4.</sup> تجنب استخدام GF - تستكمل وسائل الإعلام أيضا فوائد اقتصادية ، إذ أن هذه الكواشف تصبح مكلفة عند استخدامها على نطاق واسع. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ولعل أهم فائدة من هذا النموذج هو ثقافة الاشتقاق من الماوس فقط الأنسجة ، وبالتالي توفير الفرص لاستخلاص كل من OPCs وDRGNs من تشكيلة واسعة من خطوط الفأر المعدل وراثيا. وهذا يسمح لدراسة كل من و / أو DRGN OPC محددة الخصائص التي تحكم تكون الميالين. وسوف يكون هذا أهمية خاصة بالنسبة للتوضيح التفاعلات مستقبلات / يجند تنظيم رأ بوساطة تكون الميالين من المحاور. في كل شيء ، هذه التقنية هي ذات قيمة كبيرة بالنسبة للبحوث علم الأعصاب بسبب تطبيقاتها نحو فهم الاشارات الجزيئية الكامنة وراء تكون الميالين. </p>

<html><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>اسم المنتج</strong> </td><td> <strong>شركة</strong> </td><td> <strong>رقم المنتج</strong> </td></tr><tr><td> Dulbecco في التعديل النسر متوسطة (DMEM) </td><td> Multicell </td><td> 319-005 - CL </td></tr><tr><td> هانك محلول الملح المتوازن (HBSS) </td><td> Invitrogen </td><td> 14170-112 </td></tr><tr><td> وسائل الإعلام الأساسية الدنيا (MEM) </td><td> GIBCO </td><td> 12360-038 </td></tr><tr><td> الجنين مصل البقر (FBS) </td><td> GIBCO </td><td> 10091-148 </td></tr><tr><td> البنسلين الستبرتوميسين (القلم / بكتيريا) </td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> Invitrogen </td><td> 35050-061 </td></tr><tr><td> بولي - L - يسين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P2636 </td></tr><tr><td> الأبقار مصل الزلال (BSA) </td><td> سيغما الدريخ </td><td> A4503 </td></tr><tr><td> الإنسان merosin تنقية البروتين (LN2) </td><td> ميليبور </td><td> CC085 </td></tr><tr><td> المؤتلف عامل الفئران عصبية الهدبية (CNTF) </td><td> PeproTech </td><td> 450-50 </td></tr><tr><td> L - هرمون الغدة الدرقية </td><td> Biochemika </td><td> 89430 </td></tr><tr><td> هولو ، ترانسفيرين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> T0665 </td></tr><tr><td> B27 تكملة </td><td> GIBCO </td><td> 0080085 - SA </td></tr><tr><td> الأنسولين البقري </td><td> سيغما الدريخ </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> 3،3 &#39;،5 - Triiodo - L - ثيرونين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> البروجسترون </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P8783 </td></tr><tr><td> بوتريسين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P7505 </td></tr><tr><td> الصوديوم زيلونيت </td><td> سيغما الدريخ </td><td> S5261 </td></tr><tr><td> 5 - الفلورية 2&#39; - deoxyuridine (FuDR) </td><td> سيغما الدريخ </td><td> F0503 </td></tr><tr><td> غراء الحل </td><td> ورثينجتون </td><td> LS003126 </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> ROCHE </td><td> 1010159001 </td></tr><tr><td> L - السيستين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> C7352 </td></tr><tr><td> 24 الأطباق جيدا زراعة الأنسجة </td><td> Cellstar </td><td> 662-160 </td></tr><tr><td> T25 النسيج ثقافة القوارير مع غطاء تنفيس </td><td> كورنينج </td><td> 430639 </td></tr><tr><td> 10 سم أطباق زراعة الأنسجة </td><td> كورنينج </td><td> 430167 </td></tr><tr><td> 10 سم طبق بتري </td><td> فيشر العلمية </td><td> 0875713 </td></tr><tr><td> كولاجيناز A </td><td> ROCHE </td><td> 103578 </td></tr><tr><td> CellTrics 50 ميكرون فلتر (اختياري) </td><td> PARTEC </td><td> 04-004-2327 </td></tr><tr><td> بروتين النخاعين الأساسي (MBP) جسم </td><td> عبد Serotec </td><td> MCA409S </td></tr><tr><td> NG2 الأضداد </td><td> ميليبور </td><td> AB5320 </td></tr><tr><td> المايلين المرتبطين جلايكوبروتين (MAG) الأضداد </td><td> ميليبور </td><td> MAB1567 </td></tr><tr><td> 2 &#39;، 3&#39; - دائرى - النوكليوتيدات 3&#39; - فسفودايستراز (CNP) الأضداد </td><td> كوفانس </td><td> SMI - 91R - 100 </td></tr><tr><td> أكتين عموم AB - 5 الأضداد </td><td> فيتزجيرالد </td><td> 10R - A106AX </td></tr><tr><td> Neurofilament - 200 (NF) الأضداد </td><td> سيغما الدريخ </td><td> N4142 </td></tr><tr><td> بيتا 3 تويولين سلسلة (Tuj1) الأضداد </td><td> ميليبور </td><td> MAB5544 </td></tr><tr><td> الكسا فلور 488 الماعز المضادة للأرنب مفتش (H + L) الأجسام المضادة الثانوية </td><td> Invitrogen </td><td> A11008 </td></tr><tr><td> الكسا فلور 555 الماعز المضادة للمفتش الماوس (H + L) الأجسام المضادة الثانوية </td><td> Invitrogen </td><td> A21422 </td></tr><tr><td> الكسا فلور 647 ماعز مكافحة الجرذان (مفتش) (H + L) الأجسام المضادة الثانوية </td><td> Invitrogen </td><td> A21247 </td></tr><tr><td> الماعز المضادة للمفتش الماوس (H + L) - HRP الضد الثانوية مترافق </td><td> BioRad </td><td> 170-6516 </td></tr><tr><td> الماعز لمكافحة الفئران مفتش (H + L) - HRP الضد الثانوية مترافق </td><td> سانتا كروز التكنولوجيا الحيوية </td><td> SC - 2065 </td></tr><tr><td> 4 &#39;،6 - diamidino - 2 - phenylindole (دابي) </td><td> سيغما الدريخ </td><td> D9542 </td></tr></tbody></table><p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> وصفات وسائل الاعلام </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>OL - 100X الملحق *</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>إضافة إلى مبلغ</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 100 مل </td></tr><tr><td> BSA </td><td> 1.02 ز </td></tr><tr><td> البروجسترون </td><td> 0.6 ملغ </td></tr><tr><td> بوتريسين </td><td> 161 ملغ </td></tr><tr><td> الصوديوم زيلونيت </td><td> 0.05 ملغ </td></tr><tr><td> 3،3 &#39;،5 - Triiodo - L - ثيرونين </td><td> 4 ملغ </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> * في مخزن -80 درجة مئوية في 250 aliquots ميكرولتر </p>ر &quot;&gt; <strong>وسائل الاعلام OL</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>إضافة إلى مبلغ</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 23.75 مل </td></tr><tr><td> OL - 100X الملحق </td><td> 250 ميكرولتر </td></tr><tr><td> البقري الأنسولين (من المخزون ملغ / مل 1) </td><td> 125 ميكرولتر </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> 250 ميكرولتر </td></tr><tr><td> هولو ، ترانسفيرين (من المخزون ملغ / مل 33) </td><td> 37.5 ميكرولتر </td></tr><tr><td> B27 الملحق </td><td> 500 ميكرولتر </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 125 ميكرولتر </td></tr><tr><td> CNTF (من المخزون نانوغرام / ميكرولتر 50) </td><td> 25 ميكرولتر </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>مختلطة وسائل الإعلام الثقافة الدبقية (تتكون في DMEM)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>التركيز النهائي</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10 ٪ </td></tr><tr><td> القلم / بكتيريا (0.33 ٪ من الأسهم) </td><td> 33 وحدة / مل البنسلين والستربتوميسين 33 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> 1 ٪ </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>DRGN سائل الإعلام (تتكون في DMEM)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>التركيز النهائي</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10 ٪ </td></tr><tr><td> القلم / بكتيريا (1 ٪ من الأسهم) </td><td> 100 وحدة / مل و 100 البنسلين الستبرتوميسين ميكروغرام / مل </td></tr></tbody></table><p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> وصفات الهضم الحل : </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>OPC غراء الحل (تتكون في MEM)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>التركيز النهائي</strong> </td></tr><tr><td> غراء الحل </td><td> 1.54 ملغ / مل </td></tr><tr><td> L - السيستين </td><td> 360 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> 60 ميكروغرام / مل </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>DRG غراء الحل (تتكون في HBSS)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>التركيز النهائي</strong> </td></tr><tr><td> غراء </td><td> 1.54 ملغ / مل </td></tr><tr><td> L - السيستين </td><td> 360 ميكروغرام / مل </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>DRG كولاجيناز حل (تتكون في HBSS)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>عنصر</strong> </td><td> <strong>التركيز النهائي</strong> </td></tr><tr><td> كولاجيناز A </td><td> 4 ملغ / مل </td></tr></tbody></table>

derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد الآليات الجزيئية الكامنة وراء التنمية رأ ليس فقط ضروري لتعزيز معرفتنا البيولوجيا الرتب الأخرى ، ولكن أيضا لفهم الآثار المرضية للأمراض المزيل مثل التصلب المتعدد (MS). تدرس عادة الخليوي تطوير النماذج الأولية مع ثقافة الخلية. زراعة الخلايا الأولية يسهل تقييم لإعطاء نوع من الخلايا من خلال توفير بيئة تسيطر عليها ، وخالية من المتغيرات الدخيلة التي تكون موجودة <em>في الجسم الحي.</em> في حين أن الثقافات رأ المستمدة من الفئران وفرت كمية هائلة من نظرة ثاقبة البيولوجيا OL ، وقد اجتمعت جهود مماثلة في إرساء ثقافات رأ من الفئران مع العقبات الرئيسية. تطوير أساليب عملية شريان الحياة لثقافة الفئران الأولية لا بد من أجل الاستفادة من خطوط الماوس المعدلة وراثيا المتوفرة. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> وقد وصفت وسائل متعددة لاستخراج OPCs من أنسجة القوارض ، بدءا من neurosphere الاشتقاق ، والفرق تنقية التصاق immunopurification <sup>1-3.</sup> بينما تقدم العديد من أساليب النجاح ، والأكثر ثقافة واسعة تتطلب مرات و / أو معدات مكلفة / الكواشف. للتحايل على هذا ، وتنقية OPCs من أنسجة الفئران مع تكييف الطريقة الموصوفة في الأصل من قبل Vellis مكارثي &amp; دي <sup>2</sup> هو المفضل. هذا الأسلوب ينطوي على OPCs جسديا فصل من ثقافة الدبقية المختلطة المستمدة من القشور القوارض الولدان. والنتيجة هي مجموعة من السكان OPC المنقى التي يمكن أن تكون متمايزة في ثقافة OL - المخصب. هذا النهج هو جذابة بسبب الوقت القصير نسبيا على ثقافتها وشرط ضروري لعوامل النمو أو الأضداد immunopanning. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> في حين استكشاف آليات التنمية رأ في ثقافة المنقى غني بالمعلومات ، فإنه لا يوفر البيئة الأكثر ملاءمة فيزيولوجيا لتقييم المايلين غمد تشكيل. وشارك في زرع شريان الحياة للسودان مع الخلايا العصبية تقديم نظرة ثاقبة على الأسس الجزيئية التي تنظم رأ بوساطة تكون الميالين من المحاور. بالنسبة للعديد من رأ / عصبون شارك في دراسات ثقافة ، وقد أثبتت الخلايا العصبية الظهرية العقدة الجذر (DRGNs) لتكون من نوع الخلايا العصبية في الاختيار. وهي مثالية للثقافة بالتعاون مع عملية شريان الحياة الخاصة بهم نظرا لسهولة استخراج ، كمية ضئيلة من الخلايا الملوثة ، وتشكيل أسرة neurite الكثيفة. بينما تم نشر الدراسات التي تستخدم الفئران / الماوس myelinating xenocultures <sup>4-6</sup> ، طريقة لاستخلاص هذه رأ / DRGN myelinating شارك في ثقافات ما بعد الولادة من أنسجة الفئران لم يتم وصفها. هنا نقدم طرق تفصيلية بشأن كيفية إنتاج مثل هذه الثقافات على نحو فعال ، جنبا إلى جنب مع أمثلة من النتائج المتوقعة. هذه الطرق مفيدة لمعالجة المسائل ذات الصلة بالتنمية رأ / الوظيفة myelinating ، وأدوات مفيدة في مجال علم الأعصاب. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues

<p class="jove_content">توضح هذه المقالة الطرق لاستخلاص اليورانيوم من السكان الفئران الخلايا السليفة oligodendrocyte (OPCs) في الثقافة الأولية ، والتي تفرق لإنتاج oligodendrocytes ناضجة (شريان الحياة). بالإضافة ، فإن هذا التقرير يصف التقنيات لانتاج الفئران myelinating المشترك الثقافات OPCs بذر الماوس على سرير neurite من الخلايا العصبية الظهرية الماوس العقدة الجذر (DRGNs).</p>

الاشتقاق الثقافات Oligodendrocyte المخصب وOligodendrocyte نيورون / Myelinating المشارك من الثقافات في مرحلة ما بعد الولادة مناديل الفئران

Identifying the molecular mechanisms underlying OL development is not only critical to furthering our knowledge of OL biology, but also has implications ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures

الحفظ بالتبريد من كتل الأنسجة القشرية للجيل الثقافات متعلق بالخلايا العصبية التخصيب

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly ...

Derivation of Glial Restricted Precursors from E13 mice

الاشتقاق من السلائف المقيد الغروية من E13 الفئران

This is a protocol for derivation of glial restricted precursor (GRP) cells from the spinal cord of E13 mouse fetuses. These cells are early precursors ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

السلف المستمدة من نظام الثقافة دبقية قليلة التغصن من دماغ الجنين البشري

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from <em>Xenopus</em> Nerve-muscle Co-cultures

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

في وقت واحد قبل وبعد متشابك تسجيل الكهربية من<em&gt; القيطم</em&gt; العصبي العضلي المشارك الثقافات

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Preparation of Neuronal Co-cultures with Single Cell Precision

إعداد العصبية المشارك الثقافات واحدة مع الدقة الخليوي

Microfluidic embodiments of the Campenot chamber have attracted great interest from the neuroscience community. These interconnected co-culture platforms ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

الثقافات شريحة عضوي النمط لدراسة ديناميات دبقية قليلة التغصن وتكون الميالين

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

Investigating Functional Regeneration in Organotypic Spinal Cord Co-cultures Grown on Multi-electrode Arrays

التحقيق التجديد الوظيفي في الحبل الشوكي عضوي النمط المشارك الثقافات نمت على صفائف متعدد القطب

Adult higher vertebrates have a limited potential to recover from spinal cord injury. Recently, evidence emerged that propriospinal connections are a ...

Derivation of Leptomeninges Explant Cultures from Postmortem Human Brain Donors

الاشتقاق الثقافات السحايا الرقيقة يزدرع من تشريح الجهات المانحة الدماغ البشري

Even though great progress has been made in the clinical characterization of Parkinson&#39;s disease, several studies report that the diagnosis of ...

Neuron-Macrophage Co-cultures to Activate Macrophages Secreting Molecular Factors with Neurite Outgrowth Activity

بلعم العصبية الثقافات المشارك لتفعيل الضامة إفراز العوامل الجزيئية مع نشاط ثمرة نورت

There is strong evidence that macrophages can participate in the regeneration or repair of injured nervous system. Here, we describe a protocol in which ...

Preparation and Immunostaining of Myelinating Organotypic Cerebellar Slice Cultures

إعداد و Immunostaining أورجانوتيبيك ميليناتينج شريحة الدماغ الثقافات

In the nervous system, myelin is a complex membrane structure generated by myelinating glial cells, which ensheathes axons and facilitates fast electrical ...