Name: derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues
Uploaded: 2011-08-21T12:00:00
Duration: 18 min 17 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

<p class="jove_content"> Dit project werd gefinancierd door een subsidie ​​van de Multiple Sclerose Vereniging van Canada naar RKRWO is een ontvanger van een studententijd van de Multiple Sclerose Vereniging van Canada. SDR is een ontvanger van Post-Doctoral beurzen van de Multiple Sclerose Vereniging van Canada en de Canadese Institutes of Health Research. </p>

<ol>
	<li>Avellana-Adalid, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+of+rat+oligodendrocyte+progenitors+into+proliferative+"oligospheres"+that+retain+differentiation+potential.">Expansion of rat oligodendrocyte progenitors into proliferative "oligospheres" that retain differentiation potential.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci Res</em>. <b>45</b>, 558-570 (1996).</li><li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue.">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>85</b>, 890-902 (1980).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+death+and+control+of+cell+survival+in+the+oligodendrocyte+lineage.">Cell death and control of cell survival in the oligodendrocyte lineage.</a> <em style='font-style: italic'>Cell</em>. <b>70</b>, 31-46 (1992).</li><li>Chan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NGF+controls+axonal+receptivity+to+myelination+by+Schwann+cells+or+oligodendrocytes.">NGF controls axonal receptivity to myelination by Schwann cells or oligodendrocytes.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>43</b>, 183-1891 (2004).</li><li>Camara, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-mediated+axoglial+interactions+initiate+myelination+in+the+central+nervous+system.">Integrin-mediated axoglial interactions initiate myelination in the central nervous system.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>185</b>, 699-712 (2009).</li><li>Ishibashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+promote+myelination+in+response+to+electrical+impulses.">Astrocytes promote myelination in response to electrical impulses.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>49</b>, 823-832 (2006).</li><li>Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+rat+and+mouse+oligodendrocyte+precursor+cells.">Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Protoc</em>. <b>2</b>, 1044-1051 (2007).</li><li>Pedraza, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production,+characterization,+and+efficient+transfection+of+highly+pure+oligodendrocyte+precursor+cultures+from+mouse+embryonic+neural+progenitors.">Production, characterization, and efficient transfection of highly pure oligodendrocyte precursor cultures from mouse embryonic neural progenitors.</a> <em style='font-style: italic'>Glia</em>. <b>56</b>, 1339-1352 (2008).</li><li>Lewin, G. R., Ritter, A. M., Mendell, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+role+of+nerve+growth+factor+in+the+development+of+myelinated+nociceptors.">On the role of nerve growth factor in the development of myelinated nociceptors.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci</em>. <b>12</b>, 1896-1905 (1992).</li><li>Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+in+vitro+studies+on+the+nerve+growth+factor+(NGF)+requirement+of+neurons.+II.+Sensory+neurons.">Quantitative in vitro studies on the nerve growth factor (NGF) requirement of neurons. II. Sensory neurons.</a> <em style='font-style: italic'>Dev Biol</em>. <b>58</b>, 106-113 (1977).</li></ol>

<p class="jove_content"> Geen belangenconflicten verklaard. </p>

<p class="jove_content"> Dit rapport beschrijft een methode voor het isoleren van muizen-OPC&#39;s voor differentiatie in de OL-verrijkte culturen of OL / DRGN co-culturen. Wanneer alleen gekweekt, de OPCs differentiëren tot MBP <sup>+ ve</sup> OLS, het produceren van myeline-achtige membraneuze vellen. Wanneer toegevoegd aan neurieten bedden DRGN, OLS omhullen de DRGN neurieten met MBP <sup>+ ve</sup> membraan. Dit biedt voordelen voor de onderzoek naar de complexe onderbouwing voor OL-gemedieerde axonale ensheathment. </p><p class="jove_content"> Terwijl van grote waarde, de oprichting van dergelijke culturen is technisch gezien een uitdaging. In het bijzonder veeleisende aspecten omvatten een efficiënte spijsvertering weefsel / dissociatie, het onderhoud van een evenwichtige cultuur media pH en DRGN media veranderingen. Het is belangrijk om te oordelen dat de lengte van de spijsvertering, de hoeveelheid weefsel worden verteerd en de hoeveelheid van fijnwrijving invloed op de effectiviteit en eindresultaat van het weefsel dissociatie. Het is niet ongebruikelijk voor ervaren onderzoekers om een ​​lage cellulaire rendement te verkrijgen uit gedissocieerd zenuwstelsel weefsels. Daarnaast, muizen OPC&#39;s zijn vaak gevoelig voor veranderingen in de pH van de cultuur media, met name onder alkalische omstandigheden. Het onderhoud van culturen op 8,5% CO <sub>2</sub> heeft tot doel dit te voorkomen, omdat OPC&#39;s lijken beter te licht zure omstandigheden tolereren meer dan basic. Met betrekking tot het voeden DRGNs-, media-aanpassingen moeten snel worden uitgevoerd als om niet de neuronen uitdrogen, moet echter worden voorzichtig om niet de zich ontwikkelende neurieten bed verstoren. Abrupte media veranderingen kunnen verjagen de neurieten bed van het substraat, en waarschijnlijk resulteren in de volledige dissociatie van het dekglaasje. </p><p class="jove_content"> De potentiële verdienste van dit model systeem overschaduwt sterk zijn technisch veeleisend karakter. Een voordeel van dit systeem is het gebruik van postnatale muizen voor celkweek afleiding, omzeilen de noodzaak om de voedsters te offeren aan embryonaal weefsel oogst. Een ander voordeel is het ontbreken van een vereiste voor de groei factoren (SBO) voor de uitbreiding van OPCs. Gemengde gliale culturen zorgen voor een omgeving die de verspreiding van OPCs, waarschijnlijk door de aanwezigheid van astrocyte afgeleide trofische factoren ondersteunt. Andere methoden, zoals afleiding via neurospheres <sup>7,8,</sup> vertrouwen op de mitogene eigenschappen van GFS, zoals basic fibroblast groeifactor (bFGF), epidermale groeifactor (EGF) en platelet-derived growth factor (PDGF) voor OPC expansie. Op dezelfde manier, met behulp van postnatale (P5-10) muizen voor DRGNs vermijdt de eis van aanvulling van de cultuur media met een zenuw groeifactor (NGF), een neurotrofe factor die nodig is voor de <em>in vitro</em> embryonale overleving van DRGNs <sup>9, 10.</sup> Het is van belang om te voorkomen dat met behulp van NGF als het negatief van invloed op de capaciteit van myelinating OLS bij gekweekt met DRGNs <sup>4.</sup> Vermijden van het gebruik van de GF-aangevuld met de media ook economische voordelen heeft, omdat deze reagentia worden kostbaar bij gebruik op grote schaal. </p><p class="jove_content"> Misschien wel het belangrijkste voordeel van deze cultuur model is de afleiding van de muis alleen weefsels, en zo de kansen af ​​te leiden zowel de OPC&#39;s en DRGNs uit de grote verscheidenheid van transgene muis lijnen. Dit maakt voor de studie van zowel DRGN en / of OPC-specifieke eigenschappen die myelinisatie regeren. Dit zal vooral van belang voor het ophelderen van de receptor / ligand-interacties reguleren van OL-gemedieerde myelinisatie van axonen. Met al deze techniek is van grote waarde met betrekking tot neurowetenschappelijk onderzoek als gevolg van de applicaties naar het begrijpen van de moleculaire signalen die ten grondslag liggen myelinisatie. </p>

<html><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Product Naam</strong> </td><td> <strong>Vennootschap</strong> </td><td> <strong>Productnummer</strong> </td></tr><tr><td> Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium (DMEM) </td><td> Multicell </td><td> 319 tot 005-CL </td></tr><tr><td> Balanced Salt Hank&#39;s Solution (HBSS) </td><td> Invitrogen </td><td> 14170-112 </td></tr><tr><td> Minimum Essential Media (MEM) </td><td> GIBCO </td><td> 12360-038 </td></tr><tr><td> Foetaal runderserum (FBS) </td><td> GIBCO </td><td> 10091-148 </td></tr><tr><td> Penicilline-streptomycine (Pen / Strep) </td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> Invitrogen </td><td> 35050-061 </td></tr><tr><td> Poly-L-lysine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P2636 </td></tr><tr><td> Bovine Serum Albumine (BSA) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A4503 </td></tr><tr><td> Human merosine gezuiverde eiwit (LN2) </td><td> Millipore </td><td> CC085 </td></tr><tr><td> Recombinant rat ciliaire neurotrofe factor (CNTF) </td><td> PeproTech </td><td> 450-50 </td></tr><tr><td> L-thyroxine </td><td> Biochemika </td><td> 89430 </td></tr><tr><td> Holo-transferrine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T0665 </td></tr><tr><td> B27 supplement </td><td> GIBCO </td><td> 0080085-SA </td></tr><tr><td> Runderen insuline </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> 3,3 &#39;,5-Triiodo-L-thyronine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> Progesteron </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P8783 </td></tr><tr><td> Putrescine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P7505 </td></tr><tr><td> Natrium Seleniet </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S5261 </td></tr><tr><td> 5-fluor-2&#39;-deoxyuridine (FuDR) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> F0503 </td></tr><tr><td> Papaïne oplossing </td><td> Worthington </td><td> LS003126 </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> ROCHE </td><td> 1010159001 </td></tr><tr><td> L-cysteïne </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> C7352 </td></tr><tr><td> 24-well kultuur gerechten </td><td> Cellstar </td><td> 662-160 </td></tr><tr><td> T25-weefselkweek flessen met ontluchting dop </td><td> Corning </td><td> 430639 </td></tr><tr><td> 10 cm weefselkweek gerechten </td><td> Corning </td><td> 430167 </td></tr><tr><td> 10 cm petrischaal </td><td> Fisher Scientific </td><td> 0875713 </td></tr><tr><td> Collagenase A </td><td> ROCHE </td><td> 103578 </td></tr><tr><td> CellTrics 50 um filter (optioneel) </td><td> Partec </td><td> 04-004-2327 </td></tr><tr><td> Myeline Basic Protein (MBP) antilichaam </td><td> AbD Serotec </td><td> MCA409S </td></tr><tr><td> NG2 antilichaam </td><td> Millipore </td><td> AB5320 </td></tr><tr><td> Myeline-Associated glycoproteïne (MAG) antilichaam </td><td> Millipore </td><td> MAB1567 </td></tr><tr><td> 2 &#39;, 3&#39;-cyclische nucleotide 3&#39;-fosfodiësterase (CNP) antilichaam </td><td> Covance </td><td> SMI-91R-100 </td></tr><tr><td> Actine pan Ab-5 antilichaam </td><td> Fitzgerald </td><td> 10R-A106AX </td></tr><tr><td> Neurofilament-200 (NF) antilichaam </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> N4142 </td></tr><tr><td> Tubuline beta-3-keten (Tuj1) antilichaam </td><td> Millipore </td><td> MAB5544 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 488 geit anti-konijn IgG (H + L) secundair antilichaam </td><td> Invitrogen </td><td> A11008 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 555 geit anti-muis IgG (H + L) secundair antilichaam </td><td> Invitrogen </td><td> A21422 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 647 geiten-anti-rat (IgG) (H + L) secundair antilichaam </td><td> Invitrogen </td><td> A21247 </td></tr><tr><td> Geit anti-muis IgG (H + L)-HRP geconjugeerd secundair antilichaam </td><td> BioRad </td><td> 170-6516 </td></tr><tr><td> Geit-anti-rat IgG (H + L)-HRP geconjugeerd secundair antilichaam </td><td> Santa Cruz Biotechnology </td><td> SC-2065 </td></tr><tr><td> 4 &#39;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D9542 </td></tr></tbody></table><p class="jove_step"> Media Recepten </p><p class="jove_content"> <strong>100X OL-Supplement *</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Bedrag toe te voegen</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 100 ml </td></tr><tr><td> BSA </td><td> 1,02 g </td></tr><tr><td> Progesteron </td><td> 0,6 mg </td></tr><tr><td> Putrescine </td><td> 161 mg </td></tr><tr><td> Natrium Seleniet </td><td> 0,05 mg </td></tr><tr><td> 3,3 &#39;,5-Triiodo-L-thyronine </td><td> 4 mg </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> * Bewaren bij -80 ° C in 250 ui aliquots </p>t &quot;&gt; <strong>OL media</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Bedrag toe te voegen</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 23,75 mL </td></tr><tr><td> 100X OL-Supplement </td><td> 250 ui </td></tr><tr><td> Runderen insuline (van 1 mg / ml voorraad) </td><td> 125 uL </td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> 250 ui </td></tr><tr><td> Holo-transferrine (van 33 mg / ml voorraad) </td><td> 37,5 uL </td></tr><tr><td> B27 Supplement </td><td> 500 pL </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 125 uL </td></tr><tr><td> CNTF (van 50 ng / ul voorraad) </td><td> 25 il </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>Gemengde gliale cultuur media (gemaakt in DMEM)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Uiteindelijke concentratie</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> Pen / Strep (0,33% uit voorraad) </td><td> 33 eenheden / ml penicilline en 33 ug / ml streptomycine </td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> 1% </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>DRGN media (gemaakt in DMEM)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Uiteindelijke concentratie</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> Pen / Strep (1% uit voorraad) </td><td> 100 eenheden / ml penicilline en 100 ug / ml streptomycine </td></tr></tbody></table><p class="jove_step"> Spijsvertering Oplossing Recepten: </p><p class="jove_content"> <strong>OPC papaïne oplossing (opgemaakt in MEM)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Uiteindelijke concentratie</strong> </td></tr><tr><td> Papaïne oplossing </td><td> 1,54 mg / ml </td></tr><tr><td> L-cysteïne </td><td> 360 ug / ml </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> 60 ng / mL </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>DRG papaïne oplossing (opgemaakt in HBSS)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Uiteindelijke concentratie</strong> </td></tr><tr><td> Papaïne </td><td> 1,54 mg / ml </td></tr><tr><td> L-cysteïne </td><td> 360 ug / ml </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>DRG Collagenase Een oplossing (opgemaakt in HBSS)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Bestanddeel</strong> </td><td> <strong>Uiteindelijke concentratie</strong> </td></tr><tr><td> Collagenase A </td><td> 4 mg / ml </td></tr></tbody></table>

derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues

<p class="jove_content"> Het identificeren van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen OL ontwikkeling is niet alleen van cruciaal belang voor het bevorderen van onze kennis van OL biologie, maar heeft ook implicaties voor het begrijpen van de pathogenese van demyeliniserende ziekten zoals multiple sclerose (MS). Ontwikkeling van de cellen wordt vaak bestudeerd met primaire celcultuur modellen. Primaire celcultuur vergemakkelijkt de evaluatie van een bepaald celtype door middel van een gecontroleerde omgeving, vrij van de externe variabelen die aanwezig zijn <em>in vivo.</em> Terwijl de OL culturen afkomstig van ratten hebben een grote hoeveelheid inzicht in de OL biologie, heeft vergelijkbare pogingen tot oprichting van OL culturen van muizen is voldaan met grote obstakels. Ontwikkelen van methoden om de cultuur van muizen primaire OLS is noodzakelijk om te profiteren van de beschikbare transgene muis lijnen. </p><p class="jove_content"> Meerdere methoden voor de extractie van OPC&#39;s van knaagdieren weefsel zijn beschreven, variërend van neurosphere afleiding, differentiële hechting zuivering en immunopurification <sup>1-3.</sup> Hoewel veel methoden bieden succes, de meeste vereisen uitgebreide cultuur tijden en / of dure apparatuur / reagentia. Om dit te omzeilen, is zuiverend OPC&#39;s van muizen-weefsel met een aanpassing van de methode die oorspronkelijk beschreven door McCarthy &amp; de Vellis <sup>2</sup> de voorkeur. Deze methode houdt in het fysiek scheiden van OPC&#39;s uit een gemengde cultuur gliale afgeleid van neonatale knaagdieren cortex. Het resultaat is een gezuiverd OPC bevolking die kan worden onderscheiden in een OL-verrijkte cultuur. Deze aanpak is te wijten aan de relatief korte tijd de cultuur en de onnodige vereiste voor groeifactoren of immunopanning antilichamen aantrekkelijk. </p><p class="jove_content"> Tijdens het verkennen van de mechanismen van OL ontwikkeling in een gezuiverde cultuur is informatief, is het niet de meest fysiologisch relevante omgeving voor de beoordeling van myelineschede formatie. Co-kweken OLS met neuronen zou geven inzicht in de moleculaire onderbouwing reguleren OL-gemedieerde myelinisatie van axonen. Voor veel OL / neuron co-cultuur studies, hebben dorsale wortel ganglion neuronen (DRGNs) bewezen dat het neuron soort keuze. Ze zijn ideaal voor co-cultuur met OLS vanwege hun gemak van de winning, minimale hoeveelheid van vervuilende cellen en de vorming van dichte neurieten bedden. Terwijl studies met rat / muis myelinating xenocultures zijn gepubliceerd <sup>4-6,</sup> een methode voor de afleiding van dergelijke OL / DRGN myelinating co-culturen van de post-natale murine weefsel is niet beschreven. Hier presenteren wij gedetailleerde methoden over hoe je effectief te produceren dergelijke culturen, samen met voorbeelden van de verwachte resultaten. Deze methoden zijn nuttig voor de aanpak van vraagstukken met betrekking tot OL ontwikkeling / myelinating functie en zijn nuttige instrumenten op het gebied van de neurowetenschappen. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues

<p class="jove_content">Dit artikel beschrijft methoden voor het afleiden van verrijkte populaties van muizen oligodendrocyt voorloper cellen (OPC&#39;s) in het primair cultuur, die een onderscheid te rijpen oligodendrocyten (OLS) te produceren. Daarnaast is dit rapport beschrijft technieken te produceren voor muriene myelinating co-culturen door zaaien muis OPC&#39;s op een bedje van neurieten muis dorsale wortel ganglion neuronen (DRGNs).</p>

Afleiding van Verrijkt oligodendrocyt Culturen en oligodendrocyt / Neuron Myelinating co-culturen van Post-natale Murine Tissues

Identifying the molecular mechanisms underlying OL development is not only critical to furthering our knowledge of OL biology, but also has implications ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures

Cryopreservatie van Corticale Tissue Blocks voor de generatie van hoogverrijkt Neuronale culturen

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly ...

Derivation of Glial Restricted Precursors from E13 mice

Afleiding van gliale Beperkte Voorlopers van de E13 muizen

This is a protocol for derivation of glial restricted precursor (GRP) cells from the spinal cord of E13 mouse fetuses. These cells are early precursors ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

Progenitor afgeleide oligodendrocyt Cultuur System van menselijke foetale hersenen

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from <em>Xenopus</em> Nerve-muscle Co-cultures

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Gelijktijdig Pre-en post-synaptische Elektrofysiologische Opnemen vanaf<em&gt; Xenopus</em&gt; Zenuw-spier Co-culturen

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Preparation of Neuronal Co-cultures with Single Cell Precision

Voorbereiding van Neuronale Co-culturen met Single Cell Precision

Microfluidic embodiments of the Campenot chamber have attracted great interest from the neuroscience community. These interconnected co-culture platforms ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

Organotypische Slice culturen om te studeren Oligodendrocyte Dynamics en Myelination

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

Investigating Functional Regeneration in Organotypic Spinal Cord Co-cultures Grown on Multi-electrode Arrays

Onderzoek van functionele Regeneratie in Organotypische Spinal Cord Co-culturen Grown on Multi-elektrode arrays

Adult higher vertebrates have a limited potential to recover from spinal cord injury. Recently, evidence emerged that propriospinal connections are a ...

Derivation of Leptomeninges Explant Cultures from Postmortem Human Brain Donors

Afleiding van leptomeningen Explantatie culturen van postmortaal Human Brain Donors

Even though great progress has been made in the clinical characterization of Parkinson&#39;s disease, several studies report that the diagnosis of ...

Neuron-Macrophage Co-cultures to Activate Macrophages Secreting Molecular Factors with Neurite Outgrowth Activity

Neuron-Macrophage co culturen te activeren van macrofagen afscheidende moleculaire factoren met Neurite uitgroei activiteit

There is strong evidence that macrophages can participate in the regeneration or repair of injured nervous system. Here, we describe a protocol in which ...

Preparation and Immunostaining of Myelinating Organotypic Cerebellar Slice Cultures

Voorbereiding en immunokleuring van Myelinating Organotypic cerebellaire segment culturen

In the nervous system, myelin is a complex membrane structure generated by myelinating glial cells, which ensheathes axons and facilitates fast electrical ...