Name: derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues
Uploaded: 2011-08-21T12:00:00
Duration: 18 min 17 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> פרויקט זה מומן על ידי מענק מטעם האגודה לטרשת נפוצה בקנדה RKRWO הוא מקבל תעודת סטודנט מטעם האגודה לטרשת נפוצה בקנדה. SDR הוא הנמען של פוסט דוקטורט של האגודה לטרשת נפוצה בקנדה קנדה המכונים לחקר בריאות. </p>

<ol>
	<li>Avellana-Adalid, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+of+rat+oligodendrocyte+progenitors+into+proliferative+"oligospheres"+that+retain+differentiation+potential.">Expansion of rat oligodendrocyte progenitors into proliferative "oligospheres" that retain differentiation potential.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci Res</em>. <b>45</b>, 558-570 (1996).</li><li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue.">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>85</b>, 890-902 (1980).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+death+and+control+of+cell+survival+in+the+oligodendrocyte+lineage.">Cell death and control of cell survival in the oligodendrocyte lineage.</a> <em style='font-style: italic'>Cell</em>. <b>70</b>, 31-46 (1992).</li><li>Chan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NGF+controls+axonal+receptivity+to+myelination+by+Schwann+cells+or+oligodendrocytes.">NGF controls axonal receptivity to myelination by Schwann cells or oligodendrocytes.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>43</b>, 183-1891 (2004).</li><li>Camara, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-mediated+axoglial+interactions+initiate+myelination+in+the+central+nervous+system.">Integrin-mediated axoglial interactions initiate myelination in the central nervous system.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>185</b>, 699-712 (2009).</li><li>Ishibashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+promote+myelination+in+response+to+electrical+impulses.">Astrocytes promote myelination in response to electrical impulses.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>49</b>, 823-832 (2006).</li><li>Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+rat+and+mouse+oligodendrocyte+precursor+cells.">Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Protoc</em>. <b>2</b>, 1044-1051 (2007).</li><li>Pedraza, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production,+characterization,+and+efficient+transfection+of+highly+pure+oligodendrocyte+precursor+cultures+from+mouse+embryonic+neural+progenitors.">Production, characterization, and efficient transfection of highly pure oligodendrocyte precursor cultures from mouse embryonic neural progenitors.</a> <em style='font-style: italic'>Glia</em>. <b>56</b>, 1339-1352 (2008).</li><li>Lewin, G. R., Ritter, A. M., Mendell, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+role+of+nerve+growth+factor+in+the+development+of+myelinated+nociceptors.">On the role of nerve growth factor in the development of myelinated nociceptors.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci</em>. <b>12</b>, 1896-1905 (1992).</li><li>Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+in+vitro+studies+on+the+nerve+growth+factor+(NGF)+requirement+of+neurons.+II.+Sensory+neurons.">Quantitative in vitro studies on the nerve growth factor (NGF) requirement of neurons. II. Sensory neurons.</a> <em style='font-style: italic'>Dev Biol</em>. <b>58</b>, 106-113 (1977).</li></ol>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> אין ניגודי אינטרסים הכריז. </p>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> דו&quot;ח זה מתאר שיטה לבידוד OPCs Murine לבידול בתרבויות OL מועשר או OL / DRGN שיתוף תרבויות. כאשר בתרבית לבד, OPCs להתמיין MBP <sup>+</sup> OLS <sup>יש,</sup> ייצור המיאלין כמו סדינים קרומי. כאשר נוספו DRGN מיטות neurite, OLS ללפף neurites DRGN עם MBP <sup>+</sup> ממברנה <sup>יש.</sup> מודל זה יתרונות חקירת היסודות מורכבים השולטים OL בתיווך ensheathment axonal. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד בעל ערך רב, את הקמתה של תרבויות כאלה הוא מאתגר מבחינה טכנית. בפרט, בדרישה לכלול את ההיבטים לעיכול רקמת יעיל / דיסוציאציה, ותחזוקה של תרבות התקשורת pH מאוזן, DRGN שינויים התקשורת. חשוב לקחת בחשבון את אורך מערכת העיכול, כמות רקמת מתעכל וכמות טחינה דקה משפיע על התוצאה היעילות בסופו של ניתוק הרקמה. אין זה יוצא דופן עבור חוקרים מנוסים כדי להשיג תשואות הסלולר נמוך מ ניתק ברקמות מערכת העצבים. בנוסף, OPCs Murine נוטים להיות רגישים לשינויים ב-pH של התקשורת בתרבות, במיוחד בתנאים בסיסיים. תחזוקה של תרבויות ב 8.5% CO <sub>2</sub> נועד למנוע זאת, מאז OPCs נראה טוב יותר לסבול תנאים חומציים קצת יותר בסיסי. באשר DRGNs האכלה, שינויים התקשורת חייב להתבצע מהר ככל שלא ליבש את הנוירונים, לעומת זאת, חייב להיות עדין לא לשבש את המיטה neurite מתפתחות. פתאומית שינויים התקשורת עשוי לסלק את המיטה neurite מן המצע, והתוצאה סביר ניתוק מוחלט מן coverslip. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> בזכות הפוטנציאל של מערכת מודל זה מאפיל מאוד תובענית מבחינה טכנית הטבע שלה. אחד היתרונות של המערכת הזו הוא השימוש שלאחר הלידה עכברים עבור הגזירה תרבית תאים, עקיפת הצורך להקריב את הנקבות לרבייה לקצור רקמה עוברית. יתרון נוסף הוא היעדר דרישה גורמי גדילה (GFS) להרחבת OPCs. תרבויות גליה מעורב לספק סביבה תומכת הפצת OPCs, כנראה בשל נוכחותם של astrocyte הנגזרות גורמים trophic. שיטות אחרות, כגון גזירה באמצעות neurospheres <sup>7,8,</sup> להסתמך על המאפיינים mitogenic של GFS כגון גורם גדילה פיברובלסטים בסיסי (bFGF), גורם הגדילה באפידרמיס (EGF) ו טסיות הנגזרות גורם הגדילה (PDGF) להרחבת OPC. באופן דומה, תוך שימוש לאחר הלידה (P5-10) עכברים עבור DRGNs ימנע את הדרישה להשלים את תרבות התקשורת עם גורם הגדילה העצבי (NGF), גורם neurotrophic הנדרשת עבור <em>ההישרדות</em> של DRGNs עובריים <em>במבחנה</em> <sup>9, 10.</sup> מעניין להימנע משימוש NGF כפי שהוא משפיע לרעה על יכולת myelinating של OLS כאשר בתרבית עם DRGNs <sup>4.</sup> הימנעות משימוש GF-שיושלם התקשורת יש גם יתרונות כלכליים, כמו ריאגנטים אלה הופכים יקרים כאשר נעשה שימוש בקנה מידה גדול. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> אולי היתרון החשוב ביותר של מודל זה בתרבות היא גזירה מן העכבר בלבד רקמות, ובכך לספק את ההזדמנויות לגזור הן OPCs ו DRGNs ממגוון רחב של קווי עכבר מהונדס. זה מאפשר לימוד והן DRGN / או OPC ספציפיים המאפיינים השולטים myelination. זה יהיה חשוב במיוחד עבור הבהרת קולטן / אינטראקציות ליגנד ויסות OL בתיווך myelination של אקסונים. בסך הכל, טכניקה זו היא בעלת ערך רב לגבי מחקר מדעי המוח עקב היישומים שלה לקראת הבנה רמזים המולקולריים שבבסיס myelination. </p>

<html><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>שם המוצר</strong> </td><td> <strong>חברה</strong> </td><td> <strong>מוצר מספר</strong> </td></tr><tr><td> Dulbecco של הנשר השתנה בינוני (DMEM) </td><td> Multicell </td><td> 319-005-CL </td></tr><tr><td> האנק של פתרון מאוזן מלח (HBSS) </td><td> Invitrogen </td><td> 14170-112 </td></tr><tr><td> מדיה Essential Minimum (ממ) </td><td> GIBCO </td><td> 12360-038 </td></tr><tr><td> עוברית שור סרום (FBS) </td><td> GIBCO </td><td> 10091-148 </td></tr><tr><td> פניצילין, סטרפטומיצין (פן / סטרפטוקוקוס) </td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> Invitrogen </td><td> 35050-061 </td></tr><tr><td> פולי-L-ליזין </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> P2636 </td></tr><tr><td> שור סרום אלבומין (BSA) </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> A4503 </td></tr><tr><td> האדם merosin מטוהרים חלבון (LN2) </td><td> Millipore </td><td> CC085 </td></tr><tr><td> רקומביננטי neurotrophic ריסי חולדה גורם (CNTF) </td><td> PeproTech </td><td> 450-50 </td></tr><tr><td> L-תירוקסין </td><td> Biochemika </td><td> 89430 </td></tr><tr><td> הולו-transferrin </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> T0665 </td></tr><tr><td> תוסף B27 </td><td> GIBCO </td><td> 0080085-SA </td></tr><tr><td> שור אינסולין </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> 3,3 &quot;,5-Triiodo-L-thyronine </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> הפרוגסטרון </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> P8783 </td></tr><tr><td> Putrescine </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> P7505 </td></tr><tr><td> נתרן סלניום </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> S5261 </td></tr><tr><td> 5-Fluoro-2&#39;-deoxyuridine (FuDR) </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> F0503 </td></tr><tr><td> Papain פתרון </td><td> וורטינגטון </td><td> LS003126 </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> רוש </td><td> 1010159001 </td></tr><tr><td> L-ציסטאין </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> C7352 </td></tr><tr><td> 24 גם בתרבית רקמה מנות </td><td> Cellstar </td><td> 662-160 </td></tr><tr><td> צלוחיות T25-רקמות תרבות עם מכסה האוורור </td><td> קורנינג </td><td> 430639 </td></tr><tr><td> 10 רקמת ס&quot;מ תרבות מנות </td><td> קורנינג </td><td> 430167 </td></tr><tr><td> 10 ס&quot;מ צלחת פטרי </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 0875713 </td></tr><tr><td> Collagenase </td><td> רוש </td><td> 103578 </td></tr><tr><td> CellTrics 50 מיקרומטר לסנן (לא חובה) </td><td> PARTEC </td><td> 04-004-2327 </td></tr><tr><td> המיאלין בסיסי חלבון (MBP) נוגדן </td><td> עבד Serotec </td><td> MCA409S </td></tr><tr><td> NG2 נוגדן </td><td> Millipore </td><td> AB5320 </td></tr><tr><td> המיאלין-Associated (הפצ&quot;ר) גליקופרוטאין נוגדן </td><td> Millipore </td><td> MAB1567 </td></tr><tr><td> 2 &#39;, 3&#39;-מחזורי-נוקלאוטיד 3&#39;-phosphodiesterase (CNP) נוגדן </td><td> Covance </td><td> SMI-91R-100 </td></tr><tr><td> אקטין מחבת Ab-5 נוגדן </td><td> פיצג&#39;רלד </td><td> 10R-A106AX </td></tr><tr><td> Neurofilament-200 (NF) נוגדן </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> N4142 </td></tr><tr><td> בטא 3 טובולין שרשרת (Tuj1) נוגדן </td><td> Millipore </td><td> MAB5544 </td></tr><tr><td> אלקסה פלואוריד 488 נגד ארנב עז IgG (H + L) נוגדנים משני </td><td> Invitrogen </td><td> A11008 </td></tr><tr><td> אלקסה פלואוריד 555 אנטי עכבר עז IgG (H + L) נוגדנים משני </td><td> Invitrogen </td><td> A21422 </td></tr><tr><td> אלקסה פלואוריד 647 עיזים נגד חולדה (IgG) (H + L) נוגדנים משני </td><td> Invitrogen </td><td> A21247 </td></tr><tr><td> אנטי עכבר עיזים IgG (H + L)-HRP נוגדנים משני מצומדות </td><td> BioRad </td><td> 170-6516 </td></tr><tr><td> אנטי עכברוש עיזים IgG (H + L)-HRP נוגדנים משני מצומדות </td><td> סנטה קרוז ביוטכנולוגיה </td><td> SC-2065 </td></tr><tr><td> 4 &#39;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> D9542 </td></tr></tbody></table><p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> Media מתכונים </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>100x-OL מוסף *</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>סכום להוסיף</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 100 מ&quot;ל </td></tr><tr><td> BSA </td><td> 1.02 גר &#39; </td></tr><tr><td> הפרוגסטרון </td><td> 0.6 מ&quot;ג </td></tr><tr><td> Putrescine </td><td> 161 מ&quot;ג </td></tr><tr><td> נתרן סלניום </td><td> 0.05 מ&quot;ג </td></tr><tr><td> 3,3 &quot;,5-Triiodo-L-thyronine </td><td> 4 מ&quot;ג </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> * חנות ב -80 מעלות צלזיוס ב 250 aliquots μL </p>t &quot;&gt; <strong>מדיה OL</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>סכום להוסיף</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 23.75 מ&quot;ל </td></tr><tr><td> 100x-OL מוסף </td><td> 250 μL </td></tr><tr><td> אינסולין שור (ממלאי מ&quot;ג / מ&quot;ל ​​1) </td><td> 125 μL </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> 250 μL </td></tr><tr><td> הולו-transferrin (ממלאי מ&quot;ג / מ&quot;ל ​​33) </td><td> 37.5 μL </td></tr><tr><td> B27 מוסף </td><td> 500 μL </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 125 μL </td></tr><tr><td> CNTF (ממלאי ng / μL 50) </td><td> 25 μL </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>מעורבות בתרבות התקשורת גליה (מורכב ב DMEM)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>הריכוז הסופי</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> פן / סטרפטוקוקוס (0.33% מהמלאי) </td><td> 33 יחידות / מ&quot;ל ​​ו - פניצילין 33 מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​סטרפטומיצין </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> 1% </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>DRGN מדיה (מורכב ב DMEM)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>הריכוז הסופי</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> פן / סטרפטוקוקוס (1% מן המניות) </td><td> 100 יחידות / מ&quot;ל ​​ו - 100 מיקרוגרם פניצילין / mL סטרפטומיצין </td></tr></tbody></table><p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> הפתרון עיכול מתכונים: </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>OPC papain פתרון (מורכב מ ב)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>הריכוז הסופי</strong> </td></tr><tr><td> Papain פתרון </td><td> 1.54 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td></tr><tr><td> L-ציסטאין </td><td> 360 מיקרוגרם / מ&quot;ל </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> 60 מיקרוגרם / מ&quot;ל </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>DRG papain פתרון (מורכב ב HBSS)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>הריכוז הסופי</strong> </td></tr><tr><td> Papain </td><td> 1.54 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td></tr><tr><td> L-ציסטאין </td><td> 360 מיקרוגרם / מ&quot;ל </td></tr></tbody></table><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <strong>DRG collagenase פתרון (מורכב ב HBSS)</strong> </p><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> <strong>מרכיב</strong> </td><td> <strong>הריכוז הסופי</strong> </td></tr><tr><td> Collagenase </td><td> 4 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td></tr></tbody></table>

derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> זיהוי המנגנונים המולקולריים שבבסיס פיתוח OL לא קריטי רק כדי לקדם את הידע שלנו על ביולוגיה OL, אבל יש גם השלכות להבנת בפתוגנזה של מחלות demyelinating כגון טרשת נפוצה (MS). פיתוח נייד הוא למד בדרך כלל עם מודלים תרבות העיקרית התא. תרבית תאים ראשונית מאפשר הערכה של סוג תא נתון על ידי מתן סביבה מבוקרת, ללא המשתנים זרים שנמצאים <em>in vivo.</em> בעוד תרבויות OL נגזר חולדות סיפקו כמות אדירה של תובנה בביולוגיה OL, מאמצים דומים הקמת תרבויות OL מעכברים כבר נפגש עם המכשולים העיקריים. פיתוח שיטות OLS תרבות Murine העיקרית היא הכרחית על מנת לנצל את קווי זמין עכבר מהונדס. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> מספר שיטות להפקת OPCs מרקמות מכרסם תוארו, החל neurosphere גזירה, הדבקה טיהור דיפרנציאלי immunopurification <sup>1-3.</sup> בעוד שיטות רבות מציעות הצלחה, רוב דורשות פעמים תרבות ענפה ו / או ציוד יקר / ריאגנטים. כדי לעקוף זאת, טיהור OPCs מרקמות Murine עם הסתגלות של השיטה המתוארת במקור על ידי מקארתי &amp; דה Vellis <sup>2</sup> היא העדיפה. שיטה זו כרוכה פיזית OPCs הפרדת מתרבות גליה מעורבת שמקורם בקליפת המוח מכרסם הילוד. התוצאה היא האוכלוסייה OPC מטוהרים שיכול להיות מובחן לתוך התרבות OL מועשר. גישה זו מערערת בשל הזמן הקצר יחסית התרבות הדרישה מיותר עבור גורמי גדילה או נוגדנים immunopanning. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד לחקור את המנגנונים של פיתוח OL בתרבות מטוהרים הוא אינפורמטיבי, הוא אינו מספק את הסביבה הרלוונטיות ביותר מבחינה פיזיולוגית להערכת היווצרות המיאלין נדן. Co-culturing OLS עם הנוירונים יעניק תובנה הבסיס המולקולרי ויסות OL בתיווך myelination של אקסונים. עבור רבים OL / נוירון שיתוף תרבות מחקרים, גנגליון השורש הגבי נוירונים (DRGNs) הוכיחו להיות סוג של נוירון בחירה. הם אידיאליים עבור תרבות בשיתוף עם OLS בשל הקלות שלהם ממוצא, כמות מזערית של זיהום תאים, היווצרות של מיטות neurite צפופה. בעוד שמחקרים באמצעות עכברוש / עכבר myelinating xenocultures פורסמו <sup>4-6,</sup> בשיטה של גזירת כזה OL / DRGN myelinating שיתוף תרבויות מרקמות שלאחר הלידה Murine לא תוארה. כאן אנו מציגים שיטות מפורטות כיצד ביעילות תרבויות כאלה, יחד עם דוגמאות של התוצאות הצפויות. שיטות אלו יעילים לטיפול השאלות הרלוונטיות לפיתוח OL / פונקציה myelinating, הם כלים שימושיים בתחום מדעי המוח. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues

<p class="jove_content">מאמר זה מתאר שיטות להפיק אוכלוסיות מועשר Murine של תאים מבשר oligodendrocyte (OPCs) בתרבות העיקרי, אשר להבדיל לייצר oligodendrocytes בוגרת (OLS). בנוסף, דו&quot;ח זה מתאר את טכניקות כדי לייצר Murine myelinating שיתוף תרבויות על ידי זריעת OPCs העכבר על המיטה neurite של הגב עכבר שורש עצב הגנגליון (DRGNs).</p>

גזירת תרבויות Oligodendrocyte מועשר Neuron Oligodendrocyte / Myelinating משותף תרבויות מן שלאחר הלידה רקמות Murine

Identifying the molecular mechanisms underlying OL development is not only critical to furthering our knowledge of OL biology, but also has implications ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures

Cryopreservation של בלוקים רקמות קליפתיים לדור תרבויות העצבית מועשר

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly ...

Derivation of Glial Restricted Precursors from E13 mice

הגזירה של מבשרי מוגבלים גליה מ E13 עכברים

This is a protocol for derivation of glial restricted precursor (GRP) cells from the spinal cord of E13 mouse fetuses. These cells are early precursors ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

מערכת מוליד-נגזר Oligodendrocyte תרבות ממוח העוברי של אדם

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from <em>Xenopus</em> Nerve-muscle Co-cultures

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

סימולטני טרום והקלטת אלקטרו פוסט סינפטי מ<em&gt; Xenopus</em&gt; עצבי שרירי Co-תרבויות

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Preparation of Neuronal Co-cultures with Single Cell Precision

הכנת עצבית שיתוף תרבויות עם Precision תא בודד

Microfluidic embodiments of the Campenot chamber have attracted great interest from the neuroscience community. These interconnected co-culture platforms ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

תרבויות Organotypic Slice ללמוד oligodendrocyte Dynamics וmyelination

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

Investigating Functional Regeneration in Organotypic Spinal Cord Co-cultures Grown on Multi-electrode Arrays

חוקר התחדשות פונקציונלית בחוט השדרה שיתוף תרבויות Organotypic גדלו על מערכים רב-אלקטרודה

Adult higher vertebrates have a limited potential to recover from spinal cord injury. Recently, evidence emerged that propriospinal connections are a ...

Derivation of Leptomeninges Explant Cultures from Postmortem Human Brain Donors

תורם גזירת תרבויות Leptomeninges explant מן לאחר מות המוח האנושי

Even though great progress has been made in the clinical characterization of Parkinson&#39;s disease, several studies report that the diagnosis of ...

Neuron-Macrophage Co-cultures to Activate Macrophages Secreting Molecular Factors with Neurite Outgrowth Activity

נוירון-מקרופאג תרבויות שותפה להפעלת מקרופאגים הפרשת גורמים מולקולרית עם פעילות תוצר Neurite

There is strong evidence that macrophages can participate in the regeneration or repair of injured nervous system. Here, we describe a protocol in which ...

Preparation and Immunostaining of Myelinating Organotypic Cerebellar Slice Cultures

Immunostaining של Myelinating Organotypic פרוסה אסטרוציטומה תרבויות והכנה

In the nervous system, myelin is a complex membrane structure generated by myelinating glial cells, which ensheathes axons and facilitates fast electrical ...