Name: derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues
Uploaded: 2011-08-21T12:00:00
Duration: 18 min 17 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

<p class="jove_content"> Projektet finansierades av ett bidrag från Multiple Sclerosis Society of Canada till RKRWO är mottagare av ett utbildningsbidrag från Multiple Sclerosis Society of Canada. SDR är en mottagare postdoktorala stipendier från Multiple Sclerosis Society of Canada och den kanadensiska Institutes of Health Research. </p>

<ol>
	<li>Avellana-Adalid, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+of+rat+oligodendrocyte+progenitors+into+proliferative+"oligospheres"+that+retain+differentiation+potential.">Expansion of rat oligodendrocyte progenitors into proliferative "oligospheres" that retain differentiation potential.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci Res</em>. <b>45</b>, 558-570 (1996).</li><li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue.">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>85</b>, 890-902 (1980).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+death+and+control+of+cell+survival+in+the+oligodendrocyte+lineage.">Cell death and control of cell survival in the oligodendrocyte lineage.</a> <em style='font-style: italic'>Cell</em>. <b>70</b>, 31-46 (1992).</li><li>Chan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NGF+controls+axonal+receptivity+to+myelination+by+Schwann+cells+or+oligodendrocytes.">NGF controls axonal receptivity to myelination by Schwann cells or oligodendrocytes.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>43</b>, 183-1891 (2004).</li><li>Camara, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-mediated+axoglial+interactions+initiate+myelination+in+the+central+nervous+system.">Integrin-mediated axoglial interactions initiate myelination in the central nervous system.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>185</b>, 699-712 (2009).</li><li>Ishibashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+promote+myelination+in+response+to+electrical+impulses.">Astrocytes promote myelination in response to electrical impulses.</a> <em style='font-style: italic'>Neuron</em>. <b>49</b>, 823-832 (2006).</li><li>Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+rat+and+mouse+oligodendrocyte+precursor+cells.">Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Protoc</em>. <b>2</b>, 1044-1051 (2007).</li><li>Pedraza, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production,+characterization,+and+efficient+transfection+of+highly+pure+oligodendrocyte+precursor+cultures+from+mouse+embryonic+neural+progenitors.">Production, characterization, and efficient transfection of highly pure oligodendrocyte precursor cultures from mouse embryonic neural progenitors.</a> <em style='font-style: italic'>Glia</em>. <b>56</b>, 1339-1352 (2008).</li><li>Lewin, G. R., Ritter, A. M., Mendell, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+role+of+nerve+growth+factor+in+the+development+of+myelinated+nociceptors.">On the role of nerve growth factor in the development of myelinated nociceptors.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci</em>. <b>12</b>, 1896-1905 (1992).</li><li>Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+in+vitro+studies+on+the+nerve+growth+factor+(NGF)+requirement+of+neurons.+II.+Sensory+neurons.">Quantitative in vitro studies on the nerve growth factor (NGF) requirement of neurons. II. Sensory neurons.</a> <em style='font-style: italic'>Dev Biol</em>. <b>58</b>, 106-113 (1977).</li></ol>

<p class="jove_content"> Inga intressekonflikter deklareras. </p>

<p class="jove_content"> Denna rapport beskriver en metod för att isolera murina OPCs för differentiering i OL-berikade kulturer eller OL / DRGN co-kulturer. När odlade Enbart OPCs differentiera till MBP <sup>+ ve</sup> Ols, som producerar myelin-liknande membranös ark. När läggs till DRGN neurite sängar, OLS HÖLJA IN den DRGN neurites med MBP <sup>+ ve</sup> membran. Denna modell fördelar undersökningen av de komplexa underbyggnaden för OL-medierad axonal ensheathment. </p><p class="jove_content"> Medan av stort värde, är inrättandet av sådana kulturer tekniskt utmanande. Särskilt krävande aspekter inkluderar effektiva vävnad matsmältning / dissociation, underhåll av balanserade odlingsmedia pH och DRGN medier förändringar. Det är viktigt att tänka på att längden på matsmältningen, är mycket vävnad smält och mängden trituration påverkar effekten och slutresultatet av vävnadsdissociering. Det är inte ovanligt för erfarna forskare att få låga cellulära avkastningen från dissocierade nervsystemet vävnader. Dessutom murina OPCs tenderar att vara känsliga för förändringar i pH-värdet i kultur medierna, särskilt under alkaliska förhållanden. Underhållet av kulturer på 8,5% CO <sub>2</sub> syftar till att förebygga detta, eftersom OPCs verkar bättre tolerera något sura förhållanden över grundläggande. När det gäller utfodring DRGNs, måste medierna förändringar ske snabbt för att inte uttorka nervceller måste dock vara försiktig så att inte störa den utvecklingen neurite sängen. Plötsliga medier förändringar kan lösgöra neurite sängen från underlaget, och sannolikt leda till dess fullständiga avståndstagande från täckglas. </p><p class="jove_content"> Den potentiella förtjänsten av detta modellsystem överskuggar kraftigt den tekniskt krävande natur. En fördel med detta system är att använda postnatala möss i cellodling härledning kringgå behovet av att offra avelshonor att skörda embryonal vävnad. En annan fördel är avsaknaden av krav på tillväxtfaktorer (GFS) för utbyggnaden av OPC. Blandade gliaceller kulturer tillhandahålla en miljö som stödjer spridning av OPCs, förmodligen beroende på att förekomsten av astrocyternas-derived trofiska faktorer. Andra metoder, såsom härledning via neurospheres <sup>7,8,</sup> lita på mitogena egenskaper GF t.ex. grundläggande fibroblast tillväxtfaktor (bFGF), epidermal tillväxtfaktor (EGF) och platelet-derived growth factor (PDGF) för OPC expansion. Likaså att använda efter födsel (P5-10) möss DRGNs undviker kravet att komplettera den kultur media med nervtillväxtfaktor (NGF), en neurotropa faktor som krävs för <em>in vitro-överlevnad</em> embryonala DRGNs <sup>9, 10.</sup> Det är av intresse att undvika att använda NGF som negativt påverkar myelinating kapacitet OLS vid odling med DRGNs <sup>4.</sup> Undvika användning av GF-kompletterats media har också ekonomiska fördelar, eftersom dessa reagenser blir dyra när de används på stor skala. </p><p class="jove_content"> Den kanske viktigaste fördelen med denna kultur-modellen är dess härledning från mus med enbart vävnader, vilket ger möjligheter att härleda både OPCs och DRGNs från det breda utbudet av transgen mus linjer. Detta möjliggör studier av både DRGN och / eller OPC-specifika egenskaper som styr myelination. Detta kommer att vara särskilt viktigt för att belysa den receptor / ligand interaktioner som reglerar OL-medierad myelination av axoner. Sammantaget är denna teknik av stort värde med hänsyn till neurovetenskaplig forskning på grund av dess tillämpningar att förstå de molekylära signaler underliggande myelination. </p>

<html><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Produktnamn</strong> </td><td> <strong>Företag</strong> </td><td> <strong>Produktnummer</strong> </td></tr><tr><td> Dulbecco ändrade Eagle Medium (DMEM) </td><td> Multicell </td><td> 319 till 005-CL </td></tr><tr><td> Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) </td><td> Invitrogen </td><td> 14170-112 </td></tr><tr><td> Minsta Essential Media (MEM) </td><td> GIBCO </td><td> 12360-038 </td></tr><tr><td> Fetalt bovinserum (FBS) </td><td> GIBCO </td><td> 10091-148 </td></tr><tr><td> Penicillin-streptomycin (Pen / Strep) </td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> Invitrogen </td><td> 35050-061 </td></tr><tr><td> Poly-L-lysin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P2636 </td></tr><tr><td> Bovint serumalbumin (BSA) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A4503 </td></tr><tr><td> Mänskliga merosin renat protein (LN2) </td><td> Millipore </td><td> CC085 </td></tr><tr><td> Rekombinant råtta ciliär neurotrofa faktor (CNTF) </td><td> PeproTech </td><td> 450-50 </td></tr><tr><td> L-tyroxin </td><td> Biochemika </td><td> 89.430 </td></tr><tr><td> Holo-transferrin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T0665 </td></tr><tr><td> B27 komplettera </td><td> GIBCO </td><td> 0080085-SA </td></tr><tr><td> Bovint insulin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> 3,3 &#39;,5-Triiodo-L-thyronine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I6634 </td></tr><tr><td> Progesteron </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P8783 </td></tr><tr><td> Putrescine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P7505 </td></tr><tr><td> Natriumselenit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S5261 </td></tr><tr><td> 5-Fluoro-2&#39;-deoxiuridin (FuDR) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> F0503 </td></tr><tr><td> Papain lösning </td><td> Worthington </td><td> LS003126 </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> ROCHE </td><td> 1010159001 </td></tr><tr><td> L-cystein </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> C7352 </td></tr><tr><td> 24-och vävnadsodling rätter </td><td> Cellstar </td><td> 662-160 </td></tr><tr><td> T25-vävnadskultur kolvar med vent cap </td><td> Corning </td><td> 430.639 </td></tr><tr><td> 10 cm vävnadskultur rätter </td><td> Corning </td><td> 430.167 </td></tr><tr><td> 10 cm petriskål </td><td> Fisher Scientific </td><td> 0875713 </td></tr><tr><td> Kollagenas A </td><td> ROCHE </td><td> 103.578 </td></tr><tr><td> CellTrics 50 ìm filter (tillval) </td><td> PARTEC </td><td> 04-004-2327 </td></tr><tr><td> Myelin Basic Protein (MBP) Antikropp </td><td> ABD Serotec </td><td> MCA409S </td></tr><tr><td> NG2 antikropp </td><td> Millipore </td><td> AB5320 </td></tr><tr><td> Myelin-associerad glykoprotein (MAG) antikropp </td><td> Millipore </td><td> MAB1567 </td></tr><tr><td> 2 &#39;, 3&#39;-Cykliska-nukleotida 3&#39;-fosfodiesteras (CNP) antikropp </td><td> Covance </td><td> SMI-91R-100 </td></tr><tr><td> Aktin pan Ab-5 antikropp </td><td> Fitzgerald </td><td> 10R-A106AX </td></tr><tr><td> Neurofilament-200 (NF) antikropp </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> N4142 </td></tr><tr><td> Tubulin beta-3 kedja (Tuj1) antikropp </td><td> Millipore </td><td> MAB5544 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 488 get-anti-kanin IgG (H + L) sekundär antikropp </td><td> Invitrogen </td><td> A11008 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 555 get-anti-mus-IgG (H + L) sekundär antikropp </td><td> Invitrogen </td><td> A21422 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 647 get anti-råtta (IgG) (H + L) sekundär antikropp </td><td> Invitrogen </td><td> A21247 </td></tr><tr><td> Get-anti-mus-IgG (H + L)-HRP konjugerade sekundära antikroppar </td><td> BioRad </td><td> 170-6516 </td></tr><tr><td> Get-anti-råtta IgG (H + L)-HRP konjugerade sekundära antikroppar </td><td> Santa Cruz Biotechnology </td><td> SC-2065 </td></tr><tr><td> 4 &#39;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D9542 </td></tr></tbody></table><p class="jove_step"> Media Recept </p><p class="jove_content"> <strong>100X OL-Tillägg *</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Belopp att lägga till</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 100 ml </td></tr><tr><td> BSA </td><td> 1,02 g </td></tr><tr><td> Progesteron </td><td> 0,6 mg </td></tr><tr><td> Putrescine </td><td> 161 mg </td></tr><tr><td> Natriumselenit </td><td> 0,05 mg </td></tr><tr><td> 3,3 &#39;,5-Triiodo-L-thyronine </td><td> 4 mg </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> * Förvara vid -80 ° C i 250 mikroliter portioner </p>t &quot;&gt; <strong>OL medier</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Belopp att lägga till</strong> </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 23,75 ml </td></tr><tr><td> 100X OL-tillägg </td><td> 250 mikroliter </td></tr><tr><td> Bovint insulin (från 1 mg / ml lager) </td><td> 125 mikroliter </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> 250 mikroliter </td></tr><tr><td> Holo-transferrin (från 33 mg / ml lager) </td><td> 37,5 mikroliter </td></tr><tr><td> B27 Supplement </td><td> 500 mikroliter </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 125 mikroliter </td></tr><tr><td> CNTF (från 50 ng / mikroliter lager) </td><td> 25 mikroliter </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>Blandade gliaceller odlingsmedia (som består i DMEM)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Slutlig koncentration</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> Penna / Strep (0,33% från lager) </td><td> 33 enheter / ml penicillin och 33 mikrogram / ml streptomycin </td></tr><tr><td> GlutaMAX </td><td> 1% </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>DRGN media (som består i DMEM)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Slutlig koncentration</strong> </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> Penna / Strep (1% från lager) </td><td> 100 enheter / ml penicillin och 100 mikrogram / ml streptomycin </td></tr></tbody></table><p class="jove_step"> Uppslutning Lösning Recept: </p><p class="jove_content"> <strong>OPC papain lösning (som består i MEM)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Slutlig koncentration</strong> </td></tr><tr><td> Papain lösning </td><td> 1,54 mg / ml </td></tr><tr><td> L-cystein </td><td> 360 mikrogram / ml </td></tr><tr><td> DNaseI </td><td> 60 mikrogram / ml </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>DRG papain lösning (som består i HBSS)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Slutlig koncentration</strong> </td></tr><tr><td> Papain </td><td> 1,54 mg / ml </td></tr><tr><td> L-cystein </td><td> 360 mikrogram / ml </td></tr></tbody></table><p class="jove_content"> <strong>DRG kollagenas en lösning (som består i HBSS)</strong> </p><table border="1"><tbody><tr><td> <strong>Ingrediens</strong> </td><td> <strong>Slutlig koncentration</strong> </td></tr><tr><td> Kollagenas A </td><td> 4 mg / ml </td></tr></tbody></table>

derivation of enriched oligodendrocyte cultures and oligodendrocyte/neuron myelinating co-cultures from post-natal murine tissues

<p class="jove_content"> Identifiera de molekylära mekanismerna bakom OL utveckling är inte bara avgörande för att främja vår kunskap om OL biologi, men har även betydelse för att förstå patogenesen vid demyeliniserande sjukdomar som multipel skleros (MS). Mobil utveckling är ofta studeras med primär modeller cellkultur. Primära cellkulturer underlättar utvärderingen av en viss celltyp genom att erbjuda en kontrollerad miljö, fri från främmande variabler som finns <em>in vivo.</em> Medan OL kulturer från råttor har gett en stor mängd insikter i OL biologi, har liknande försök till upprättandet OL kulturer från möss mötts med stora hinder. Utveckla metoder för att kulturen murina primära Ols är absolut nödvändigt för att kunna dra nytta av den tillgängliga transgen mus linjer. </p><p class="jove_content"> Flera metoder för utvinning av OPCs från gnagare vävnad har beskrivits, från neurosphere härledning, differential vidhäftning rening och immunopurification <sup>1-3.</sup> Medan många metoder ger framgång, de flesta kräver omfattande kultur gånger och / eller dyr utrustning / reagenser. För att kringgå detta är rena OPCs från murina vävnad med en anpassning av den metod som ursprungligen beskrevs av McCarthy &amp; de Vellis <sup>2</sup> att föredra. Metoden innebär att fysiskt separera OPCs från en blandad gliaceller kultur härstammar från neonatal gnagare cortex. Resultatet är en renad OPC befolkning som kan delas in i en OL-berikad kultur. Detta tillvägagångssätt är tilltalande på grund av dess relativt korta kultur tid och onödiga krav på tillväxtfaktorer eller immunopanning antikroppar. </p><p class="jove_content"> Och samtidigt undersöka mekanismerna för OL utveckling i ett renat kultur är informativ, ger den inte den mest fysiologiskt relevanta miljö för att bedöma myelinskidan bildas. Co-odling OLS med nervceller skulle låna insikt i de molekylära grunderna som reglerar OL-medierad myelination av axoner. För många OL / neuron co-kultur studier har dorsala ganglion neuron (DRGNs) visat sig vara den neuron typ av val. De är idealiska för co-kultur med OLS på grund av deras enkla utvinning, minimalt förorenande celler, och bildandet av tät neurite bäddar. Även studier med råtta / mus myelinating xenocultures har publicerats <sup>4-6,</sup> OL / DRGN en metod för härledning av dessa myelinating co-kulturer från postnatal murin vävnad inte har beskrivits. Här presenterar vi detaljerade metoder för att effektivt kunna producera sådana kulturer, tillsammans med exempel på förväntade resultat. Dessa metoder är användbara för att hantera frågor som rör OL utveckling / myelinating funktion och som är användbara verktyg inom området neurovetenskap. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues at JoVE.com

Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues

<p class="jove_content">Den här artikeln beskriver metoder för att beräkna berikad populationer av murina oligodendrocyte föregångare celler (OPC) i primär kultur, som skiljer för att producera mogna oligodendrocyter (OLS). Dessutom beskrivs i rapporten tekniker för att producera murina myelinating co-kulturer med sådd musen OPCs på en neurite bädd av musen dorsal nervceller rot ganglion (DRGNs).</p>

Härledning av anrikat Oligodendrocyte kulturer och Oligodendrocyte / Neuron Myelinating Co-kulturer från Postnatal Murine vävnader

Identifying the molecular mechanisms underlying OL development is not only critical to furthering our knowledge of OL biology, but also has implications ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures

Frysförvaring av kortikal vävnad block för generering av höganrikat Neuronal kulturer

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly ...

Derivation of Glial Restricted Precursors from E13 mice

Härledning av stödjeceller begränsade prekursorer från E13 möss

This is a protocol for derivation of glial restricted precursor (GRP) cells from the spinal cord of E13 mouse fetuses. These cells are early precursors ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

Progenitor-härledda oligodendrocyt Kultur System från human fetal hjärna

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from <em>Xenopus</em> Nerve-muscle Co-cultures

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Samtidig före och postsynaptiska Elektrofysiologisk inspelning från<em&gt; Xenopus</em&gt; Nerve-muskel samkulturer

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Preparation of Neuronal Co-cultures with Single Cell Precision

Beredning av Neuronal Co-kulturer med Single Cell Precision

Microfluidic embodiments of the Campenot chamber have attracted great interest from the neuroscience community. These interconnected co-culture platforms ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

Organotypic Slice kulturer för att studera Oligodendrocyte Dynamics och myelinisering

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

Investigating Functional Regeneration in Organotypic Spinal Cord Co-cultures Grown on Multi-electrode Arrays

Undersöka Funktionell Regeneration i Organotypiska Spinal Cord Samkulturer Grown på Multi-elektrod Arrays

Adult higher vertebrates have a limited potential to recover from spinal cord injury. Recently, evidence emerged that propriospinal connections are a ...

Derivation of Leptomeninges Explant Cultures from Postmortem Human Brain Donors

Härledning av Leptomeninges Explantation kulturer från obduktions Human Brain Donatorer

Even though great progress has been made in the clinical characterization of Parkinson&#39;s disease, several studies report that the diagnosis of ...

Neuron-Macrophage Co-cultures to Activate Macrophages Secreting Molecular Factors with Neurite Outgrowth Activity

Neuron-makrofag samtidig kulturer att aktivera makrofager utsöndrar molekylära faktorer med Neurite utväxt aktivitet

There is strong evidence that macrophages can participate in the regeneration or repair of injured nervous system. Here, we describe a protocol in which ...

Preparation and Immunostaining of Myelinating Organotypic Cerebellar Slice Cultures

Förberedelse och immunfärgning av Myelinating Organotypic cerebellär Slice kulturer

In the nervous system, myelin is a complex membrane structure generated by myelinating glial cells, which ensheathes axons and facilitates fast electrical ...