Name: production and detection of reactive oxygen species (ros) in cancers
Uploaded: 2011-11-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Production and Detection of Reactive Oxygen Species ROS in Cancers at JoVE.com

Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüsü (CA142664) tarafından desteklenmiştir.

1. Karboksi-H 2 DCFDA kullanarak ROS Algılama Karboksi-H 2 DCFDA floresan olmayan, fakat bu reaktif okside ROS varlığı, yeşil floresan olur. <ol><li> Hemen önce, steril dimethylsülfoksit (DMSO) veya% 100 etanol karboksi-H 2 DCFDA taze bir stok solüsyon hazırlanır. Boya birden fazla erime / donma döngüleri kaçının. </li><li> Hücrelerin Hepes ile yıkayın tamponlu tuz solüsyonu (HBSS) ya da salin (PBS) orijinal orta izlerini silmek için fos...

<ol>
	<li>Guzik, T. J., Korbut, R., Adamek-Guzik, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+and+superoxide+in+inflammation+and+immune+regulation.">Nitric oxide and superoxide in inflammation and immune regulation.</a> J Physiol Pharmacol. 54, 469-487 (2003).</li><li>Perl, A., Gergely, P., Banki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+dysfunction+in+T+cells+of+patients+with+systemic+lupus+erythematosus.">Mitochondrial dysfunction in T cells of patients with systemic lupus erythematosus.</a> Int Rev Immunol. 23, 293-313 (2004).</li><li>Valko, M., Leibfritz, D., Moncol, J., Cronin, M. T., Mazur, M., Telser, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+radicals+and+antioxidants+in+normal+physiological+functions+and+human+disease.">Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease.</a> Int J Biochem Cell Biol. 39, 44-84 (2007).</li><li>Droge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+radicals+in+the+physiological+control+of+cell+function.">Free radicals in the physiological control of cell function.</a> Physiol Rev. 82, 47-95 (2002).</li><li>Nakamura, K., Yube, K., Miyatake, A., Cambier, J. C., Hirashima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+CD4+D3-D4+membrane+proximal+extracellular+domain+for+the+inhibitory+effect+of+oxidative+stress+on+activation-induced+CD4+down-regulation+and+its+possible+role+for+T+cell+activation.">Involvement of CD4 D3-D4 membrane proximal extracellular domain for the inhibitory effect of oxidative stress on activation-induced CD4 down-regulation and its possible role for T cell activation.</a> Mol Immunol. 39, 909-921 (2003).</li><li>Los, M., Droge, W., Stricker, K., Baeuerle, P. A., Schulze-Osthoff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogen+peroxide+as+a+potent+activator+of+T+lymphocyte+functions.">Hydrogen peroxide as a potent activator of T lymphocyte functions.</a> Eur J Immunol. 25, 159-165 (1995).</li><li>Deem, T. L., Cook-Mills, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+cell+adhesion+molecule+1+(VCAM-1)+activation+of+endothelial+cell+matrix+metalloproteinases:+role+of+reactive+oxygen+species.">Vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1) activation of endothelial cell matrix metalloproteinases: role of reactive oxygen species.</a> Blood. 104, 2385-2393 (2004).</li><li>Pacher, P., Beckman, J. S., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+and+peroxynitrite+in+health+and+disease.">Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease.</a> Physiol Rev. 87, 315-424 (2007).</li><li>Griendling, K. K., Sorescu, D., Lassegue, B., Ushio-Fukai, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+protein+kinase+activity+and+gene+expression+by+reactive+oxygen+species+and+their+role+in+vascular+physiology+and+pathophysiology.">Modulation of protein kinase activity and gene expression by reactive oxygen species and their role in vascular physiology and pathophysiology.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 20, 2175-2183 (2000).</li><li>Loh, K., Deng, H., Fukushima, A., Cai, X., Boivin, B., Galic, S., Bruce, C., Shields, B. J., Skiba, B., Ooms, L. M., Stepto, N., Wu, B., Mitchell, C. A., Tonks, N. K., Watt, M. J., Febbraio, M. A., Crack, P. J., Andrikopoulos, S., Tiganis, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+species+enhance+insulin+sensitivity.">Reactive oxygen species enhance insulin sensitivity.</a> Cell Metab. 10, 260-272 (2009).</li><li>Goldstein, B. J., Mahadev, K., Wu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redox+paradox:+insulin+action+is+facilitated+by+insulin-stimulated+reactive+oxygen+species+with+multiple+potential+signaling+targets.">Redox paradox: insulin action is facilitated by insulin-stimulated reactive oxygen species with multiple potential signaling targets.</a> Diabetes. 54, 311-321 (2005).</li></ol>

Inflamatuar hastalıklar, kanserler, iskemi / reperfüzyon, ve aynı zamanda, radyasyon veya kemoterapi gibi tedaviler gibi bazı patolojik durumlarda (yani sisplatin) ROS aşırı üretimi neden olur. Böylece, tespit etmek ve ROS düzeylerini ölçerek çok basit, klinik öncesi ve klinik çalışmalar önemlidir. Ancak, ROS çok kısa yarı ömre sahip ve tespit etmek için karmaşık olabilir. Burada, memeli hücreleri serbest radikal üretiminin tespiti için rutin olarak kullanılan ve yaygın olarak kabul edilmek...

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifi Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> 5 - (6)-karboksi-2 &#39;, 7&#39;-dichlorofluorescein diasetat (karboksi-DCFDA) </td><td> Moleküler Probları </td><td> C369 </td><td> kontrol </td></tr><tr><td> karboksi-H 2 DCFDA </td><td> Moleküler Probları </td><td> C400 </td><td></td></tr><tr><td> Sülfanilamid </td><td> Sigma </td><td> S9251-100G </td><td></td></tr><tr><td> N-1-napthylethylenediamine dihidroklorür </td><td> Sigma </td><td> N9125-10G </td><td></td></tr><tr><td> Nitrit standart </td><td> Sigma </td><td> 237.213-100G </td><td></td></tr><tr><td> GSH / GSSG-Glo Testi </td><td> Promega </td><td> V6612 </td><td> Ölçmek, okside azaltılabilir veya okside / glutatyon azaltılmış </td></tr></tbody>
</table>

production and detection of reactive oxygen species (ros) in cancers

Reaktif oksijen türleri, moleküllerin bir dizi zarar veren DNA ve RNA ve proteinler ve lipitler (lipit peroxydation) okside. Bu reaktif moleküller oksijen içeren ve H 2 O 2 (hidrojen peroksit), NO (nitrik oksit), O 2 - (oksit anyon), peroksinitrit (ONOO -), hydrochlorous asit (HOCl) ve hidroksil radikal (OH -) . Oksidatif türlerin sadece patolojik durumlarda (kanser, iskemik reperfüzyon /, nörolojik ve kardiyovasküler patolojiler, enfeksiyon hastalıkları, inflamatuar hastalıklar 1, otoimmün hastalıklar 2, vb ...) altında değil, aynı zamanda bu tür hücre metabolizması 3 gibi fizyolojik (non-patolojik) durumlarında üretilir , 4. Nitekim, ROS (çoğalması, hücre aktivasyonu 5, 6, 7 göç vb.) Birçok hücresel sinyal yolları önemli rol oynamaktadır. ROS zararlı olabilir (o olarak adlandırılır, Hücre içi bölmeleri ve hücreler yüksek miktarda üretilen &quot;ve nitrosatif oksidatif stres&quot;) genellikle süperoksit dismutaz (SOD) ve katalaz (CAT), glutatyon peroksidaz (GPx) ve koruyan glutatyon (GSH) gibi antioksidanlar upregulating ROS yanıt tehlikeli serbest radikalleri zararsız moleküller (yani su) dönüştürerek. C ve E vitaminleri de ROS temizleyiciler (antioksidan) olarak tarif edilmiştir. Serbest radikaller, düşük miktarda 3 yararlıdır . Makrofaj ve nötrofil-aracılı bağışıklık yanıtlarını, virüsler, patojenler ve tümör proliferasyonu 8 inhibe NO üretimi ve salınımı, içerir . NO aynı zamanda diğer ROS ile reaksiyona girer ve böylece, aynı zamanda bir detoks (ROS çöpçü) olarak bir rolü vardır. Uzun süren egzersiz 9, 10 kas adaptasyon için önemli olan kan akışını düzenlemek için damarları üzerinde Sonunda YOK davranır. Çeşitli yayınlar da ROS insülin sens yer aldığını göstermiştiritivity 11, 12. ROS üretimini değerlendirmek için çok sayıda yöntem mevcuttur. Bu yazıda, birkaç basit, hızlı ve uygun fiyatlı testleri önerebilir; bu testlerin birçok yayın tarafından onaylanmıştır ve memeli hücrelerinde ROS veya onun etkilerini tespit etmek için rutin olarak kullanılmaktadır. Bu testlerin bazıları birden fazla ROS tespit ederken, diğerleri sadece tek bir ROS algılar.

Watch this Scientific Journal Video about Production and Detection of Reactive Oxygen Species ROS in Cancers at JoVE.com

Production and Detection of Reactive Oxygen Species ROS in Cancers

Burada hücreler reaktif oksijen türlerinin varlığını test etmek ve değerlendirmek için basit yöntemler öneriyoruz.

Kanserler Üretim ve reaktif oksijen türlerinin (ROS Algılama)

Reactive oxygen species include a number of molecules that damage DNA and RNA and oxidize proteins and lipids (lipid peroxydation). These reactive ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Production and Detection of Reactive Oxygen Species (ROS) in Cancers

Visualization and Analysis of Blood Flow and Oxygen Consumption in Hepatic Microcirculation: Application to an Acute Hepatitis Model

Akut Hepatit Model Uygulama: Görselleştirme ve Hepatik Mikrosirkülasyon Kan Akış ve Oksijen Tüketimi Analizi

There is a considerable discrepancy between oxygen supply and demand in the liver because hepatic oxygen consumption is relatively high but about 70% of ...

Tıp

Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for Cancer Therapy Monitoring

Cerenkov Luminescence Imaging CLI for Cancer Therapy Monitoring

Kanser Tedavisi İzleme Cerenkov Lüminesans Görüntüleme (CLI)

In  molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI)  are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Bir Biyoassay olarak Sığır Mezenterik Arter ve Ven Bölüm yalıtma ve kullanma İnce Barsak vazoaktiviteye için Test

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

Assessing Transmissible Spongiform Encephalopathy Species Barriers with an In Vitro Prion Protein Conversion Assay

Assessing Transmissible Spongiform Encephalopathy Species Barriers with an In Vitro Prion Protein Conversion Assay

Bir ile Bulaşıcı Süngerimsi Ensefalopati Türler Engelleri değerlendirilmesi<em&gt; İn Vitro</em&gt; Prion Proteini Dönüştürme Deneyi

Studies to understanding interspecies transmission of transmissible spongiform encephalopathies (TSEs, prion diseases) are challenging in that they ...

Detection of Disease-associated &#945;-synuclein by Enhanced ELISA in the Brain of Transgenic Mice Overexpressing Human A53T Mutated &#945;-synuclein

İnsan A53T aşırı eksprese eden transjenik farelerin beyninde Geliştirilmiş ELISA ile Hastalık ile ilişkili α-sinüklein tespiti α-sinüklein Mutasyona uğramış

In addition to established methods like Western blot, new methods are needed to quickly and easily quantify disease-associated &#945;-synuclein (&#945;SD) ...

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

Reaktif gliozis Tetikleme<em&gt; In Vivo</em&gt; Bir Önbeyin Stab Yaralanma tarafından

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

Vitro ve In Vivo insan hücreleri, C. Elegansve fareler Mitophagy tespiti

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

Nitrik oksit VASP fosforilasyon ölçme tarafından kan trombosit tabanlı algılama

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...

Analyzing Oxygen Consumption Rate in Primary Cultured Mouse Neonatal Cardiomyocytes Using an Extracellular Flux Analyzer

Oksijen tüketim oranını bir hücre dışı akı Analyzer kullanarak birincil kültürlü fare yenidoğan Cardiomyocytes içinde analiz

Mitochondria and oxidative metabolism are critical for maintaining cardiac muscle function. Research has shown that mitochondrial dysfunction is an ...

Quantitative Mapping of Specific Ventilation in the Human Lung using Proton Magnetic Resonance Imaging and Oxygen as a Contrast Agent

Proton manyetik rezonans görüntüleme ve oksijen kontrast ajan olarak kullanarak ınsan akciğerinde spesifik havalandırma niceliksel haritalama

Specific ventilation imaging (SVI) is a functional magnetic resonance imaging technique capable of quantifying specific ventilation &#8213; the ratio of ...