Name: selective viral transduction of adult-born olfactory neurons for chronic in vivo optogenetic stimulation
Uploaded: 2011-12-28T12:00:00
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इस काम का जीवन बीमा कंपनी नोवालिस Taitbout &quot;इकोले डेस न्यूरोसाइंसेस डी पेरिस (ENP), Nationale डे ला Recherche&quot; ANR-09-NEUR-004 &quot;Agence से&quot; युग - NET न्यूरॉन &quot;के फ्रेम में समर्थित किया गया यूरोपीय आयोग द्वारा FP7 कार्यक्रम &quot;फाउंडेशन डालना ला Recherche MEDICALE&quot;, Letten फाउंडेशन और पाश्चर फाउंडेशन.

1. Stereotaxic इंजेक्शन <ol><li> इन प्रयोगों में इस्तेमाल वायरस एक प्रतिकृति की कमी lentiviral वेक्टर एचआईवी वायरस के आधार पर Channelrhodopsine2 YFP (पीले फ्लोरोसेंट प्रोटीन) व्यक्त संलयन निर्माण synapsin 6 प्रमोटर द्वारा संचालित. प्ला?...

<ol>
	<li>Lledo, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+neurogenesis+and+functional+plasticity+in+neuronal+circuits.">Adult neurogenesis and functional plasticity in neuronal circuits.</a> Nat. Rev. Neurosci. 7, 179-193 (2006).</li><li>Alonso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Turning+astrocytes+from+the+rostral+migratory+stream+into+neurons:+a+role+for+the+olfactory+sensory+organ.">Turning astrocytes from the rostral migratory stream into neurons: a role for the olfactory sensory organ.</a> J. Neurosci. 28, 11089-11102 (2008).</li><li>Mouret, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+survival+of+newly+generated+neurons:+when+time+matters.">Learning and survival of newly generated neurons: when time matters.</a> J. Neurosci. 28, 11511-11516 (2008).</li><li>Bardy, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How,+when,+and+where+new+inhibitory+neurons+release+neurotransmitters+in+the+adult+olfactory+bulb.">How, when, and where new inhibitory neurons release neurotransmitters in the adult olfactory bulb.</a> J. Neurosci. 30, 17023-17034 (2010).</li><li>Haubensak, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+dissection+of+an+amygdala+microcircuit+that+gates+conditioned+fear.">Genetic dissection of an amygdala microcircuit that gates conditioned fear.</a> Nature. 468, 270-276 (2010).</li><li>Zhang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multimodal+fast+optical+interrogation+of+neural+circuitry.">Multimodal fast optical interrogation of neural circuitry.</a> Nature. 446, 633-639 (2007).</li><li>Wang, X., McManus, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirus+Production.">Lentivirus Production.</a> J. Vis. Exp. (32), e1499-e1499 (2009).</li><li>Cardin, J. 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R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+light-induced+activation+of+neural+circuitry+in+transgenic+mice+expressing+channelrhodopsin-2.">In vivo light-induced activation of neural circuitry in transgenic mice expressing channelrhodopsin-2.</a> Neuron. 54, 205-218 .</li><li>Albeanu, D. 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Neurosci. 22, 4205-4216 (2002).</li><li>Gradinaru, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+cellular+approaches+for+diversifying+and+extending+optogenetics.">Molecular and cellular approaches for diversifying and extending optogenetics.</a> Cell. 141, 154-165 (2010).</li><li>Valley, M., Wagner, S., Gallarda, B. W., Lledo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+Affordable+LED+Arrays+for+Photo-Stimulation+of+Neurons.">Using Affordable LED Arrays for Photo-Stimulation of Neurons.</a> J. Vis. Exp. (57), e3379-e3379 (2011).</li></ol>

Optogenetic उपकरण हाल ही में चयनात्मक घ्राण प्रणाली में वयस्क जन्म न्यूरॉन्स सहित neuronal आबादी पर हमारे नियंत्रण में वृद्धि हुई है. यहाँ हम वर्णन कैसे एक lentiviral वेक्टर वयस्क जन्मे न्यूरॉन्स की एक विशिष्ट जनसंख्या ...

<table border="1"><tbody><tr><td> सामग्री </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र सं. </td></tr><tr><td> Ketamine </td><td> Merial </td><td> Imalgène 1000 </td></tr><tr><td> Xylazine </td><td> बायर हेल्थ केयर </td><td> 0.2% Rompum </td></tr><tr><td> पिपेट डांड़ी </td><td> Sutter </td><td> P-97 </td></tr><tr><td> ग्लास capillaries (3.5 &quot;) </td><td> Drummond वैज्ञानिक </td><td> 3-000-203-जी / एक्स </td></tr><tr><td> Nanoject द्वितीय Microinjector </td><td> Drummond वैज्ञानिक </td><td> 3-000-204 </td></tr><tr><td> उच्च गति शल्य चिकित्सा ड्रिल </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 18000-17 </td></tr><tr><td> माइक्रो ड्रिल इस्पात burrs 0.7mm टिप व्यास </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 19008-07 </td></tr><tr><td> एलईडी सीएमएस 4.6 डब्ल्यू नीले </td><td> OSRAM </td><td> LBW5SN </td></tr><tr><td> स्त्री बिजली संबंधक (2.54 मिमी) </td><td> फिशर Elektronik </td><td> BL5.36Z </td></tr><tr><td> एलईडी के लिए वर्तमान नियंत्रक (अधिकतम: 1 ए) </td><td> A1W ELECTRONIK </td><td> HKO - KL50-1000 </td></tr><tr><td> स्पंद जनित्र </td><td> AMPI </td><td> मास्टर 8 </td></tr><tr><td> ऑप्टिकल बिजली मीटर </td><td> थोर लैब्स </td><td> PM100 </td></tr><tr><td> Cyanoacrylate चिपकने वाला </td><td> लॉकटाइट </td><td> 454 </td></tr><tr><td> Polycarboxylate सीमेंट (पहली परत सीमेंट) </td><td> Septodont </td><td> Selfast (0068Q #) </td></tr><tr><td> Methacrylate सीमेंट (दूसरी परत सीमेंट) </td><td> जीसी InternationalCorp. </td><td> Unifast ट्राड - लिक्विड (339,292 #) Unifast ट्राड - पाउडर (339,114 #) </td></tr><tr><td> Carprofen </td><td> फ़िज़र </td><td> Rimadyl </td></tr></tbody></table>

selective viral transduction of adult-born olfactory neurons for chronic in vivo optogenetic stimulation

स्थानीय interneurons लगातार वयस्क 1-3 कृन्तकों की घ्राण बल्ब में पुनर्जीवित कर रहे हैं. इस प्रक्रिया में, वयस्क neurogenesis कहा जाता है, पार्श्व वेंट्रिकल की दीवारों में तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं neuroblasts है कि विजय - स्तम्भ प्रवासी धारा (आरएमएस) तक पहुँचने के लिए और घ्राण बल्ब में शामिल के साथ कई मिलीमीटर के लिए विस्थापित को जन्म दे. विभिन्न चरणों और घ्राण सर्किट preexisting में वयस्क जन्म न्यूरॉन एकीकरण के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए, यह करने के लिए चुनिंदा लेबल और न्यूरॉन्स के इस विशिष्ट जनसंख्या की गतिविधि में हेरफेर करने के लिए आवश्यक है. optogenetic प्रौद्योगिकियों के हाल ही के विकास के प्रकाश का उपयोग करने के लिए ठीक आसपास न्यूरॉन्स 4,5 को प्रभावित किए बिना न्यूरॉन्स के इस विशिष्ट काउहोट सक्रिय करने का अवसर प्रदान करता है. यहाँ, हम आरएमएस में neuroblasts की एक अस्थायी प्रतिबंधित काउहोट में मौजूद virally व्यक्त Channelrhodopsin2 करने के लिए प्रक्रियाओं की एक श्रृंखला (ChR2) YFP से पहले वे घ्राण बल्ब तक पहुँचने और वयस्क जन्म बन पूर्वोत्तरurons. इसके अलावा, हम बताते हैं कैसे प्रत्यारोपण और एक ChR2 व्यक्त न्यूरॉन्स के vivo उत्तेजना में जीर्ण के लिए एलईडी लघु जांचना .

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Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

घ्राण बल्ब की वयस्क जन्मे न्यूरॉन्स optogenetically Channelrhodopsin2 व्यक्त lentiviral इंजेक्शन विजय - स्तम्भ प्रवासी और एक प्रत्यारोपित लघु के साथ पुरानी photostimulation धारा में एलईडी का उपयोग कर नियंत्रित कर सकते हैं.

जीर्ण के लिए वयस्क जन्म घ्राण न्यूरॉन्स के चयनात्मक वायरल transduction Vivo में Optogenetic उत्तेजना

Local interneurons are continuously regenerated in the olfactory bulb of adult rodents1-3. In this process, called adult neurogenesis, neural stem cells ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Studying the Integration of Adult-born Neurons

वयस्क - जन्म न्यूरॉन्स की एकता का अध्ययन

Neurogenesis occurs in adult mammalian brains in the sub-ventricular zone (SVZ) of the lateral ventricle and in the sub-granular zone (SGZ) of the ...

Lentivirus-mediated Genetic Manipulation and Visualization of Olfactory Sensory Neurons in vivo

Lentivirus-mediated Genetic Manipulation and Visualization of Olfactory Sensory Neurons in vivo

Lentivirus की मध्यस्थता जेनेटिक और घ्राण संवेदी न्यूरॉन्स के हेरफेर विज़ुअलाइज़ेशन Vivo में</em

Development of a precise olfactory circuit relies on accurate projection of olfactory sensory neuron (OSN) axons to their synaptic 
targets in the ...

Flash Photolysis of Caged Compounds in the Cilia of Olfactory Sensory  Neurons

बंदी कम्पाउँड की घ्राण संवेदी न्यूरॉन्स की cilia में फ़्लैश Photolysis

Photolysis of caged compounds allows the production of rapid and localized increases in the concentration of various physiologically active compounds1. ...

Fiber-optic Implantation for Chronic Optogenetic Stimulation of Brain Tissue

मस्तिष्क के ऊतकों के जीर्ण Optogenetic उत्तेजना के लिए फाइबर ऑप्टिक आरोपण

Elucidating patterns of neuronal connectivity has been a challenge for both clinical and basic neuroscience. Electrophysiology has been the gold standard ...

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Optogenetic भागने व्यवहार की उत्तेजना<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

A  growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive  manipulation of the neural activity of specific neurons in ...

A Method for High Fidelity Optogenetic Control of Individual Pyramidal Neurons In vivo

A Method for High Fidelity Optogenetic Control of Individual Pyramidal Neurons In vivo

व्यक्तिगत पिरामिड न्यूरॉन्स की उच्च फिडेलिटी optogenetic नियंत्रण के लिए एक विधि<em&gt; में विवो</em

Optogenetic methods  have emerged as a powerful tool for elucidating neural circuit activity  underlying a diverse set of behaviors across a broad range ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

में घ्राण रिसेप्टर न्यूरॉन्स के पूरा पर्वत immunolabeling<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; एंटीना

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

कृंतक केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के विवो optogenetic उत्तेजना में

The ability to probe defined neural circuits in awake, freely-moving animals with cell-type specificity, spatial precision, and high temporal resolution ...

Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

लगातार और व्यापक Neuronal पारगमन के लिए नवजात माउस ब्रेन की Intracerebroventricular वायरल इंजेक्शन

With the pace of scientific advancement accelerating rapidly, new methods are needed for experimental neuroscience to quickly and easily manipulate gene ...

Optogenetic Stimulation of the Auditory Nerve

श्रवण तंत्रिका की optogenetic उत्तेजना

Direct electrical stimulation of spiral ganglion neurons (SGNs) by cochlear implants (CIs) enables open speech comprehension in the majority of implanted ...