Name: electroporation of craniofacial mesenchyme
Uploaded: 2011-11-28T13:00:00
Duration: 7 min 23 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electroporation of Craniofacial Mesenchyme at JoVE.com

Vi är tacksamma för Nancy Papalopulu och Boyan Bonev för hjälp med Xenopus elektroporation. Vi tackar också Marc Dionne för kritisk läsning, Jeremy Green och John Wallingford för hjälpsamma diskussioner och medlemmar av Liu labbet för deras stöd. Detta arbete har finansierats av bidrag från BBSRC (BB/E013872/1) och Wellcome Trust (081880/Z/06/Z) till KJL.

Del 1A. Utrustning Mikroskop: upprättstående stereo-dissekera utrymme med låg effekt mål <ul><li> Spänning / pulsgeneratorn: BTX ECM 830 Square Wave elektroporation System </li><li> Pipettera avdragaren: P-87 Mikropipett Avdragare (Sutter Instrument Company, CA) </li><li> Manipulator: grov, eller kombinerad grova och fina beroende på förberedelse. </li><li> Mikropipett innehavaren: Fine Science Tools </li><li> Elektrod: hemlagad </li><li> Elektroporation kammare: hemlagad </li></ul> L-formade elektroder: <ol><li> Klipp 8 cm hög renhet 0,4 mm volfram tråd (Goodfellow) och anbringa på mittpunkten en 1 ml spruta med spackel (vi använder Blu-Tack). Lämna 4 tråds cm tungsten utsatta spetsen på sprutan och böj spets i L-form, 1 cm från änden (Fig. 1A). </li><li> Trim tips så att slutet åtgärderna 0,5 mm i längd. Thans tips är elektroden ändstationen. </li><li> Kör över parallellt volfram tråden till spruta och använda den för att ansluta generatorn elektroden puls. </li><li> Upprepa processen att göra ett par elektroder. </li><li> Fäst elektroderna till fyrkantsvåg pulsgenerator via DC-kablar. </li></ol> Elektroporation kammare <ol><li> Linje botten av 90 mm fat med ~ 5 mm giftfri modellera. </li><li> Fyll skålen med elektroporation medier. </li><li> Använda Nr 5 urmakare pincett rista en T-formad väl (Fig. 2). Den långa och ska mäta ~ 2 mm x 2 mm x 10 mm och kort ~ 2 mm x 2 mm x 5 mm. Den elektroporation maträtt kan tvättas och återanvändas. </li></ol> Del 1B. Reagenser DNA eller laddade makromolekyler <ul><li> Mikropipetter: 1 mm bredd 4 &quot;lång borosilikatglas kapillärer (WPI, TW100-F) </li><li> Kultur medier: Normal Amphibian Media (NAM) </li><li> &gt; 10 x lager: 1100 mm NaCl, 20mM KCL, 10 mm Ca (NO 3) 2 • 4H 2 O, 1 mM EDTA. <ul><li> Autoklav och förvara vid 4 ° C. </li><li> 1 X NAM: Späd från 10x lager, buffert med 0,1 mM NaHCO 3 och 0,2 mM Na 3 PO 4. </li></ul></li><li> Xenopus laevis grodyngel, etapp 28 </li></ul> DNA-preparation: <ol><li> Förbered uttryck plasmider med standardprotokoll. </li><li> Resuspendera DNA till en slutlig koncentration av 1 mikrogram / ​​l i nukleas fria H 2 0. </li></ol> * Vi har haft framgång med vektorer som innehåller en stark CMV promotor, som pCS2 + [16]. För härstamning analys inkluderar vi vanligen DNA kodar grönt fluorescerande protein (pCS2 + GFP) till en slutlig koncentration av 0,1 mikrogram / l. [DNA-koncentrationer mellan 0,1-3 mikrogram / l testades också. Vi fann att halter under 0,8 mikrogram / l ineffektivt märkta celler, medan DNA högre koncentrationer än 2 mikrogram / &amp; Mu, l förbättrade inte elektroporation effektiviteten]. Morpholino oligonukleotid förberedelser: (Obs!. MOS måste fluoresceinated (3&#39;-carboxyfluorescein modifierad) eller på annat sätt debiteras) <ol><li> Resuspendera morpholino oligonukleotider (MOS) (Genetools, <a href="http://www.genetools.com" target="_blank">www.genetools.com</a> ) vid en koncentration av 2 mm i nukleas fria H 2 0. </li><li> Värme alikvot av stamlösning vid 65 ° C i 5 minuter. </li><li> Späd till slutlig koncentration av 0,5 mm i nukleas fritt vatten. </li></ol> * 0,1-1mm MO lösningar testades. 0,5 mM MO lösningar var tillräckligt för elektroporation många mesenkymala celler. Mikropipetter <ol><li> Förbered mikropipetter av borsilikatglas kapillärer (1 mm bred, 4 &quot;lång, WPI nej. TW100-F). Använd nål avdragare för att förbereda mikropipetter med en 8-12 mm lång kona och fin spets. </li><li> Krossa spets ~ 2 mmfrån spets med hjälp av pincett, vilket skapar en ojämn paus. </li></ol> Media <ol><li> Inkubering media: Bered en färsk 3 / 4 Normal Amphibian Media (NAM) från 1x lager. Lägg till 0,025 mg / ml gentamycin. </li><li> Elektroporation medier: som ovan, med 0,1% Benzocaine (Sigma, 06950). </li></ol> 2. Elektroporation Mikropipett installation <ol><li> Fyll mikropipett med ~ 1 l injektionslösning. </li><li> Säkra mikropipett i mikromanipulator och fäster microinjector (Picospritzer II). </li><li> Vinkel mikropipett vid 50 ° från bordsskivan. </li><li> Ställ insprutningstryck vid 20 PSI. </li><li> Kalibrera mikropipett att injicera 30 nl per puls. </li></ol> Grodyngel förberedelse <ol><li> Bedöva stadium 28 Xenopus larver genom inkubering i elektroporering media i 5 minuter. </li><li> Överför sövda grodyngel i elektroporation kammare fylld med elektroporation medier. Position embryoinom den långa väl så att huvudet vilar i T-korsningen med ryggsidan nedåt och ventrala sida som exponeras. Huvudet skall vara något förhöjd jämfört med svansen. </li><li> Använd pincett försiktigt säkra grodyngel väl med närliggande modellera. (Obs!.. Om grodyngel inte är säkrad kan den rycka och kontakta elektroden under elektroporation I detta fall kasta grodyngel som ansiktsservetter kommer att bli allvarligt skadad) </li></ol> Elektroporation <ol><li> Sätt mikropipett spetsen omedelbart posteriort om cement körteln och i ansiktet mesenkym. </li><li> Injicera 30 nl lösning i mesenkym. </li><li> Dra in mikropipett. </li><li> Snabbt anpassa elektrod tips parallellt med chefen för embryot (Fig. 3). </li><li> Applicera 8 50 ms, 20mV torget pulser. </li><li> Dra in elektroderna. </li><li> Använd pincett försiktigt släppa grodyngel från väl och transfer till 3 / 4 NAM, 0,025 mg / ml gentamycin. </li><li> Yngel kan inkuberas i 3 / 4 NAM, 0,025 mg / ml overnight, eller längre. </li><li> Screen embryon för effektiv elektroporering av fluorescensmikroskopi efter 24 timmar. </li></ol> 3. Representativa resultat: Användningen av fluorescerande molekyler gör det lätt att screening av electroporated embryon. Figur 4 visar ett typiskt parti MO electroporated grodyngel ~ 12, 48 och 96 timmar efter elektroporation, inkuberas vid 14,5 ° C. Använda fluorescensmikroskopi kan MOS visualiseras omedelbart efter elektroporation och kvarstår i flera dagar efter elektroporation. Enligt vår erfarenhet är fluorescens svagt tydligt vid stadium 46 (~ 5 dagar senare). I brosk, minskar fluorescens dramatiskt efter debuten av differentiering (~ st 42), dock kvarstår MO fluorescens mer i andra celltyper som faryngala endoderm. Fluorescensmikroskopi visar att oligonukleotider ingår i flera kraniofaciala vävnader, inklusive brosk. Oligonukleotid fluorescens cen ofta visualiseras i vävnad på vardera sidan av huvudet. Detta beror sannolikt på snabb spridning av injektionslösningen hela löst kraniofaciala mesenkym före elektroporation. <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig1.jpg" /> Figur 1 Homemade elektroder. L-formade volfram tråd är ansluten till en 1 ml spruta med giftfria lera eller kitt. (A) Elektroden ändstationen mäter 5 mm. (B) Bifoga ett par elektroder, så att Termini löper parallellt. Elektroder är knutna till pulsgenerator av DC kablar. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig2.jpg" /> Figur 2 elektroporation kammare. (A) 90 mm maträtt fodrad med modellera är fylld med media och en T-formad kammare ristade med nr 5 urmakare pincett. (B) långsidan mäter 2 mm x 2 mm X10 mmmedan den korta mäter 2 mm x 2 mm x 5 mm. Chefen för embryot vilar i T-korsning, ventrala sidan uppåt. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig3.jpg" /> Figur 3 Schematisk illustrerar elektroporation förfarande. St 28 grodyngel placeras i elektroporering kammare, upp ventrala sida. Mikropipett sätts in i ansiktet mesenkym underliggande cement körtel. Injicera. Mikropipett tas bort och L-formade elektroder ligger parallellt flankerar huvudet. Applicera åtta 50 ms, 20 mV torget pulser. Dra in elektroderna. Grow grodyngel till önskad etapper. Visualisera MOS eller GFP uttryck med hjälp av fluorescensmikroskopi. <img alt="Figur 4" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig4.jpg" /> Figur 4 Representativ grodyngel 12 (A), 48 (B) och 96 (C) timmar efter elektroporation (steg 30, 34 respektive 44). (En &quot;-B&quot;) Lysrör MO kan visualiseras inom kraniofacial mesenkym på hjortes 30 och 34. Fluorescens kan upptäckas i brosk i steg 44 (pilspets, C&#39;-C &quot;). Tarmen är mycket autofluorescent.

<ol>
	<li>Bonev, B., Pisco, A., Papalopulu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-9+reveals+regional+diversity+of+neural+progenitors+along+the+anterior-posterior+axis.">MicroRNA-9 reveals regional diversity of neural progenitors along the anterior-posterior axis.</a> Dev. Cell. 20, 19-32 (2011).</li><li>Haas, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+electroporation+for+gene+transfer+in+vivo.">Single-cell electroporation for gene transfer in vivo.</a> Neuron. 29, 583-591 (2001).</li><li>Calegari, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+RNA+interference+in+post-implantation+mouse+embryos+using+directional+electroporation+and+whole+embryo+culture.">Tissue-specific RNA interference in post-implantation mouse embryos using directional electroporation and whole embryo culture.</a> Differentiation. 72, 92-102 (2004).</li><li>Drinjakovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E3+ligase+Nedd4+promotes+axon+branching+by+downregulating+PTEN.">E3 ligase Nedd4 promotes axon branching by downregulating PTEN.</a> Neuron. 65, 341-357 (2010).</li><li>Falk, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroporation+of+cDNA/Morpholinos+to+targeted+areas+of+embryonic+CNS+in+Xenopus.">Electroporation of cDNA/Morpholinos to targeted areas of embryonic CNS in Xenopus.</a> BMC. Dev. Biol. 7, 107-107 (2007).</li><li>Hewapathirane, D. S., Haas, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Cell+Electroporation+in+vivo+within+the+Intact+Developing+Brain.">Single Cell Electroporation in vivo within the Intact Developing Brain.</a> J. Vis. Exp. (17), e705-e705 (2008).</li><li>Kuriyama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tsukushi+controls+ectodermal+patterning+and+neural+crest+specification+in+Xenopus+by+direct+regulation.">Tsukushi controls ectodermal patterning and neural crest specification in Xenopus by direct regulation.</a> of BMP4 and X-delta-1 activity. Development. 133, 75-88 (2006).</li><li>Mende, M., Christophorou, N. A., Streit, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+and+effective+gene+knock-down+in+early+chick+embryos+using+morpholinos+but+not+pRFPRNAi+vectors.">Specific and effective gene knock-down in early chick embryos using morpholinos but not pRFPRNAi vectors.</a> Mech. Dev. 125, 947-962 (2008).</li><li>Neumann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+into+mouse+lyoma+cells+by+electroporation+in+high+electric+fields.">Gene transfer into mouse lyoma cells by electroporation in high electric fields.</a> Embo. J. 1, 841-845 (1982).</li><li>Price, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+motor+neuron+pool+sorting+by+differential+expression+of+type+II+cadherins.">Regulation of motor neuron pool sorting by differential expression of type II cadherins.</a> Cell. 109, 205-216 (2002).</li><li>Grossin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+gene+transfer+into+rat+articular+cartilage+by+in+vivo+electroporation.">Direct gene transfer into rat articular cartilage by in vivo electroporation.</a> Faseb. J. 17, 829-835 (2003).</li><li>Khoury, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+intra-articular+versus+systemic+gene+electrotransfer+in+experimental+arthritis.">A comparative study on intra-articular versus systemic gene electrotransfer in experimental arthritis.</a> J. Gene. Med. 8, 1027-1036 (2006).</li><li>Takahashi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+cathepsin+K+in+synovium+leads+to+progression+of+osteoarthritis+in+rabbits.">Down-regulation of cathepsin K in synovium leads to progression of osteoarthritis in rabbits.</a> Arthritis. Rheum. 60, 2372-2380 (2009).</li><li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Early Development of Xenopus laevis: A Laboratory Manual. , (2000).</li><li>Wheeler, G. N., Brandli, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+vertebrate+models+for+chemical+genetics+and+drug+discovery+screens:+lessons+from+zebrafish+and+Xenopus.">Simple vertebrate models for chemical genetics and drug discovery screens: lessons from zebrafish and Xenopus.</a> Dev. Dyn. 238, 1287-1308 (2009).</li><li>Turner, D. L., Weintraub, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+achaete-scute+homolog+3+in+Xenopus+embryos+converts+ectodermal+cells+to+a+neural+fate.">Expression of achaete-scute homolog 3 in Xenopus embryos converts ectodermal cells to a neural fate.</a> Genes. Dev. 8, 1434-1447 (1994).</li></ol>

Författarna har ingen intressekonflikt.

I den här videon har vi visat det är möjligt att elektroporation-medierad gen leverans i ansiktet mesenkym av Xenopus grodyngel. Med denna metod kan vi gå förbi tidigt utvecklingseffekter att manipulera geners funktion gör att vi kan rikta specifika vävnader vid senare tidpunkter. Våra studier visar att heterogena populationer av kraniofaciala mesenkymala celler kan påverkas, gör att vi kan undersöka härstamning av electroporated celler samt celler självständiga krav på proteiner av intresse. Kombinerat med levande bilder, kan vi använda denna metod för att studera geners funktion, över tiden, under kraniofaciala utveckling. Denna nya metod belyser spårbarhet Xenopus för studiet av organogenesen. Vi räknar med att denna metod i stort sett kan anpassas för att studera morfogenes och differentiering av andra vävnader också.

A correction was made to <a href="http://http://www.jove.com/video/3381">Electroporation of Craniofacial Mesenchyme</a>. There was an incorrect unit used for the voltage.

Erratum: Electroporation of Craniofacial Mesenchyme

electroporation of craniofacial mesenchyme

Elektroporation är en effektiv metod för att leverera DNA och andra laddade makromolekyler till vävnad vid exakta tidpunkter och i exakta platser. Till exempel har elektroporation använts med stor framgång att studera neurala och näthinnans utveckling i Xenopus, kyckling och mus 1-10. Det är dock viktigt att notera att i alla dessa studier var utredarna inte är inriktade på mjuka vävnader. Eftersom vi är intresserade av kraniofaciala utveckling, anpassade vi en metod att rikta ansiktet mesenkym. När vi sökte litteratur, fann vi, till vår förvåning, väldigt få rapporter om lyckade genöverföring till brosk vävnaden. Majoriteten av dessa studier var genterapi studier, till exempel siRNA eller protein leverans till chondrogenic cellinjer, eller, djurmodeller av artrit 11-13. I andra system, till exempel kyckling eller mus, elektroporation av ansikts mesenkym har varit utmanande (personliga KOMMUNIKATjoner, Institutionen för Kraniofaciala utveckling, KCL). Vi antar att elektroporation i procartilaginous och brosk vävnader i Xenopus kan fungera bättre. I våra studier, visar vi att genöverföring i ansiktet brosket sker effektivt i tidiga skeden (28), när ansikts primordium fortfarande består av mjukvävnad innan brosk differentiering. Xenopus är ett väldigt lättillgängligt ryggradsdjur systemet för analys av kraniofaciala utveckling. Kraniofaciala strukturer är mer synligt i Xenopus än i något annat ryggradsdjur modell, främst eftersom Xenopus embryon befruktas externt, vilket gör analyser av de tidigaste stadierna, och underlätta Bildproduktion på en enda cell upplösning, samt återanvändning av mödrarna 14. Bland ryggradsdjur modeller utvecklas externt, är Xenopus mer användbart för kraniofaciala analys än zebrafisk, som Xenopus larver är större och lättare att dissect, och utvecklingsländerna ansikts regionen mer tillgänglig för bildbehandling än motsvarande område i fisk. Dessutom är Xenopus evolutionärt närmare människor än sebrafisk (~ 100 miljoner år närmare) 15. Slutligen, på dessa stadier, Xenopus grodyngel är öppna, och samtidigt uttryck för fluorescerande proteiner eller molekyler kommer att tillåta enkel visualisering av att utveckla brosk. Vi räknar med att detta tillvägagångssätt ger oss möjlighet att snabbt och effektivt testa kandidat molekyler i en in vivo-modell system.

Watch this Scientific Journal Video about Electroporation of Craniofacial Mesenchyme at JoVE.com

Electroporation of Craniofacial Mesenchyme

Kraniofaciala brosk utvecklas i nära kontakt med andra vävnader och är svåra att manipulera med levande djur. Vi använder elektroporation att leverera molekylära verktyg under tillväxten av kraniofaciala skelettet medan förbi tidiga embryonala effekter. Detta tillvägagångssätt ger oss möjlighet att effektivt testa kandidat molekyler<em&gt; In vivo.</em

Elektroporation av Craniofacial mesenkym

Electroporation is an efficient method of delivering DNA and other charged macromolecules into tissues at precise time points and in precise locations. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Electroporation of Mycobacteria

Elektroporation av mykobakterier

High efficiency transformation is a major limitation in the study of mycobacteria. The genus Mycobacterium can be difficult to transform; this is mainly ...

Antibody Profiling by Luciferase Immunoprecipitation Systems (LIPS)

Antibody Profiling by Luciferase Immunoprecipitation Systems LIPS

Antikropp Profilering av luciferas Immunoprecipitation Systems (LIPS)

Technologies for comprehensively understanding and quantifying antibody profiles to autoantigens and infectious agents may yield new insights into disease ...

Assessing Signaling Properties of Ectodermal Epithelia During Craniofacial Development

Bedöma Signalering egenskaper Ectodermal epitel Under Kraniofaciala utveckling

The accessibility of avian embryos has helped experimental embryologists understand the fates of cells during development and the role of tissue ...

An Explant Assay for Assessing Cellular Behavior of the Cranial Mesenchyme

Ett explantat analys för bedömning Cellular Beteende för Kranial mesenkym

The central nervous system is derived from the neural plate that undergoes a series of complex morphogenetic movements resulting in formation of the ...

Genome-wide Gene Deletions in Streptococcus sanguinis by High Throughput PCR

Genome-wide Gene Deletions in Streptococcus sanguinis by High Throughput PCR

Genome-wide Gene Deletioner i<em&gt; Streptococcus sanguinis</em&gt; Av High Throughput PCR

Transposon  mutagenesis and single-gene deletion are two methods applied in genome-wide  gene knockout in bacteria 1,2. Although transposon mutagenesis is ...

Separation of Mouse Embryonic Facial Ectoderm and Mesenchyme

Separation av mus Embryonala Facial ektoderm och mesenkym

 Orofacial clefts are the most frequent  craniofacial defects, which affect 1.5 in 1,000 newborns worldwide1,2. Orofacial clefting is caused by abnormal ...

Visualization of Craniofacial Development in the sox10: kaede Transgenic Zebrafish Line Using Time-lapse Confocal Microscopy

Visualisering av Kraniofaciala utveckling i sox10: Kaede Transgena Zebrafish Linje Använda Time-lapse konfokalmikroskopi

Vertebrate palatogenesis is a highly choreographed and complex developmental process, which involves migration of cranial neural crest (CNC) cells, ...

Analyzing Craniofacial Morphogenesis in Zebrafish Using 4D Confocal Microscopy

Analysera Kraniofaciala Morphogenesis i Zebrafish Använda 4D konfokalmikroskopi

Time-lapse imaging is a technique that allows for the direct observation of the process of morphogenesis, or the generation of shape. Due to their optical ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

Alternativa kulturer för Human pluripotenta stamceller Produktion, underhåll, samt genetisk analys

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

Assessing Species-specific Contributions To Craniofacial Development Using Quail-duck Chimeras

Bedöma Artspecifika Bidrag Till Kraniofaciala utveckling Använda Quail-anka chimärer

The generation of chimeric embryos is a widespread and powerful approach to study cell fates, tissue interactions, and species-specific contributions to ...