Name: combination radiotherapy in an orthotopic mouse brain tumor model
Uploaded: 2012-03-06T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combination Radiotherapy in an Orthotopic Mouse Brain Tumor Model at JoVE.com

Denna forskning stöds av finansiering från Interna program NIH.

I. Cell Preparation <ol><li> Cellerna odlas till konfluens i DMEM med 10% FBS ca en 80% sammanflytande 225 cm 3-kolv för varje 5 möss som skall implanteras. </li><li> Aspirera mediet bort från cellerna; tvätta med 10 ml PBS utan kalcium eller magnesium. Aspirera PBS utanför celler. </li><li> Trypsinisera celler med 3 ml trypsin, vänta 10-15 min, och neutralisera trypsin med 15 ml av media. </li><li> Pipettera alla celler och media i en 50 ml konisk. Två stora kolvar passa in i en 50 ml konisk. </li><...

<ol>
	<li>Bleau, A. M., Holland, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trapping+the+mouse+genome+to+hunt+human+alternations.">Trapping the mouse genome to hunt human alternations.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 104, 7737-7738 (2007).</li><li>McGrady, B. J., McCormick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+intracranial+invasion:+morphological+observations+on+central+nervous+system+invasion+by+melanoma+cells.">A murine model of intracranial invasion: morphological observations on central nervous system invasion by melanoma cells.</a> Clin. Exp. Metastasis. 10, 387-393 (1992).</li><li>Fei, X., Zhang, Q., Dong, J., Diao, y., Wang, Z., Li, R., Wu, Z., Wang, A., Lan, Q., Zhang, S., Huang, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+clinically+relevant+orthotopic+xenograft+mouse+model+of+metastatic+lung+cancer+and+glioblastoma+through+surgical+tumor+tissues+injection+with+trocar.">Development of clinically relevant orthotopic xenograft mouse model of metastatic lung cancer and glioblastoma through surgical tumor tissues injection with trocar.</a> Journal of Experimental &#38; Clinical Cancer Research. 29, 84-84 (2010).</li><li>Fujita, M., Zhu, X., Sasaki, K., Ueda, R., Low, K., Pollack, I., Okada, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+STAT3+Promotes+the+Efficacy+of+Adoptive+Transfer+Therapy+Using+Type-1+CTLs+by+Modulation+of+the+Immunological+Microenvironment+in+a+Murine+Intracranial+Glioma.">Inhibition of STAT3 Promotes the Efficacy of Adoptive Transfer Therapy Using Type-1 CTLs by Modulation of the Immunological Microenvironment in a Murine Intracranial Glioma.</a> J. Immunol. 180, 2089-2098 (2008).</li><li>Candolfi, M., Curtin, J. F., Nichols, W. S., Muhammad, A. K. M. .. . G., King, G., Pluhar, G. D., McNiel, G. E., Ohlfest, E. A., Freese, J. R., Moore, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracranial+glioblastoma+models+in+preclinical+neuro-oncology:+neuropathlogical+characterization+and+tumor+progression.">Intracranial glioblastoma models in preclinical neuro-oncology: neuropathlogical characterization and tumor progression.</a> J. Neurooncol. 85, 133-148 (2007).</li><li>Kaye, A., Morstyn, G., Gardner, I., Pyke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+xenograft+glioma+model+in+mouse+brain.">Development of a xenograft glioma model in mouse brain.</a> Cancer Research. 46, 1367-1373 (1986).</li><li>Zhao, Y., Xiao, A., diPierro, C., Carpenter, J., Abdel-Fattah, R., Redpath, G., Lopez, M., Hussaini, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Extensive+Invasive+Intracranial+Human+Glioblastoma+Xenograft+Model.">An Extensive Invasive Intracranial Human Glioblastoma Xenograft Model.</a> American Journal of Pathology. 176, 3032-3049 (2010).</li><li>Learn, C., Grossi, P., Schmittling, R., Xie, W., Mitchell, D., Karikari, I., Wei, Z., Dressman, H., Sampson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+Analysis+of+Intracranial+Tumors+in+a+Murine+Model+of+Glioma+Demonstrate+a+Shift+in+Gene+Expression+in+Response+to+Host+Immunity.">Genetic Analysis of Intracranial Tumors in a Murine Model of Glioma Demonstrate a Shift in Gene Expression in Response to Host Immunity.</a> J. Neuroimmunol. 182, 63-72 (2007).</li><li>Martens, T., Laabs, Y., Günther, H., Kemming, D., Zhu, Z., Witte, L., Hagel, C., Westphal, M., Lamszus, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+Glioblastoma+Growth+in+a+Highly+Invasive+Nude+Mouse+Model+Can+Be+Achieved+by+Targeting+Epidermal+Growth+Factor+Receptor+but+not+Vascular+Endothelial+Growth+Factor+Receptor-2.">Inhibition of Glioblastoma Growth in a Highly Invasive Nude Mouse Model Can Be Achieved by Targeting Epidermal Growth Factor Receptor but not Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2.</a> Clin. Cancer Res. 14, 5447-5458 (2008).</li><li>Purow, B., Schiff, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+genetics+of+glioblastoma:+are+we+reaching+critical+mass.">Advances in the genetics of glioblastoma: are we reaching critical mass.</a> Nat. Rev. Neurol. 5, 419-426 (2009).</li></ol>

Maligna gliom, såsom glioblastoma multiforme, representerar de vanligaste primära hjärntumörer och har en dyster prognos 4. Överlevnaden hos patienter som drabbats av GBM har förblivit i stort sett oförändrad under det senaste decenniet (dvs, 9-12 månader efter diagnos) Trots framsteg inom kirurgi, strålning och kemoterapi 5. Funktionerna i en lämplig modell för studier av gliom behandlingen ska innehålla en reproducerbar tumörplacering och tillväxt av cellerna som en relativt diskre...

<table border="1"><tbody><tr><td> Lab Standard Stereotaktisk Instrutment </td><td> Stoelting Mus och råtta Adapter </td></tr><tr><td> Betadin </td><td> 100% EtOH </td></tr><tr><td> 70% EtOH </td><td> 50% aceton </td></tr><tr><td> 6 &quot;Q-tips </td><td> Spritkompresser </td></tr><tr><td> Hamilton-spruta 80.008 </td><td> Ethicon 5-0 PD </td></tr><tr><td> 1701 SN 31-33G / 1 &quot;/ PT3 nål </td><td> 1 ml sprutor </td></tr><tr><td> 25G nålar </td><td> Värmedyna </td></tr><tr><td> Konstgjord Tears Salva </td><td> Mycket fin spets permanent markör </td></tr></tbody></table>

combination radiotherapy in an orthotopic mouse brain tumor model

Glioblastoma multiforme (GBM) är den vanligaste och aggressiva vuxna primära hjärntumörer 1. Under senare år har det skett betydande framsteg i förståelsen av mekanik av tumör invasion, och direkt intracerebral inokulering av tumör ger möjlighet att observera invasiva processen i en fysiologiskt lämplig miljö 2. När det gäller de mänskliga hjärntumörer gäller är ortotopisk modellerna för närvarande finns tillgängliga antingen genom stereotaxisk injektion av cellsuspensioner eller implantera en solid bit av tumören genom en komplicerad kraniotomi förfarande 3. I vår teknik vi skörda cellerna från vävnadskultur för att skapa en cellsuspension användes för att implantera direkt in i hjärnan. Varaktigheten av kirurgi är ca 30 minuter, och som musen måste vara i ett konstant kirurgisk plan, är en injicerbar bedövningsmedel. Den mus placeras i en stereotaxisk jigg genom Stoetling (figur 1). AftER det kirurgiska området renas och beredas, görs ett snitt, och om bregma är belägen för att bestämma läget av kraniotomi. Placeringen av kraniotomi är 2 mm till höger och 1 mm rostralt om bregma. Djupet är 3 mm från ytan av skallen, och cellerna injiceras med en hastighet av 2 pl var 2 minuter. Huden sutureras med 5-0 PDS och musen är tillåten att vakna upp på en värmedyna. Enligt vår erfarenhet beroende på cellinjen, kan behandlingen ske från 7-10 dagar efter operation. Avgivning av läkemedel är beroende av läkemedelskompositionen. För strålbehandling mössen bedövas, och placerades i en skräddarsydd jigg. Bly täcker musens kropp och exponerar endast hjärna musen. Studiet av tumörbildning och utvärdering av nya terapier för GBM kräver noggranna och reproducerbara hjärnan modellerna tumör djur. Sålunda vi använder detta ortotopisk hjärnan modell för att studera interaktionen av mikroomgivningen av hjärnan och tumören, för att testa effectivenESS i olika terapeutiska medel med och utan strålning.

Watch this Scientific Journal Video about Combination Radiotherapy in an Orthotopic Mouse Brain Tumor Model at JoVE.com

Combination Radiotherapy in an Orthotopic Mouse Brain Tumor Model

Syftet med denna artikel är att beskriva användningen av en ortotopisk glioblastom modell för chemoradiation studier. Denna artikel kommer gå igenom cellbearbetningen, implantera och strålbehandling av musen med en intrakraniell modell.

Kombination Strålbehandling i en ortotop mus hjärntumör modell

Glioblastoma multiforme (GBM) are the most common and aggressive adult primary brain tumors1. In recent years there has been substantial progress in the ...

Research

JoVE Journal

Medicine

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

En Orthotopic Modell av murina blåscancer

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Multi-photon avbildning av tumörcellen invasion i ett Orthotopic musmodell av oral skivepitelcancer

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

In vivo bioluminescence avbildning av tumör Hypoxi Dynamics i bröstcancer metastaser i hjärnan i en musmodell

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment

En ortotopisk blåstumör modell och utvärdering av Intravesikal Sarna behandling

We present a novel method for treating bladder cancer with intravesically delivered small activating RNA (saRNA) in an orthotopic xenograft mouse bladder ...

An Orthotopic Mouse Model of Anaplastic Thyroid Carcinoma

En Orthotopic musmodell av Anaplastisk thyroidcarcinoma

Several types of animal models of human thyroid carcinomas have been established, including subcutaneous xenograft and orthotopic implantation of cancer ...

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

En Orthotopic blåscancer modell för Gene Delivery Studier

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

En Orthotopic Murina Model of Human Prostate cancer metastaser

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

An Orthotopic Glioblastoma Mouse Model Maintaining Brain Parenchymal Physical Constraints and Suitable for Intravital Two-photon Microscopy

En Orthotopic Glioblastoma musmodell Underhålla hjärnan parenkymal fysiska begränsningar och Passar Intravital Två-foton mikroskopi

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive form of brain tumors with no curative treatments available to date.
Murine models of this pathology ...

Tumor Treating Field Therapy in Combination with Bevacizumab for the Treatment of Recurrent Glioblastoma

Tumör Behandla Fältterapi i kombination med bevacizumab för behandling av återkommande glioblastom

A novel device that employs TTF therapy has recently been developed and is currently in use for the treatment of recurrent glioblastoma (rGBM). It was FDA ...

Dynamic Contrast Enhanced Magnetic Resonance Imaging of an Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model

Dynamisk kontrast Förbättrad Magnetic Resonance Imaging av en Orthotopic bukspottkörtelcancer musmodell

Dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging (DCE-MRI) has been limitedly used for orthotopic pancreatic tumor xenografts due to severe ...