Name: rnai-mediated gene knockdown and in vivo diuresis assay in adult female aedes aegypti mosquitoes
Uploaded: 2012-07-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes at JoVE.com

저자는이 프로토콜의 그녀 비판적 의견 빅토리아 카펜터 감사드립니다.

부 전 - 성인 Aedes aegypti 모기에 RNAi - 중재 유전자 최저. 실험 개요는 그림 1을 참조하십시오. 1. dsRNA 합성 <ol><li> 관심과 제어 dsRNAs의 유전자에 대한 구체적인 dsRNAs을 합성. 주 : 우리는 3 &#39;특정 cDNA 2 월말과 5 부착된 T7 뇌관 시퀀스로&#39;에서 끝 (5&#39;-TAA 전술 GAC TCA CTA 위치한 300-500 기본 쌍의 범위에서 PCR 단편을 위해 개발 primers를 추천 TAG GG-3 &#39;)....

<ol>
	<li>Drake, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Aquaporin+gene+family+of+the+yellow+fever+mosquito,+Aedes+aegypti.">The Aquaporin gene family of the yellow fever mosquito, Aedes aegypti.</a> PloS one. 5, e15578 (2010).</li><li>Shepard, A. R., Jacobson, N., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+quantitative+PCR+primer+location+for+short+interfering+RNA+efficacy+determination.">Importance of quantitative PCR primer location for short interfering RNA efficacy determination.</a> Analytical biochemistry. 344, 287-288 (2005).</li><li>Altschul, S. 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사용되는 RNAi 프로토콜은 캘리 포니 아주 리버 사이드 6,7 대학에서 알렉산더 Raikhel의 연구실에서 개발 Garver 및 Dimopoulos 사에 의해 출판 프로토콜과 비슷했습니다. 이 비디오 프로토콜에 표시된 실험적 접근 방법은 생체내 환경에의 곤충 이뇨에 관련된 유전자를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 곤충, Malpighian의 tubules의 배설 기관은 이뇨를위한 &#39;단순&#39;모델 시스템으로...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약이나 장비의 명칭 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> MEGAscript T7 고수익 키트 </td><td> Ambion 주식 회사 </td><td> AM1334 </td><td></td></tr><tr><td> PBS 버퍼 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> P4417 </td><td></td></tr><tr><td> 플라스틱 튜브 </td><td> 지역 업체 </td><td></td><td> PVC </td></tr><tr><td> 한 ML 플라스틱 피펫 팁 </td><td> VWR </td><td> 83007-376 </td><td> 블루 팁 </td></tr><tr><td> 한 ML의 주사기 </td><td> Becton, 디킨스와 회사 </td><td> 309,602 </td><td></td></tr><tr><td> 가위 </td><td> 지역 업체 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 금속 바늘 </td><td> 캐롤라이나 체액 </td><td> 654,307 </TD&gt; <td> 크기 5 </td></tr><tr><td> 패드 들아 </td><td> Genesee 과학 </td><td> 789,060 </td><td></td></tr><tr><td> 배터리 구동 흡인기 W / 컬렉션 유리병 </td><td> UPMA 실험실 </td><td> IPMM 2000 </td><td></td></tr><tr><td> 파인 팁 포셉 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> 14,095 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 모세관 바늘 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> 1B200-6 </td><td></td></tr><tr><td> 스테레오 해부 현미경 </td><td> Leica 마이크로 시스템즈 </td><td> S6D </td><td></td></tr><tr><td> 분석 정밀도의 균형 </td><td> Mettler 톨레도 </td><td> AB54S </td><td></td></tr><tr><td> 자당 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> 84,097 </td><td></td></tr><tr><td> 1 파인트들이 줄지어 종이 컵 닦았단 </td><td> 지역 업체 </td><td></td><td> 제조 수프 컵 </td></tr><tr><td> 메쉬 네트 </td><td> 지역 업체 </td><td></td><td> 플라스틱 플라이 거즈 </td></tr></tbody></table>

rnai-mediated gene knockdown and in vivo diuresis assay in adult female aedes aegypti mosquitoes

이 비디오 프로토콜은 곤충에서 특정 유전자를 분해하고 배설 률을 측정하는 소설 bioassay를 수행하기위한 효과적인 기법을 보여줍니다. 이 방법은 곤충의 이뇨 과정의 이해를 얻는 데 사용하며 단일 혈액 식사에서 액체의 엄청난 양의 걸릴 수있는 혈액 먹이를 arthropods의 이뇨의 연구에 특히 유용합니다. 생체내의 이뇨 분석에서와 결합된 이러한 RNAi - 중재 유전자 최저는 Aedes aegypti 모기 이뇨 1 aquaporin 유전자의 RNAi-매개 최저의 효과를 연구하기 위해 한센병 연구소에 의해 개발되었다. 프로토콜은 두 부분의 설정은 다음과 같습니다 첫 번째 데모는 간단한 모기 분사 장치를 구성하는 방법과 RNAi - 중재 유전자 최저에 대한 모기의 흉부에 dsRNA를 준비하고 주입하는 방법을 보여줍니다. 두 번째 데모를 결정하는 방법을 보여줍니다생체내의 bioassay에를 사용하여 모기의 배설 속도.

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RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

이 프로토콜에서 우리는 함께 RNAi - 중재 유전자 입을를 결합<em&gt; 생체내에서</em관심있는 유전자의 효과 최저를 공부하기&gt; 이뇨 분석은 모기 유체 배설에 있습니다.

RNAi - 중재 유전자 최저 및<em&gt; VIVO에서</em성인 여자의&gt; 이뇨 분석<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; 모기

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

Research

JoVE Journal

Biology

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

Injection of dsRNA into Female A. aegypti Mosquitos

여성 A. aegypti 모기에의 dsRNA의 분사

Reverse genetic approaches have proven extremely useful for determining  which genes underly resistance to vector pathogens in mosquitoes.  This video ...

연구

생물학

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트렌스 제닉 모기를 구하는 A. aegypti의 태아의 Microinjection

In this video, Nijole Jasinskiene demonstrates the methodology employed to generate transgenic Aedes aegypti mosquitoes, which are vectors for dengue ...

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