Name: tissue preparation and immunostaining of mouse sensory nerve fibers innervating skin and limb bones
Uploaded: 2012-01-26T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tissue Preparation and Immunostaining of Mouse Sensory Nerve Fibers Innervating Skin and Limb Bones at JoVE.com

نشكر الدكتور يوري M. Usachev لمساعدته في توحيد الأولي المجهري مبائر / التصوير من أخمصي الماوس immunostaining خزعة لكمة ، والدكتور هاموند دونا لام لمساعدتها المستمرة والانتقادات البناءة في هذا العمل. وقد تم تمويل هذا العمل عن طريق المنح المقدمة من NINDS / المعاهد الوطنية للصحة (NS069898) ، ومنح جائزة تنمية فكرة من وزارة الدفاع البروستاتا برنامج أبحاث السرطان (وزارة الدفاع - 101096 - PCRP) لDPM

1. الحيوان الإرواء تمت الموافقة على تنفيذ جميع الإجراءات الحيوانية في هذه الدراسة من قبل المؤسسات ورعاية الحيوان اللجنة استخدم من جامعة أيوا ، واتبع الإرشادات المعاهد الوطنية للصحة لاستخدام الحيوانات في البحوث. <ol style=";text-align:right...

<ol>
	<li>Hoffman, E. M., Schechter, R., Miller, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fixative+Composition+Alters+Distributions+of+Immunoreactivity+for+Glutaminase+and+Two+Markers+of+Nociceptive+Neurons,+Nav+1.8+and+TRPV1,+in+the+Rat+Dorsal+Root+Ganglion.">Fixative Composition Alters Distributions of Immunoreactivity for Glutaminase and Two Markers of Nociceptive Neurons, Nav 1.8 and TRPV1, in the Rat Dorsal Root Ganglion.</a> Journal of Histochemistry &#38; Cytochemistry. 58, 329-344 (2010).</li><li>Neves, J. D. S., Omar, N. F., Narvaes, E. A. O., Gomes, J. R., Novaes, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+different+decalcifying+agents+on+EGF+and+EGFR+immunostaining.">Influence of different decalcifying agents on EGF and EGFR immunostaining.</a> Acta Histochemica. 113, 484-488 (2011).</li><li>Watson, R. E., Wiegand, S. J., Clough, R. W., Hoffman, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+cryoprotectant+to+maintain+long-term+peptide+immunoreactivity+and+tissue+morphology.">Use of cryoprotectant to maintain long-term peptide immunoreactivity and tissue morphology.</a> Peptides. 7, 155-159 (1986).</li><li>Yen, L. D., Bennett, G. J., Ribeiro-da-Silva, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sympathetic+sprouting+and+changes+in+nociceptive+sensory+innervation+in+the+glabrous+skin+of+the+rat+hind+paw+following+partial+peripheral+nerve+injury.">Sympathetic sprouting and changes in nociceptive sensory innervation in the glabrous skin of the rat hind paw following partial peripheral nerve injury.</a> The Journal of Comparative Neurology. 495, 679-690 (2006).</li><li>Boyette-Davis, J., Xin, W., Zhang, H., Dougherty, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraepidermal+nerve+fiber+loss+corresponds+to+the+development+of+Taxol-induced+hyperalgesia+and+can+be+prevented+by+treatment+with+minocycline.">Intraepidermal nerve fiber loss corresponds to the development of Taxol-induced hyperalgesia and can be prevented by treatment with minocycline.</a> Pain. 152, 308-313 (2011).</li><li>Bloom, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breast+Cancer-Induced+Bone+Remodeling,+Skeletal+Pain,+and+Sprouting+of+Sensory+Nerve+Fibers.">Breast Cancer-Induced Bone Remodeling, Skeletal Pain, and Sprouting of Sensory Nerve Fibers.</a> The Journal of Pain. 12, 698-711 (2011).</li><li>Constantin, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+Tumor+Necrosis+Factor+&#945;+(TNF&#945;)+Requires+TNF+Receptor+Type+2+to+Generate+Heat+Hyperalgesia+in+a+Mouse+Cancer+Model.">Endogenous Tumor Necrosis Factor &#945; (TNF&#945;) Requires TNF Receptor Type 2 to Generate Heat Hyperalgesia in a Mouse Cancer Model.</a> J. Neurosci. 28, 5072-5081 (2008).</li><li>Jankowski, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitization+of+Cutaneous+Nociceptors+after+Nerve+Transection+and+Regeneration:+Possible+Role+of+Target-Derived+Neurotrophic+Factor+Signaling.">Sensitization of Cutaneous Nociceptors after Nerve Transection and Regeneration: Possible Role of Target-Derived Neurotrophic Factor Signaling.</a> The Journal of Neuroscience. 29, 1636-1647 (2009).</li><li>Jimenez-Andrade, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathological+Sprouting+of+Adult+Nociceptors+in+Chronic+Prostate+Cancer-Induced+Bone+Pain.">Pathological Sprouting of Adult Nociceptors in Chronic Prostate Cancer-Induced Bone Pain.</a> J. Neurosci. 30, 14649-14656 (2010).</li><li>Persson, A. -. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium-calcium+exchanger+and+multiple+sodium+channel+isoforms+in+intra-epidermal+nerve+terminals.">Sodium-calcium exchanger and multiple sodium channel isoforms in intra-epidermal nerve terminals.</a> Molecular Pain. 6, 84-84 (2010).</li><li>Ohshima, M., Miyake, M., Takeda, M., Kamijima, M., Sakamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staphylococcal+Enterotoxin+B+Causes+Proliferation+of+Sensory+C-Fibers+and+Subsequent+Enhancement+of+Neurogenic+Inflammation+in+Rat+Skin.">Staphylococcal Enterotoxin B Causes Proliferation of Sensory C-Fibers and Subsequent Enhancement of Neurogenic Inflammation in Rat Skin.</a> Journal of Infectious Diseases. 203, 862-869 (2011).</li><li>Johnson, M. S., Ryals, J. M., Wright, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+loss+of+peptidergic+intraepidermal+nerve+fibers+in+an+STZ-induced+mouse+model+of+insensate+diabetic+neuropathy.">Early loss of peptidergic intraepidermal nerve fibers in an STZ-induced mouse model of insensate diabetic neuropathy.</a> Pain. 140, 35-47 (2008).</li></ol>

هنا وقد فصلنا في طرق تحضير الجلد الماوس والمقاطع النسيج العظمي لimmunostaining واكتشاف الألياف العصبية الطرفية الحسية. المقاطع التي تنتج من الخزعات كمة أخمصي تحتوي على كل من الجلد غير المشعر وشعر ، والذي يعني أنه يمكن استخدام البروتوكول على أي نوع الجلد. ويمكن أيضا أن تستخ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم المادة </td><td> نوع </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليق </td></tr><tr><td> 3mm هاريس الصغرى ، لكمة </td><td> مادة </td><td> تيد بيلا </td><td> 15094 </td><td></td></tr><tr><td> مضخة نضح </td><td> مادة </td><td> VWR الدولية </td><td> 23609-170 </td><td></td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد </td><td> الكاشف </td><td> فيشر العلمية </td><td> T353 </td><td></td></tr><tr><td> البكريك حمض </td><td> الكاشف </td><td> سيغما الدريخ </td><td> 239801 </td><td></td></tr><tr><td> مجمع أكتوبر تضمينها </td><td> الكاشف </td><td> الأنسجة تيك </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> خلوي تجميد المبردة الهباء الجوي رذاذ </td><td>مادة </td><td> سيطرة الشركة </td><td> 3118 </td><td></td></tr><tr><td> مصل الماعز </td><td> الكاشف </td><td> سيغما الدريخ </td><td> G9023 </td><td></td></tr><tr><td> درج الحضانة وغطاء للImmunostaining (كبير) </td><td> مادة </td><td> RPI كورب </td><td> 248270 (الدرج) 248270 - A (غطاء) </td><td></td></tr><tr><td> ImmEdge القلم حاجز مسعور </td><td> مادة </td><td> ناقلات مختبرات </td><td> H - 4000 </td><td></td></tr><tr><td> فراشي الشعر البعير (# 1 سمك) </td><td> مادة </td><td> تيد بيلا </td><td> 11859 </td><td></td></tr><tr><td> المؤيدة لونغ الذهب تركيب المتوسطة </td><td> الكاشف </td><td> Invitrogen </td><td> P36930 </td><td></td></tr></tbody></table>

tissue preparation and immunostaining of mouse sensory nerve fibers innervating skin and limb bones

كشف والتجهيز الأولي للالفيزيائية والكيميائية وتنمية مداركه الحسية الحرارية بواسطة الألياف العصبية الحسية المحيطية هو مفتاح الإدراك الحسي في الحيوانات والبشر. هذه الألياف العصبية الطرفية الحسية أعرب عدد كبير من المستقبلات والبروتينات التي كشف القناة الايونية والشروع في تنمية مداركه الحسية محددة. الأساليب المتاحة لتوصيف الخصائص الكهربائية للألياف العصبية الحسية المحيطية التعصيب الجلد ، والتي يمكن أيضا أن تستخدم لتحديد التعبير الوظيفي للبروتينات محددة القناة الايونية في هذه الألياف. ومع ذلك ، أساليب مماثلة الكهربية ليست متاحة (وهنا أيضا من الصعب تطوير) للكشف عن التعبير الفنية من المستقبلات والبروتينات القناة الايونية في الألياف العصبية الطرفية الحسية التعصيب الأجهزة الحشوية الأخرى ، بما في ذلك الأنسجة الأكثر تحديا مثل العظام. وعلاوة على ذلك ، لا يمكن أن تكون هذه الطرق الكهربية المستخدمة في تحديد التعبير عن بروتين غير منفعلق في الألياف العصبية الطرفية الحسية. لذلك ، immunostaining عينات الأنسجة المحيطية / المتأصل للfivers العصب الحسي يوفر أفضل طريقة ممكنة لتحديد التعبير عن بروتينات معينة من الاهتمام في هذه الألياف العصبية. حتى الآن ، وقد استخدمت معظم الدراسات التعبير البروتين في الخلايا العصبية الحسية immunostaining الإجراءات في العقد الحسية ، حيث يقتصر المعلومات إلى التعبير عن بروتينات معينة في خلايا الجسم من أنواع معينة أو مجموعات فرعية من الخلايا العصبية الحسية. نحن هنا تقرير مفصل أساليب / بروتوكولات لإعداد عينات الأنسجة المحيطية / المتأصل للimmunostaining من الألياف العصبية الطرفية الحسية. نحن الطرق بالتفصيل على وجه التحديد لإعداد الجلد أو أخمصي لكمة خزعة والعظام (عظم الفخذ) مقاطع من الفئران لimmunostaining الطرفية من الألياف العصبية الحسية. هذه الأساليب ليست المفتاح الوحيد لتحديد نوعية التعبير البروتين في الخلايا العصبية الحسية المحيطية ، ولكن أيضا توفير طريقة المقايسة الكمية للتحديد التغيرات في مستويات بروتين تعبير في أنواع معينة أو مجموعات فرعية من الألياف الحسية ، وكذلك لتحديد التغيرات المورفولوجية و / أو التشريحية في عدد وكثافة الألياف الحسية أثناء حالات مرضية مختلفة. كذلك ، لا تقتصر هذه الأساليب لتلطيخ من الألياف العصبية الحسية فقط ، ولكن يمكن أن تستخدم أيضا لتلطيخ أي نوع من أنواع الألياف العصبية في الجلد والعظام والأنسجة الحشوية.

Watch this Scientific Journal Video about Tissue Preparation and Immunostaining of Mouse Sensory Nerve Fibers Innervating Skin and Limb Bones at JoVE.com

Tissue Preparation and Immunostaining of Mouse Sensory Nerve Fibers Innervating Skin and Limb Bones

تحديد Immunocytochemical الطرفية من الألياف العصبية الحسية فرعية (والكشف عن بروتين تعبير فيها) هي المفتاح لفهم الآليات الجزيئية الكامنة وراء الإحساس الطرفية. نحن هنا تصف طرق تحضير عينات الأنسجة المحيطية / الحشوية ، مثل العظام والجلد أطرافهم ، لimmunostaining محددة من الألياف العصبية الطرفية الحسية.

تحضير الأنسجة وImmunostaining من الألياف العصبية الحسية ماوس التعصيب الجلد والعظام الاطراف

Detection and primary processing of physical, chemical and thermal sensory stimuli by peripheral sensory nerve fibers is key to sensory perception in ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Mouse Brain Tissue for Immunoelectron Microscopy

إعداد أنسجة المخ فأرة للالميكروسكوب Immunoelectron

Transmission electron microscopy (TEM) is extremely useful for visualizing microglial, oligodendrocytic, astrocytic, and neuronal subcellular compartments ...

Imaging Pheromone Sensing in a Mouse Vomeronasal Acute Tissue Slice Preparation

التصوير فرمون الاستشعار في الميكعي ماوس الحادة الأنسجة إعداد شريحة

Peter Karlson and Martin L&uuml;scher used the term pheromone for the first time in 19591 to describe chemicals used for intra-species communication. ...

Selective Tracing of Auditory Fibers in the Avian Embryonic Vestibulocochlear Nerve

انتقائية للبحث عن المفقودين من ألياف العصب السمعي في الطيور الدهليزي القوقعي الجنينية

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling ...

An Isolated Semi-intact Preparation of the Mouse Vestibular Sensory Epithelium for Electrophysiology and High-resolution Two-photon Microscopy

استعدادا شبه سليمة المعزولة من الفأر الدهليزي الظهارة الحسية للالكهربية وعالية الدقة الميكروسكوب ثنائي الفوتون

Understanding vestibular hair cells function  under normal conditions, or how trauma, disease, and aging disrupt this  function is a vital step in the ...

In Vivo Two-Photon Microscopy of Single Nerve Endings in Skin

In Vivo Two-Photon Microscopy of Single Nerve Endings in Skin

في فيفو الميكروسكوب ثنائي الفوتون من النهايات العصبية في الجلد واحدة

Nerve endings in skin are involved in physiological processes such as sensing1 as well as in pathological processes such as neuropathic pain2. Their ...

Flat Mount Imaging of Mouse Skin and Its Application to the Analysis of Hair Follicle Patterning and Sensory Axon Morphology

شقة التصوير من جبل ماوس الجلد وتطبيقه على تحليل الشعر جريب الزخرفة والحسية أكسون الصرف

Skin is a highly heterogeneous tissue. Intra-dermal structures include hair follicles, arrector pili muscles, epidermal specializations (such as Merkel ...

Whole-mount Imaging of Mouse Embryo Sensory Axon Projections

كله جبل التصوير من جنين فأر التوقعات الحسية أكسون

The visualization of full-length neuronal projections in embryos is essential to gain an understanding of how mammalian neuronal networks develop. Here we ...

Three-dimensional Imaging and Analysis of Mitochondria within Human Intraepidermal Nerve Fibers

تصوير ثلاثي الأبعاد وتحليل الميتوكوندريا داخل الألياف العصبية إينترايبيديرمال البشرية

The goal of this protocol is to study mitochondria within intraepidermal nerve fibers. Therefore, 3D imaging and analysis techniques were developed to ...

A Method to Target and Isolate Airway-innervating Sensory Neurons in Mice

طريقة لاستهداف وعزل مجرى الهواء-التعصيب الخلايا العصبية الحسية في الفئران

Somatosensory nerves transduce thermal, mechanical, chemical, and noxious stimuli caused by both endogenous and environmental agents. The cell bodies of ...

Physiological Preparation of Hair Cells from the Sacculus of the American Bullfrog (Rana catesbeiana)

Physiological Preparation of Hair Cells from the Sacculus of the American Bullfrog Rana catesbeiana

إعداد الفسيولوجية للخلايا الشعر من كييس من ضفدع الثور (<em&gt; رنا catesbeiana</em&gt;)

The study of hearing and balance rests upon insights drawn from biophysical studies of model systems. One such model, the sacculus of the American ...